| 中文摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 英文缩略词 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 第一部分 伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用 | 第19-27页 |
| 1. 实验材料和仪器 | 第19-21页 |
| 1.1 细胞株 | 第19页 |
| 1.2 药物 | 第19页 |
| 1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第19-20页 |
| 1.5 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第21页 |
| 2.2 细胞传代和培养 | 第21页 |
| 2.3 细胞计数 | 第21页 |
| 2.4 细胞冻存 | 第21-22页 |
| 2.5 建立MPP~+损伤SH-SY5Y细胞的模型(MTT法) | 第22页 |
| 2.6 细胞分组及药物处理 | 第22页 |
| 2.7 伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用 | 第22-23页 |
| 2.7.1 倒置显微镜观察伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y胞形态的影响 | 第22页 |
| 2.7.2 细胞活力检测(MTT法) | 第22-23页 |
| 3. 统计学处理 | 第23页 |
| 4. 实验结果 | 第23-25页 |
| 4.1 建立MPP~+损伤SH-SY5Y细胞的模型(MTT法) | 第23-24页 |
| 4.2 伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用 | 第24-25页 |
| 4.2.1 伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞形态的影响 | 第24页 |
| 4.2.2 伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞存活率的影响(MTT法) | 第24-25页 |
| 5. 讨论 | 第25-26页 |
| 6. 结论 | 第26-27页 |
| 第二部分 伊拉地平对MPP~+所致SH-SY5Y细胞线粒体功能障碍及胞内钙离子变化的影响 | 第27-39页 |
| 1. 实验材料及仪器 | 第27-29页 |
| 1.1 细胞株 | 第27页 |
| 1.2 药物 | 第27页 |
| 1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 1.5 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.1 细胞复苏和培养 | 第29页 |
| 2.2 细胞传代和冻存 | 第29页 |
| 2.3 细胞分组及药物处理 | 第29-30页 |
| 2.4 流式细胞术检测线粒体膜电位(△Ψm) | 第30页 |
| 2.5 流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS) | 第30页 |
| 2.6 Western Blot检测Cytochrome C蛋白表达的变化 | 第30页 |
| 2.7 伊拉地平对MPP~+所致SH-SY5Y细胞胞内钙离子水平变化的影响 | 第30-31页 |
| 2.7.1 多功能酶标仪检测胞内钙离子变化 | 第30-31页 |
| 2.7.2 激光共聚焦观察胞内钙离子变化 | 第31页 |
| 2.8 统计学方法 | 第31页 |
| 3. 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 伊拉地平对MPP~+所致的SH-SY5Y细胞的线粒体膜电位变化(△Ψ m)的影响 | 第31-33页 |
| 3.2 伊拉地平对MPP~+所致的SH-SY5Y细胞内活性氧(ROS)变化的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 伊拉地平对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞内细胞色素C表达的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 伊拉地平对MPP~+所致的SH-SY5Y细胞内钙离子浓度变化的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.1 荧光显微镜下观察MPP+对SH-SY5Y细胞内钙离子浓度变化的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.2 多功能酶标仪检测胞胞内钙离子变化 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 第三部分 伊拉地平抑制MPP~+诱导的SH-SY5Y细胞自噬 | 第39-54页 |
| 1. 实验材料及仪器 | 第39-42页 |
| 1.1 细胞株 | 第39页 |
| 1.2 药物 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第40-42页 |
| 1.5 主要仪器 | 第42页 |
| 2. 实验方法 | 第42-46页 |
| 2.1 细胞复苏、冻存、传代和培养 | 第42页 |
| 2.2 实验分组及药物处理 | 第42-43页 |
| 2.3 MDC染色及流式细胞术检测 | 第43页 |
| 2.3.1 MDC染色 | 第43页 |
| 2.3.2 流式细胞术检测 | 第43页 |
| 2.4 透射电镜观察MPP~+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬 | 第43-44页 |
| 2.5 Western Blot实验 | 第44-46页 |
| 2.5.1 蛋白样品的制备 | 第44页 |
| 2.5.2 蛋白含量的测定 | 第44-45页 |
| 2.5.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第45-46页 |
| 2.6 统计学处理 | 第46页 |
| 3. 实验结果 | 第46-50页 |
| 3.1 MDC染色结果 | 第46-47页 |
| 3.2 MDC染色流式细胞术分析 | 第47-48页 |
| 3.3 透射电镜检测线粒体自噬结果 | 第48-49页 |
| 3.4 Western Blot实验 | 第49-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-53页 |
| 5. 小结 | 第53-54页 |
| 总结 | 第54-56页 |
| 实验线路图 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 综述 | 第61-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
