| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| ·IL-33 的研究进展及其生物学功能 | 第12-15页 |
| ·IL-33 结构与表达 | 第12-13页 |
| ·IL-33 的受体和信号通路 | 第13页 |
| ·IL-33 的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·IL-33 与疾病的关系 | 第14-15页 |
| ·RNAi 的研究进展及应用 | 第15-18页 |
| ·RNAi 的原理 | 第15-16页 |
| ·病毒载体介导的 RNAi | 第16-17页 |
| ·RNAi 的应用 | 第17-18页 |
| ·COPD | 第18-20页 |
| ·吸烟和 COPD 的关系 | 第18页 |
| ·COPD 的发病机制和病理学改变 | 第18-19页 |
| ·COPD 的危害 | 第19-20页 |
| ·本论文的研究意义和技术路线 | 第20-21页 |
| ·本论文的研究意义 | 第20页 |
| ·本论文的技术路线 | 第20-21页 |
| 第2章 RNAi 逆转录病毒表达载体的构建及鉴定 | 第21-32页 |
| ·针对小鼠 IL-33 siRNA 的设计与合成 | 第21-22页 |
| ·RNAi 靶序列的选取原则 | 第21页 |
| ·shRNA 序列的设计与合成 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·质粒和菌株 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·溶液的配置 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·oligo DNA 进行退火 | 第25-26页 |
| ·pRNATin-H1.4/Retro 质粒转化感受态细菌 DH5α | 第26-27页 |
| ·质粒小量提取并酶切鉴定 | 第27页 |
| ·酶切获取大片段 | 第27-28页 |
| ·连接 | 第28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·酶切鉴定 | 第28页 |
| ·测序鉴定 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-31页 |
| ·pRNATin-H1.4/Retro 酶切鉴定 | 第29页 |
| ·pRNATin-H1.4/Retro 质粒提取 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第3章 重组逆转录病毒的包装 | 第32-37页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·包装细胞 PT67 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·溶液的配置 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的大量提取 | 第33-34页 |
| ·转染 PT67 并获得稳定转染细胞系 | 第34-35页 |
| ·病毒的获得、浓缩和保存 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 第4章 IL-33 干扰对吸烟诱导的小鼠急性肺炎的影响 | 第37-47页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·实验动物和香烟 | 第37页 |
| ·实验试剂 | 第37页 |
| ·实验器材 | 第37-38页 |
| ·溶液的配置 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·小鼠急性肺炎模型的建立 | 第39页 |
| ·组织标本的制备 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR | 第40-42页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第42-43页 |
| ·HE 染色 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-45页 |
| ·RT-PCR 的结果和干扰效果 | 第43页 |
| ·免疫组织化学的结果 | 第43-44页 |
| ·HE 染色的结果 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 结论与展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 综述 | 第53-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 发表论文 | 第62-63页 |
| 个人简历 | 第63页 |