| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 迟缓爱德华氏菌及其危害 | 第10-11页 |
| 1.2 反向疫苗学及其研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 反向疫苗学 | 第11-12页 |
| 1.2.2 反向疫苗学在迟缓爱德华氏菌上的应用 | 第12页 |
| 1.3 糖酵解途径中部分酶的多功能性 | 第12-16页 |
| 1.3.1 己糖激酶(Hexokinase,HK) | 第13页 |
| 1.3.2 磷酸葡萄糖异构酶(Phosphoglucose isomerase,PGI) | 第13-14页 |
| 1.3.3 磷酸果糖激酶Phosphofructokinase,PFK) | 第14页 |
| 1.3.4 磷酸丙糖异构酶(Triose phosphate isomerase,TPI) | 第14-15页 |
| 1.3.5 磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase,PGK) | 第15页 |
| 1.3.6 磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglycerate mutase,PGM) | 第15页 |
| 1.3.7 烯醇化酶(Enolase,ENO) | 第15-16页 |
| 1.3.8 丙酮酸激酶(Pyruvate kinase, PK) | 第16页 |
| 1.4 鱼类免疫系统 | 第16-19页 |
| 1.4.1 鱼类免疫器官 | 第17页 |
| 1.4.2 鱼类免疫细胞及免疫因子 | 第17-19页 |
| 1.5 本课题研究背景及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 糖酵解途径中部分酶的基因克隆、蛋白表达及纯化 | 第20-37页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.2.2 引物 | 第20页 |
| 2.2.3 细菌培养基及培养条件 | 第20页 |
| 2.2.4 实验试剂 | 第20-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 候选抗原蛋白重组表达载体的构建 | 第22-24页 |
| 2.3.2 重组候选抗原蛋白的表达与纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.3 内毒素的检测与去除 | 第25页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第25-36页 |
| 2.4.1 各候选抗原蛋白在不同菌中序列比对分析 | 第25-32页 |
| 2.4.2 各候选抗原蛋白重组质粒的构建 | 第32-33页 |
| 2.4.3 蛋白的表达与纯化 | 第33-34页 |
| 2.4.4 细菌内毒素的去除 | 第34-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第3章 候选抗原蛋白在斑马鱼上的免疫保护力分析 | 第37-41页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.3.1 斑马鱼驯养 | 第37页 |
| 3.3.2 斑马鱼免疫与攻毒 | 第37-38页 |
| 3.3.3 候选重组抗原蛋白相对免疫保护率的测定 | 第38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-40页 |
| 3.4.1 斑马鱼预攻毒 | 第38页 |
| 3.4.2 斑马鱼攻毒 | 第38-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 候选抗原蛋白在大菱鲆上的免疫保护效果 | 第41-45页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.2.1 菌株、细菌培养基及培养条件 | 第41页 |
| 4.2.2 实验动物 | 第41页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第41-42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42页 |
| 4.3.1 大菱鲆免疫 | 第42页 |
| 4.3.2 免疫后大菱鲆血清抗体效价测定 | 第42页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第42-44页 |
| 4.4.1 免疫后大菱鲆血清抗体效价分析 | 第42-43页 |
| 4.4.2 大菱鲆血清中抗体与其它海洋病原菌的交叉反应 | 第43-44页 |
| 4.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第5章 候选抗原蛋白免疫斑马鱼后免疫相关因子的表达差异分析 | 第45-53页 |
| 5.1 引言 | 第45页 |
| 5.2 实验材料 | 第45页 |
| 5.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 5.3.1 斑马鱼脾脏及肾脏RNA提取和逆转录 | 第45-47页 |
| 5.3.2 RT-qPCR | 第47页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第47-52页 |
| 5.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第6章 结论与展望 | 第53-54页 |
| 6.1 主要结论 | 第53页 |
| 6.2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附件 | 第61页 |
