缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
前言 | 第15-17页 |
文献回顾 | 第17-29页 |
第一部分p~(12CDK2-AP1)与CD82相互作用预测及验证 | 第29-53页 |
实验一:计算机模板预测及验证p~(12CDK2-AP1)蛋白相互作用蛋白 | 第29-32页 |
1 材料 | 第29页 |
2 方法 | 第29页 |
3 结果 | 第29-32页 |
3.1 预测与p~(12CDK2-AP1)相结合的蛋白 | 第29-30页 |
3.2 利用计算机模板技术验证与p~(12CDK2-AP1)相结合的蛋白 | 第30-32页 |
实验二:真核表达载体pIRES2-EGFP-p~(12CDK2-AP1)和pIRES2-EGFP-CD82的构建 | 第32-44页 |
1 材料 | 第32-33页 |
1.1 质粒和菌株 | 第32页 |
1.2 实验主要酶类及化学试剂 | 第32页 |
1.3 主要仪器设备 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-36页 |
2.1 构建质粒pCDNA 3.1-FLAG-CD82 | 第33-35页 |
2.2 构建质粒pIRES2-EGFP-p~(12CDK2-AP1)和pIRES2-EGFP-CD82 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-44页 |
3.1 成功构建pIRES2-EGFP-p~(12CDK2-AP1)和pIRES2-EGFP-CD82质粒 | 第36-39页 |
3.2 p~(12CDK2-AP1) ,CD82及pIRES2-EGFP-p~(12CDK2-AP1),pIRES2-EGFP-CD82重组真核载体双酶切琼脂糖凝胶电泳图 | 第39-40页 |
3.3 重组质粒测序鉴定 | 第40-44页 |
实验三:利用Co-IP验证p~(12CDK2-AP1)蛋白和CD82蛋白的相互作用 | 第44-51页 |
1 材料 | 第44-45页 |
1.1 细胞系 | 第44页 |
1.2 实验主要酶类及化学试剂 | 第44页 |
1.3 主要仪器设备 | 第44-45页 |
1.4 主要溶液的配置 | 第45页 |
2 实验方法 | 第45-48页 |
2.1 293T细胞复苏及培养 | 第45-46页 |
2.2 复苏菌株及质粒提取 | 第46页 |
2.3 细胞转染 | 第46页 |
2.4 WB检测各组细胞中的蛋白表达情况 | 第46-47页 |
2.5 Co-IP 实验 | 第47-48页 |
3 结果 | 第48-51页 |
讨论 | 第51-53页 |
第二部分p~(12CDK2-AP1)与CD82相结合对OSCC-15细胞的生物学行为的影响 | 第53-68页 |
实验一:将p~(12CDK2-AP1)与CD82共同转染与OSCC-15细胞 | 第53-57页 |
1 材料 | 第53-54页 |
1.1 细胞系 | 第53页 |
1.2 实验主要仪器 | 第53-54页 |
1.3 实验试剂 | 第54页 |
2 方法 | 第54-55页 |
2.1 OSCC-15细胞复苏及培养 | 第54页 |
2.2 OSCC-15细胞传代 | 第54页 |
2.3 质粒提取 | 第54-55页 |
2.4 细胞转染 | 第55页 |
3 结果 | 第55-57页 |
实验二:p~(12CDK2-AP1)与CD82相互作用对OSCC-15细胞增殖、侵袭、凋亡的影响 | 第57-65页 |
1 材料 | 第57-58页 |
1.1 细胞系及质粒 | 第57页 |
1.2 主要实验仪器 | 第57页 |
1.3 实验试剂 | 第57-58页 |
2 实验方法 | 第58-60页 |
2.1 p~(12CDK2-AP1)与CD82相互作用对OSCC-15细胞增殖的影响 | 第58页 |
2.2 p~(12CDK2-AP1)与CD82相互作用对OSCC-15细胞侵袭的影响 | 第58-59页 |
2.3 p~(12CDK2-AP1)与CD82相互作用对OSCC-15细胞凋亡的影响 | 第59-60页 |
2.4 统计学分析 | 第60页 |
3 结果 | 第60-65页 |
3.1 增殖实验结果 | 第60-61页 |
3.2 侵袭实验结果 | 第61-63页 |
3.3 凋亡实验结果 | 第63-65页 |
讨论 | 第65-68页 |
第三部分:p~(12CDK2-AP1)与CD82相互作用对裸鼠移植瘤生长抑制的研究 | 第68-75页 |
1 材料 | 第68-69页 |
1.1 实验材料 | 第68页 |
1.2 实验动物 | 第68页 |
1.3 主要仪器设备及试剂 | 第68-69页 |
2 方法 | 第69-70页 |
2.1 细胞的培养与浓度配置 | 第69页 |
2.2 裸鼠动物分组 | 第69页 |
2.3 建立裸鼠移植瘤模型 | 第69-70页 |
2.4 观察相关实验指标 | 第70页 |
2.5 统计学结果分析 | 第70页 |
3 实验结果 | 第70-73页 |
讨论 | 第73-75页 |
小结 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
个人简历和研究成果 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |