| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-19页 |
| 1.1 前言 | 第14-15页 |
| 1.2 5-HT的发现 | 第15页 |
| 1.3 5-HT的合成与分解 | 第15-16页 |
| 1.4 5-HT的生理功能 | 第16页 |
| 1.5 5-HT受体及其信号转导特征 | 第16-18页 |
| 1.6 本课题的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 刺参血清素受体 5-HTR基因全序列的克隆和特征分析 | 第19-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.2 总RNA提取 | 第21页 |
| 2.1.3 获取Aj5-HTR cDNA基因全长 | 第21-25页 |
| 2.1.4 Aj5-HTR生物信息学分析 | 第25页 |
| 2.2 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.2.1 RNA提取结果 | 第25-26页 |
| 2.2.2 Aj5-HTR cDNA基因扩增结果 | 第26页 |
| 2.2.3 Aj5-HTR cDNA基因全长序列的分析 | 第26-28页 |
| 2.2.4 Aj5-HTR氨基酸同源序列分析 | 第28-29页 |
| 2.2.5 Aj5-HTR系统发生分析 | 第29-30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 5-HT/5-HTR系统在刺参夏眠及代谢调控中的潜在功能分析 | 第32-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-36页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.2 不同组织总RNA提取 | 第33-34页 |
| 3.1.3 cDNA模板合成 | 第34页 |
| 3.1.4 实时荧光定量PCR | 第34-36页 |
| 3.2 结果与分析 | 第36-37页 |
| 3.2.1 Aj5-HT4R在刺参夏眠周期中的分布 | 第36页 |
| 3.2.2 在 5-HT刺激下的AjPFK表达量变化特征 | 第36-37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-39页 |
| 3.3.1 Aj5-HT4R在刺参夏眠周期中的分布 | 第37-38页 |
| 3.3.2 在 5-HT刺激下的AjPFK表达量变化特征 | 第38-39页 |
| 第四章 刺参血清素受体的亚细胞定位及内吞研究 | 第39-46页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-42页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.2 Aj5-HT4R-EGFP载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.1.3 HEK293细胞培养、冻存和复苏 | 第41-42页 |
| 4.1.4 细胞转染 | 第42页 |
| 4.1.5 用荧光染料染膜和染核 | 第42页 |
| 4.1.6 激光共聚焦荧光显微观测 | 第42页 |
| 4.2 结果与分析 | 第42-44页 |
| 4.2.1 Aj5-HT4R-EGFP表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 4.2.2 Aj5-HT4R-like在细胞中的定位 | 第43-44页 |
| 4.2.3 Aj5-HT4R-like在细胞中的内吞 | 第44页 |
| 4.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 AJ5-HT4R介导的胞内CAMP积累特征分析 | 第46-50页 |
| 5.1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第46-47页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第47页 |
| 5.1.3 实验耗材 | 第47页 |
| 5.1.4 Flag-Aj5-HT4R | 第47页 |
| 5.1.5 HEK293细胞培养、冻存和复苏 | 第47页 |
| 5.1.6 细胞转染 | 第47页 |
| 5.1.7 cAMP含量检测 | 第47-48页 |
| 5.2 结果与分析 | 第48-49页 |
| 5.3 讨论 | 第49-50页 |
| 第六章 总结与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第59页 |
