| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第11-22页 |
| 1 气肿疽的概述 | 第11页 |
| 2 病原学的调查 | 第11-12页 |
| 2.1 气肿疽的形态特点和生长特性 | 第11页 |
| 2.2 培养特性与生化特性 | 第11-12页 |
| 2.3 气肿疽梭菌的抗原 | 第12页 |
| 3 流行病学调查 | 第12-13页 |
| 3.1 传染源 | 第12-13页 |
| 3.2 传播途径兙俥 | 第13页 |
| 3.3 易感动物 | 第13页 |
| 3.4 流行病学研究 | 第13页 |
| 4 临床症状和病理变化 | 第13-14页 |
| 5 气肿疽的防控与治疗 | 第14-15页 |
| 5.1 防控措施 | 第14页 |
| 5.2 治疗方法 | 第14-15页 |
| 5.3 提高养殖户意识和防疫人员素质 | 第15页 |
| 5.4 气肿疽使用疫苗情况 | 第15页 |
| 6 诊断方法 | 第15-18页 |
| 6.1 常规诊断 | 第16页 |
| 6.2 病原学诊断 | 第16-17页 |
| 6.3 血清学试验 | 第17-18页 |
| 7 核酸疫苗的概述 | 第18-20页 |
| 7.1 核酸疫苗的优点 | 第18-19页 |
| 7.2 核酸疫苗的机理 | 第19页 |
| 7.3 影响核酸疫苗的因素 | 第19-20页 |
| 7.4 核酸疫苗的前景 | 第20页 |
| 8 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 材料与方法 | 第22-38页 |
| 1 材料 | 第22-27页 |
| 1.1 菌株 | 第22页 |
| 1.2 试验动物和细胞株 | 第22页 |
| 1.3 载体 | 第22页 |
| 1.4 血清、培养液和抗体 | 第22页 |
| 1.5 酶与试剂 | 第22-23页 |
| 1.6 主要仪器设备 | 第23页 |
| 1.7 主要配制溶液与培养基制备 | 第23-27页 |
| 2 方法 | 第27-38页 |
| 2.1 涂片镜检 | 第27页 |
| 2.2 细菌分离纯化与生化试验 | 第27页 |
| 2.3 动物试验 | 第27-28页 |
| 2.4 分子生物学检测与鉴定 | 第28-29页 |
| 2.5 气肿疽梭菌CctA基因克隆 | 第29-32页 |
| 2.6 CctA基因序列测定及分析 | 第32页 |
| 2.7 重组质粒pcDNA3.1-CctA构建 | 第32-33页 |
| 2.8 Vero细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.9 重组质粒pcDNA3.1-CctA表达与分析 | 第34-36页 |
| 2.10 小鼠免疫试验 | 第36页 |
| 2.11 ELISA法检测血清中免疫球蛋白IgG1和IgG2a的含量 | 第36-37页 |
| 2.12 ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的含量 | 第37页 |
| 2.13 数据分析 | 第37-38页 |
| 结果 | 第38-46页 |
| 1 染色镜检 | 第38页 |
| 2 细菌血平板培养 | 第38页 |
| 3 生化试验鉴定 | 第38-39页 |
| 4 动物试验分析 | 第39页 |
| 5 CctA基因的扩增 | 第39-40页 |
| 6 pMD 19-T-CctA质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| 6.1 pMD 19-T-CctA质粒的PCR鉴定 | 第40页 |
| 6.2 pMD 19-T-CctA质粒的双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 7 序列测定及分析CctA基因 | 第41页 |
| 7.1 核苷酸和氨基酸同源性比对分析 | 第41页 |
| 8 pcDNA3.1-CctA重组表达质粒的鉴定 | 第41-42页 |
| 8.1 pcDNA3.1-CctA重组表达质粒PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 8.2 pcDNA3.1-CctA重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第42页 |
| 9 pcDNA3.1-CctA质粒CctA基因的表达鉴定 | 第42-44页 |
| 9.1 IFAT检测CctA基因 | 第42-43页 |
| 9.2 Western blotting检测CctA基因的表达 | 第43-44页 |
| 10 动物免疫试验特异性抗体表达 | 第44-46页 |
| 10.1 不同免疫组小鼠血清中IgG2a的表达水平 | 第44页 |
| 10.2 不同免疫组小鼠血清中IgG1的表达水平 | 第44-45页 |
| 10.3 不同免疫组小鼠血清中IL-4的表达水平 | 第45页 |
| 10.4 不同免疫组小鼠血清中IFN-γ的表达水平 | 第45-46页 |
| 讨论 | 第46-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录A(作者简介) | 第58-59页 |
| 附录B(在研期间发表的论文) | 第59页 |
