| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-15页 |
| 1 人eNOS基因简介 | 第8页 |
| 2 人eNOS基因表达的调控机制 | 第8-10页 |
| 3 p38信号通路在人eNOS基因表达中的作用 | 第10-11页 |
| 4 siRNA干扰在eNOS基因研究中的应用 | 第11-13页 |
| 5 研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 6 研究策略与技术路线 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-28页 |
| 1 细胞株 | 第15页 |
| 2 主要试剂 | 第15页 |
| 3 主要仪器 | 第15-16页 |
| 4 常用试剂的配制 | 第16-18页 |
| 5 细胞培养与处理 | 第18-19页 |
| ·siRNA-p38α的合成 | 第18-19页 |
| ·细胞培养 | 第19页 |
| ·细胞转染 | 第19页 |
| ·细胞刺激 | 第19页 |
| 6 双荧光报告系统 | 第19-20页 |
| ·细胞培养与转染 | 第19-20页 |
| ·荧光检测 | 第20页 |
| 7 Western Blot | 第20-22页 |
| ·蛋白提取与定量 | 第20-21页 |
| ·电泳 | 第21页 |
| ·转膜 | 第21页 |
| ·抗体结合与显色 | 第21-22页 |
| 8 RT-PCR | 第22-24页 |
| ·RNA提取 | 第22-23页 |
| ·逆转录 | 第23页 |
| ·PCR | 第23-24页 |
| 9 免疫荧光 | 第24-25页 |
| ·细胞培养与处理 | 第24-25页 |
| ·荧光抗体染色与观察 | 第25页 |
| 10 NO分析 | 第25-27页 |
| ·样品的处理 | 第25-26页 |
| ·NO的检测 | 第26-27页 |
| 11 统计学分析 | 第27-28页 |
| 结果 | 第28-36页 |
| 1 siRNA-p38α干扰对人eNOS基因启动子活性的影响 | 第28-29页 |
| 2 siRNA-p38α干扰对p38蛋白表达的影响 | 第29-30页 |
| 3 siRNA-p38α干扰对人eNOS mRNA表达的影响 | 第30-32页 |
| 4 siRNA-p38α干扰对人eNOS蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 5 siRNA-p38α干扰对人eNOS蛋白在细胞内表达和分布的影响 | 第33-34页 |
| 6 siRNA-p38α干扰对HUVEC细胞释放NO的影响 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-41页 |
| 1 双荧光素酶报告基因系统的建立 | 第36-37页 |
| 2 p38α过表达与eNOS启动子转录活性 | 第37页 |
| 3 p38α信号的激活下调eNOS的表达 | 第37-38页 |
| 4 低敲p38α上调eNOS的表达 | 第38-39页 |
| 5 存在问题与展望 | 第39-41页 |
| 小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 在学期间发表论文 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 英文缩略词表 | 第49页 |
