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β-抑制蛋白1及蛋白激酶B(PKB/Akt)在棉铃虫脱皮激素信号通路中的功能研究

中文摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第11-13页
第一章 前言第13-32页
    一. 激素协同调控昆虫的发育第13-18页
        1. 蜕皮激素的核受体途径第15-17页
        2. 蜕皮激素的膜受体途径第17-18页
    二. G蛋白偶联受体及其脱敏机制第18-24页
        1. G蛋白偶联受体第18-19页
        2. GPCR的脱敏机制第19-21页
        3. Arrestins在蛋白偶联受体中的作用第21-24页
    三. 胰岛素信号通路第24-31页
        1. 胰岛素对昆虫发育的调控第24-25页
        2. 胰岛素信号途径第25-31页
    四. 本论文科学问题、研究方案及研究意义第31-32页
第二章 β-arrestin1参与棉铃虫蜕皮激素信号脱敏的机理研究第32-55页
    一. 前言第32-33页
    二. 材料与方法第33-38页
        1. 材料第33-34页
        2. 方法第34-38页
            2.1 qRT-PCR第34页
            2.2 多克隆抗体的制备第34-35页
            2.3 免疫印迹第35页
            2.4 虫体RNA干扰和激素诱导第35页
            2.5 棉铃虫表皮细胞系中干扰和过表达第35-36页
            2.6 免疫共沉淀第36页
            2.7 β-arrestin1磷酸化分析第36页
            2.8 β-arrestin1突变体磷酸化水平检测第36-38页
    三.实验结果第38-52页
        1. Arrestins在棉铃虫中肠中的表达模式第38-39页
        2. β-arrestin1生物信息学分析第39-40页
        3. β-arrestin1多克隆抗体的制备第40-41页
        4. β-arrestin1在变态时期高表达第41-43页
        5. 筛选β-arrestin1干扰片段第43-44页
        6. β-arrestin1虫体干扰引起变态异常第44-46页
        7. β-arrestin1抑制20E信号通路基因表达第46-47页
        8. 20E引起β-arrestin1移位并与ErGPCR1相互作用第47-48页
        9. ErGPCR-和PKC-信号介导β-arrestin1磷酸化第48-50页
        10. Ser170和Ser234位的磷酸化决定β-arrestin1向细胞膜迁移第50-52页
    四. 讨论第52-55页
        1. β-arrestin1调控昆虫变态过程第52页
        2. β-arrestin1调控蜕皮激素信号的终止第52-53页
        3. ErGPCR-PKC通路调控β-arrestin1磷酸化和移位第53-55页
第三章 蜕皮激素通过抑制Akt的磷酸化拮抗胰岛素信号第55-72页
    一. 前言第55-57页
    二. 材料与方法第57-63页
        1. 材料第57页
        2. 方法第57-63页
            2.1 组织中总RNA的提取第57-58页
            2.2 第一链cDNA合成第58页
            2.3 Akt开放阅读框的克隆第58-60页
            2.4 构建PlEx-4-Akt-RFP-HiS重组质粒第60页
            2.5 重组质粒过表达第60-61页
            2.6 双链RNA的合成第61页
            2.7 免疫印记第61-63页
    三. 实验结果第63-70页
        1. Akt基因克隆和序列分析第63-64页
        2. 干扰Akt增强蜕皮激素引起棉铃虫表皮细胞系的凋亡第64-66页
        3. 20E通过调控Akt的磷酸化拮抗insulin途径第66-67页
        4. 20E通过上调PTEN介导对Akt磷酸化的抑制第67-68页
        5. 20E通过转录因子EcRB1以及USP1上调PTEN的表达第68-70页
    四. 讨论第70-72页
        1. 20E通过上调PTEN表达抑制Akt的磷酸化拮抗胰岛素途径第70-71页
        2. 胰岛素信号是棉铃虫生长调控的重要信号第71-72页
论文创新点总结及意义第72-73页
参考文献第73-82页
致谢第82-83页
在读期间已发表的文章第83-84页
附件第84页

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