摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩略词 | 第14-16页 |
第1章 绪论 | 第16-18页 |
第2章 文献综述 | 第18-28页 |
2.1 IGF2基因与肿瘤中的异常表达 | 第18-26页 |
2.1.1 IGF2基因 | 第18-19页 |
2.1.2 IGF2多肽 | 第19-20页 |
2.1.3 IGF2表达调控 | 第20-24页 |
2.1.4 IGF2与肿瘤耐药性 | 第24-25页 |
2.1.5 肿瘤的IGF2靶向治疗 | 第25-26页 |
2.2 小结 | 第26-28页 |
第3章 材料与方法 | 第28-50页 |
3.1 实验材料 | 第28-31页 |
3.1.1 实验细胞系 | 第28页 |
3.1.2 实验试剂、仪器、耗材 | 第28-31页 |
3.2 实验方法 | 第31-50页 |
3.2.1 细胞培养 | 第31页 |
3.2.2 Cas9-gRNA引导的染色质免疫共沉淀 | 第31-38页 |
3.2.3 构建miR-483 和miR4835p载体 | 第38-39页 |
3.2.4 miRNA亲和结合共沉淀 | 第39-40页 |
3.2.5 Trizol提取RNA | 第40-41页 |
3.2.6 cDNA合成 | 第41页 |
3.2.7 基因组DNA提取 | 第41-42页 |
3.2.8 荧光定量PCR | 第42-43页 |
3.2.9 肿瘤克隆形成实验 | 第43-44页 |
3.2.10 MTT细胞增殖试验 | 第44-45页 |
3.2.11 Transwell肿瘤细胞侵袭实验 | 第45-46页 |
3.2.12 肿瘤细胞迁移划痕实验 | 第46页 |
3.2.13 IGF2基因印记水平分析 | 第46-47页 |
3.2.14 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第47-49页 |
3.2.15 统计分析 | 第49-50页 |
第4章 结果 | 第50-62页 |
4.1 细胞内miR-483-5p与IGF2启动子结合 | 第50-51页 |
4.2 合成的miR-483-5p与IGF2启动子相互作用 | 第51-53页 |
4.3 miR-483-5p上调IGF2表达 | 第53-54页 |
4.4 miR-483-5p增加肿瘤细胞增殖 | 第54页 |
4.5 miR-483-5p增加肿瘤克隆形成 | 第54-55页 |
4.6 miR-483-5p增加肿瘤侵袭性 | 第55页 |
4.7 miR-483-5p增加肿瘤迁徙性 | 第55-56页 |
4.8 miR-483-5p激活母源IGF2等位基因 | 第56-58页 |
4.9 miR-483-5p介导的IGF2启动子表观遗传调控 | 第58-60页 |
4.10 miR-483-5p激活AKT通路 | 第60-62页 |
第5章 讨论 | 第62-66页 |
第6章 结论 | 第66-68页 |
第7章 创新点 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-82页 |
作者简介及学期间所取得的科研成果 | 第82-84页 |
致谢 | 第84页 |