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Gx-50通过小胶质细胞受体α7 nAChR及TLR4介导的抗炎作用

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 绪论第21-39页
    1.1 阿尔兹海默症第21-23页
    1.2 β 淀粉样蛋白与AD第23-27页
        1.2.1 β 淀粉样蛋白生成第23页
        1.2.2 淀粉样蛋白假说及Aβ 在AD中的作用第23-27页
    1.3 小胶质细胞与AD第27-28页
        1.3.1 小胶质细胞功能简介第27页
        1.3.2 小胶质细胞在AD中的作用第27-28页
    1.4 炎症与AD的关系第28-31页
        1.4.1 炎症在神经系统中的作用第28-29页
        1.4.2 慢性神经炎症与AD的关系第29-31页
    1.5 α7 烟碱型乙酰胆碱受体与AD第31-33页
        1.5.1 α7 烟碱型乙酰胆碱受体的功能第31-32页
        1.5.2 α7 nAChR抗炎作用第32-33页
    1.6 关于AD的药物研究第33-39页
        1.6.1 AD临床治疗药物现状及AD药物研究几大方向第33-34页
        1.6.2 抗炎药物研究第34-36页
        1.6.3 gx-50 的相关研究第36-39页
第二章 gx-50 对 α7 nAChR及其下游通路的作用第39-74页
    2.1 背景介绍第39-40页
    2.2 实验材料及仪器第40-42页
    2.3 试剂配制第42-44页
    2.4 实验方法第44-52页
        2.4.1 BV2小胶质系细胞培养及加药处理第44-45页
        2.4.2 CCK8细胞活性检测第45页
        2.4.3 受体结合实验第45页
        2.4.4 从细胞中提取RNA及反转录第45-46页
        2.4.5 荧光实时定量PCR(Quantitative Real time PCR )检测第46-47页
        2.4.6 从细胞中提取蛋白第47-48页
        2.4.7 免疫蛋白印迹(Western Blot)检测第48-50页
        2.4.8 细胞免疫荧光分析第50页
        2.4.9 细胞因子检测第50-51页
        2.4.10 统计学方法第51-52页
    2.5 实验结果第52-69页
        2.5.1 gx-50 可与 α7 nAChR结合并影响其表达第52-56页
        2.5.2 gx-50 对JAK2活化的影响第56页
        2.5.3 gx-50 对STAT3活化的影响第56-60页
        2.5.4 gx-50 对PI3K活化的影响第60-63页
        2.5.5 gx-50 对AKT活化的影响第63页
        2.5.6 gx-50 对小胶质细胞炎症介质表达的影响第63-67页
        2.5.7 α7 nAChR抑制后gx-50 对炎性因子IL-1β 的影响第67-69页
    2.6 结果讨论第69-74页
第三章 gx-50 对Aβ 诱导的神经炎症的影响第74-110页
    3.1 背景介绍第74-75页
    3.2 实验材料及仪器第75-76页
    3.3 试剂配制第76-77页
    3.4 实验方法第77-86页
        3.4.1 大鼠原代小胶质细胞分离和培养第77页
        3.4.2 流式细胞术(flow cytometry,FCM)鉴定小胶质细胞第77-78页
        3.4.3 痴呆小鼠模型第78页
        3.4.4 从细胞/组织中RNA提取及反转录第78-79页
        3.4.5 荧光实时定量PCR(Quantitative Real time PCR )检测第79-80页
        3.4.6 从细胞/组织中提取蛋白第80页
        3.4.7 小胶质细胞浆蛋白及核蛋白提取第80-81页
        3.4.8 Western Blot第81-82页
        3.4.9 转基因小鼠脑组织切片免疫荧光双染色分析第82-83页
        3.4.10 siRNA干扰TLR4表达实验第83页
        3.4.11 小鼠tlr4原核表达质粒构建和转染第83-86页
        3.4.12 统计学方法第86页
    3.5 实验结果第86-104页
        3.5.1 原代培养小胶质细胞的鉴定第86页
        3.5.2 gx-50 对转基因小鼠炎症介质表达的影响第86-90页
        3.5.3 gx-50 对转基因小鼠脑内小胶质细胞活化的影响第90-92页
        3.5.4 gx-50 对核转录因子NF-κB及IκB的影响第92-95页
        3.5.5 gx-50 对MAPKs通路磷酸化的影响第95-97页
        3.5.6 gx-50 对TLR4及其下游招募蛋白的影响第97-99页
        3.5.7 TLR4敲除后gx-50 对该通路的影响第99-101页
        3.5.8 TLR4过表达后gx-50 对该通路的影响第101-104页
    3.6 结果讨论第104-110页
第四章 全文总结第110-112页
参考文献第112-124页
致谢第124-126页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第126-128页

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