| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| ·植物耐盐机制概述 | 第10页 |
| ·乙烯生物合成及乙烯信号转导途径与盐胁迫 | 第10-16页 |
| ·乙烯生物合成与盐胁迫 | 第10-11页 |
| ·乙烯信号转导途径组分与盐胁迫 | 第11-16页 |
| ·乙烯受体与盐胁迫 | 第12-13页 |
| ·CTR1与盐胁迫 | 第13-14页 |
| ·EIN2与盐胁迫 | 第14页 |
| ·EIN3与盐胁迫 | 第14-15页 |
| ·ERF基因与盐胁迫 | 第15-16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16页 |
| ·技术路线及主要内容 | 第16-18页 |
| 2 乙烯和盐诱导ERF基因的鉴定 | 第18-29页 |
| ·材料与方法 | 第18-21页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·植物材料的培养及处理 | 第18页 |
| ·植物材料的培养 | 第18页 |
| ·植物材料的处理 | 第18页 |
| ·拟南芥RNA的提取,cDNA第一链的制备及qPCR检测基因表达 | 第18-20页 |
| ·拟南芥RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·cDNA第一链的制备 | 第19页 |
| ·qPCR检测基因表达 | 第19-20页 |
| ·过表达载体的构建及转基因植株的获得 | 第20-21页 |
| ·过表达载体的构建流程 | 第20页 |
| ·电击大肠杆菌感受态细胞(菌株为DH5α)的制备 | 第20-21页 |
| ·电击农杆菌感受态细胞(菌株为LBA4404)的制备 | 第21页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-29页 |
| ·乙烯和盐诱导的ERF基因 | 第21-23页 |
| ·目标基因的确定 | 第23-24页 |
| ·EIN3调控ESE1的表达 | 第24-29页 |
| 3 EIN3与ESE1启动子相互作用的分析 | 第29-47页 |
| ·实验方案 | 第29-40页 |
| ·酵母单杂交 | 第29-30页 |
| ·酵母感受态细胞YM4271的制备及转化过程 | 第29-30页 |
| ·滤纸转移法检测β-半乳糖苷酶 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30页 |
| ·染色质免疫沉淀技术 | 第30-33页 |
| ·电泳迁移率实验 | 第33-40页 |
| ·蛋白质的诱导及纯化 | 第34页 |
| ·融合蛋白质的SDS-PAGE蛋白电泳和Western Blot检测 | 第34-36页 |
| ·融合蛋白质的定量 | 第36-37页 |
| ·电泳迁移率实验步骤 | 第37-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-47页 |
| ·EIN3-N端蛋白直接结合ESE1启动子片段D4 | 第40-42页 |
| ·EIN3-N端蛋白直接结合ESE1启动子D4片段中的P2 | 第42页 |
| ·EIN3-N端蛋白直接结合ESE1启动子P2片段中的P2-3 | 第42-47页 |
| 4 ESE1特性分析 | 第47-54页 |
| ·实验方案 | 第47-48页 |
| ·激活特性 | 第47-48页 |
| ·载体构建 | 第47页 |
| ·热击酵母感受态细胞Y190的制备 | 第47页 |
| ·质粒热击转化酵母感受态细胞Y190 | 第47-48页 |
| ·β-半乳糖苷酶滤纸印迹实验 | 第48页 |
| ·结合特性 | 第48页 |
| ·蛋白质的诱导及纯化 | 第48页 |
| ·融合蛋白的定量 | 第48页 |
| ·电泳迁移率实验 | 第48页 |
| ·染色质免疫沉淀技术 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-54页 |
| ·ESE1是一个新的ERF蛋白 | 第48-50页 |
| ·ESE1的激活特性 | 第50页 |
| ·ESE1的结合特性 | 第50-54页 |
| 5 ESE1功能分析 | 第54-62页 |
| ·实验方案 | 第54-56页 |
| ·萌发率实验 | 第54页 |
| ·盐处理 | 第54页 |
| ·表达分析 | 第54页 |
| ·游离脯氨酸含量的测定 | 第54-55页 |
| ·电解质渗漏的测定 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-62页 |
| ·ESE1过表达能提高种子萌发率 | 第56-58页 |
| ·ESE1过表达能提高植物幼苗的耐盐性 | 第58页 |
| ·过表达ESE1和EIN3同时激活与盐相关的功能基因的表达 | 第58-62页 |
| 6 讨论、结论与创新点 | 第62-65页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第64页 |
| ·创新点 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
