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MicroRNA 483对肿瘤IGF2基因印记表达的调控及机制

摘要第4-8页
Abstract第8-11页
英文缩略词第14-16页
第1章 绪论第16-18页
第2章 文献综述第18-28页
    2.1 IGF2基因与肿瘤中的异常表达第18-26页
        2.1.1 IGF2基因第18-19页
        2.1.2 IGF2多肽第19-20页
        2.1.3 IGF2表达调控第20-24页
        2.1.4 IGF2与肿瘤耐药性第24-25页
        2.1.5 肿瘤的IGF2靶向治疗第25-26页
    2.2 小结第26-28页
第3章 材料与方法第28-50页
    3.1 实验材料第28-31页
        3.1.1 实验细胞系第28页
        3.1.2 实验试剂、仪器、耗材第28-31页
    3.2 实验方法第31-50页
        3.2.1 细胞培养第31页
        3.2.2 Cas9-gRNA引导的染色质免疫共沉淀第31-38页
        3.2.3 构建miR-483 和miR4835p载体第38-39页
        3.2.4 miRNA亲和结合共沉淀第39-40页
        3.2.5 Trizol提取RNA第40-41页
        3.2.6 cDNA合成第41页
        3.2.7 基因组DNA提取第41-42页
        3.2.8 荧光定量PCR第42-43页
        3.2.9 肿瘤克隆形成实验第43-44页
        3.2.10 MTT细胞增殖试验第44-45页
        3.2.11 Transwell肿瘤细胞侵袭实验第45-46页
        3.2.12 肿瘤细胞迁移划痕实验第46页
        3.2.13 IGF2基因印记水平分析第46-47页
        3.2.14 染色质免疫共沉淀(ChIP)第47-49页
        3.2.15 统计分析第49-50页
第4章 结果第50-62页
    4.1 细胞内miR-483-5p与IGF2启动子结合第50-51页
    4.2 合成的miR-483-5p与IGF2启动子相互作用第51-53页
    4.3 miR-483-5p上调IGF2表达第53-54页
    4.4 miR-483-5p增加肿瘤细胞增殖第54页
    4.5 miR-483-5p增加肿瘤克隆形成第54-55页
    4.6 miR-483-5p增加肿瘤侵袭性第55页
    4.7 miR-483-5p增加肿瘤迁徙性第55-56页
    4.8 miR-483-5p激活母源IGF2等位基因第56-58页
    4.9 miR-483-5p介导的IGF2启动子表观遗传调控第58-60页
    4.10 miR-483-5p激活AKT通路第60-62页
第5章 讨论第62-66页
第6章 结论第66-68页
第7章 创新点第68-70页
参考文献第70-82页
作者简介及学期间所取得的科研成果第82-84页
致谢第84页

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