中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-32页 |
一. 激素协同调控昆虫的发育 | 第13-18页 |
1. 蜕皮激素的核受体途径 | 第15-17页 |
2. 蜕皮激素的膜受体途径 | 第17-18页 |
二. G蛋白偶联受体及其脱敏机制 | 第18-24页 |
1. G蛋白偶联受体 | 第18-19页 |
2. GPCR的脱敏机制 | 第19-21页 |
3. Arrestins在蛋白偶联受体中的作用 | 第21-24页 |
三. 胰岛素信号通路 | 第24-31页 |
1. 胰岛素对昆虫发育的调控 | 第24-25页 |
2. 胰岛素信号途径 | 第25-31页 |
四. 本论文科学问题、研究方案及研究意义 | 第31-32页 |
第二章 β-arrestin1参与棉铃虫蜕皮激素信号脱敏的机理研究 | 第32-55页 |
一. 前言 | 第32-33页 |
二. 材料与方法 | 第33-38页 |
1. 材料 | 第33-34页 |
2. 方法 | 第34-38页 |
2.1 qRT-PCR | 第34页 |
2.2 多克隆抗体的制备 | 第34-35页 |
2.3 免疫印迹 | 第35页 |
2.4 虫体RNA干扰和激素诱导 | 第35页 |
2.5 棉铃虫表皮细胞系中干扰和过表达 | 第35-36页 |
2.6 免疫共沉淀 | 第36页 |
2.7 β-arrestin1磷酸化分析 | 第36页 |
2.8 β-arrestin1突变体磷酸化水平检测 | 第36-38页 |
三.实验结果 | 第38-52页 |
1. Arrestins在棉铃虫中肠中的表达模式 | 第38-39页 |
2. β-arrestin1生物信息学分析 | 第39-40页 |
3. β-arrestin1多克隆抗体的制备 | 第40-41页 |
4. β-arrestin1在变态时期高表达 | 第41-43页 |
5. 筛选β-arrestin1干扰片段 | 第43-44页 |
6. β-arrestin1虫体干扰引起变态异常 | 第44-46页 |
7. β-arrestin1抑制20E信号通路基因表达 | 第46-47页 |
8. 20E引起β-arrestin1移位并与ErGPCR1相互作用 | 第47-48页 |
9. ErGPCR-和PKC-信号介导β-arrestin1磷酸化 | 第48-50页 |
10. Ser170和Ser234位的磷酸化决定β-arrestin1向细胞膜迁移 | 第50-52页 |
四. 讨论 | 第52-55页 |
1. β-arrestin1调控昆虫变态过程 | 第52页 |
2. β-arrestin1调控蜕皮激素信号的终止 | 第52-53页 |
3. ErGPCR-PKC通路调控β-arrestin1磷酸化和移位 | 第53-55页 |
第三章 蜕皮激素通过抑制Akt的磷酸化拮抗胰岛素信号 | 第55-72页 |
一. 前言 | 第55-57页 |
二. 材料与方法 | 第57-63页 |
1. 材料 | 第57页 |
2. 方法 | 第57-63页 |
2.1 组织中总RNA的提取 | 第57-58页 |
2.2 第一链cDNA合成 | 第58页 |
2.3 Akt开放阅读框的克隆 | 第58-60页 |
2.4 构建PlEx-4-Akt-RFP-HiS重组质粒 | 第60页 |
2.5 重组质粒过表达 | 第60-61页 |
2.6 双链RNA的合成 | 第61页 |
2.7 免疫印记 | 第61-63页 |
三. 实验结果 | 第63-70页 |
1. Akt基因克隆和序列分析 | 第63-64页 |
2. 干扰Akt增强蜕皮激素引起棉铃虫表皮细胞系的凋亡 | 第64-66页 |
3. 20E通过调控Akt的磷酸化拮抗insulin途径 | 第66-67页 |
4. 20E通过上调PTEN介导对Akt磷酸化的抑制 | 第67-68页 |
5. 20E通过转录因子EcRB1以及USP1上调PTEN的表达 | 第68-70页 |
四. 讨论 | 第70-72页 |
1. 20E通过上调PTEN表达抑制Akt的磷酸化拮抗胰岛素途径 | 第70-71页 |
2. 胰岛素信号是棉铃虫生长调控的重要信号 | 第71-72页 |
论文创新点总结及意义 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
在读期间已发表的文章 | 第83-84页 |
附件 | 第84页 |