中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
一、综述 | 第9-16页 |
1.1 衰老与mi RNA | 第9-13页 |
1.1.1 组织衰老和miRNA | 第10-11页 |
1.1.2 细胞衰老和miRNA | 第11-12页 |
1.1.3 miRNA衰老研究新思路 | 第12-13页 |
1.2 氧化应激通路 | 第13-15页 |
1.3 本论文切入点与实验设计思路 | 第15-16页 |
二、不同年龄大鼠脑内miR-141-3p的表达变化 | 第16-23页 |
2.1 引言 | 第16页 |
2.2 材料与方法 | 第16-20页 |
2.2.1 实验材料和试剂 | 第16-17页 |
2.2.2 动物造模 | 第17页 |
2.2.3 miRNAs抽提 | 第17-19页 |
2.2.4 miRNAs深度测序 | 第19页 |
2.2.5 生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.6 qPCR验证miR-141-3p的表达量 | 第20页 |
2.3 实验结果 | 第20-23页 |
2.3.1 miR-141-3p的差异表达 | 第20-21页 |
2.3.2 差异表达的miR-141-3p潜在的靶基因和调控通路 | 第21-23页 |
三、细胞衰老对miR-141-3p及其靶基因的影响 | 第23-41页 |
3.1 引言 | 第23页 |
3.2 材料和方法 | 第23-35页 |
3.2.1 实验材料和试剂 | 第23-25页 |
3.2.2 细胞造模 | 第25-27页 |
3.2.3 SA-β-gal染色及活性测定 | 第27-28页 |
3.2.4 不同浓度H2O2对NIH3T3生长的影响 | 第28-29页 |
3.2.5 MDA浓度检测 | 第29-30页 |
3.2.6 生长曲线的测定 | 第30页 |
3.2.7 qPCR检测miR-141-3p表达量 | 第30-33页 |
3.2.8 Westren Blot检测Keap1、Nrf2蛋白表达量 | 第33-35页 |
3.3 实验结果 | 第35-41页 |
3.3.1 SA-β-gal染色及活性测定 | 第35-37页 |
3.3.2 生化指标的检测 | 第37-38页 |
3.3.3 生长曲线 | 第38页 |
3.3.4 miR-141-3p表达量 | 第38-39页 |
3.3.5 Keap1、Nrf2蛋白表达量 | 第39-41页 |
四、miR-141-3p功能分析 | 第41-55页 |
4.1 引言 | 第41页 |
4.2 材料和方法 | 第41-50页 |
4.2.1 实验材料和试剂 | 第41-42页 |
4.2.2 转染 | 第42-43页 |
4.2.3 qPCR检测miR-141-3p表达量 | 第43-47页 |
4.2.4 SA-β-gal活性 | 第47页 |
4.2.5 qPCR检测Keap1、Nrf2 mRNA表达量 | 第47-50页 |
4.2.6 Westren blot检测Keap1、Nrf2蛋白表达量 | 第50页 |
4.3 实验结果 | 第50-55页 |
4.3.1 转染效率 | 第50-51页 |
4.3.2 miR-141-3p表达量 | 第51页 |
4.3.3 SA-β-gal活性 | 第51-52页 |
4.3.4 Keap-1、Nrf2 mRNA表达量 | 第52-53页 |
4.3.5 Keap-1、Nrf2蛋白表达量 | 第53-55页 |
五、讨论与总结 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
已发表的论文目录 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |