| 摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 口蹄疫与口蹄疫病毒 | 第10-11页 |
| 1.2 疫情与毒株背景 | 第11-13页 |
| 1.3 口蹄疫病毒S片段的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4 口蹄疫病毒反向遗传学研究简史 | 第14-18页 |
| 1.5 研究内容与方案 | 第18-19页 |
| 第二章 FMDV O/GSLX/CHN/2010株全长感染性克隆的构建与鉴定 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 病毒、载体、细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 基因组序列比对 | 第20页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第20-21页 |
| 2.2.3 病毒总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.4 分段扩增病毒全基因组 | 第21-23页 |
| 2.2.5 全长CDNA克隆的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.6 转染 | 第25页 |
| 2.2.7 拯救病毒的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-35页 |
| 2.3.1 多序列比对与进化分析 | 第27-29页 |
| 2.3.2 RT-PCR分段扩增结果 | 第29-31页 |
| 2.3.3 重组质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.4 拯救病毒的RT-PCR及测序鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.5 拯救病毒的免疫荧光检测 | 第33页 |
| 2.3.6 拯救病毒生长动力学曲线的测定 | 第33-34页 |
| 2.3.7 拯救病毒的其它鉴定 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 嵌合O/GSLX/CHN/2010株S片段口蹄疫病毒的拯救及其生物学特点 | 第36-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 细胞、毒株、载体 | 第36-37页 |
| 3.1.2 试剂和仪器 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-41页 |
| 3.2.1 全基因组序列分析 | 第37页 |
| 3.2.2 S片段二级结构模拟 | 第37-38页 |
| 3.2.3 嵌合病毒的构建与拯救 | 第38-39页 |
| 3.2.4 反转录-实时荧光定量聚合酶链式反应 | 第39-40页 |
| 3.2.5 病毒滴度的测定 | 第40页 |
| 3.2.6 病毒对乳鼠致病力的测定 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-49页 |
| 3.3.1 全基因组序列的分析 | 第41-42页 |
| 3.3.2 S片段模拟的二级结构的比较 | 第42-45页 |
| 3.3.3 全长质粒的构建及测序鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3.4 嵌合病毒的鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.5 嵌合病毒RNA复制能力的检测 | 第47-48页 |
| 3.3.6 嵌合病毒滴度的检测 | 第48页 |
| 3.3.7 嵌合病毒对乳鼠致病力的检测 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-53页 |
| 第四章 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |