| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1、综述 | 第12-25页 |
| 1.1 REG_γ的发现与研究 | 第12-15页 |
| 1.1.1 REG_γ的发现及其家族成员 | 第12页 |
| 1.1.2 REG_γ及其家族的结构特性 | 第12-14页 |
| 1.1.3 REG_γ及其家族的生物学活性 | 第14页 |
| 1.1.4 REG_γ及其家族的功能 | 第14-15页 |
| 1.2 蛋白酶体降解系统研究 | 第15-18页 |
| 1.2.1 蛋白酶体结构分析 | 第15-16页 |
| 1.2.2 蛋白酶体功能 | 第16-18页 |
| 1.3 氧化损伤蛋白降解体系 | 第18-24页 |
| 1.3.1 氧化应激反应 | 第18-19页 |
| 1.3.2 氧化损伤引起的疾病 | 第19-20页 |
| 1.3.3 氧化损伤蛋白降解 | 第20-24页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 2. 材料与方法 | 第25-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 实验用细胞 | 第25页 |
| 2.1.2 实验用试剂和材料 | 第25-27页 |
| 2.1.3 设备仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-44页 |
| 2.2.1 细胞培养过程(复苏、传代、冻存) | 第28-29页 |
| 2.2.2 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第29-32页 |
| 2.2.3 质粒构建 | 第32-37页 |
| 2.2.4 病毒包装 | 第37页 |
| 2.2.5 免疫共沉淀(co-IP) | 第37-38页 |
| 2.2.6 提取、鉴定基因组 | 第38-39页 |
| 2.2.7 RNA提取(细胞中提取) | 第39页 |
| 2.2.8 反转 | 第39-40页 |
| 2.2.9 QPCR(荧光定量PCR) | 第40-41页 |
| 2.2.10 半定量PCR | 第41-42页 |
| 2.2.11 体外降解实验 | 第42页 |
| 2.2.12 蛋白酶体Trypsin-like活性检测 | 第42-44页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第44-67页 |
| 3.1 氧化应激下REG_γ对p21依赖20S蛋白酶体降解的调控 | 第44-50页 |
| 3.1.1 氧化处理下p21蛋白水平和mRNA水平的变化 | 第44-45页 |
| 3.1.2 氧化处理下的其他细胞中p21的蛋白水平变化 | 第45-47页 |
| 3.1.3 抗氧化剂对p21氧化降解的调节作用 | 第47-49页 |
| 3.1.4 体外翻译表达的p21在氧化应激下的降解情况 | 第49-50页 |
| 3.2 氧化应激下REG_γ对HCV core蛋白依赖20S蛋白酶体降解的调控 | 第50-59页 |
| 3.2.1 HCV core蛋白表达载体的质粒构建和表达 | 第50-54页 |
| 3.2.2 HCV core在氧化应激下蛋白的变化 | 第54-57页 |
| 3.2.3 不同的氧化剂处理下HCV core的蛋白水平变化 | 第57-59页 |
| 3.3 关于氧化损伤蛋白依赖REG_γ调控被降解的机制 | 第59-63页 |
| 3.3.1 氧化应激促进REG_γ对20S蛋白酶体胰蛋白酶样(Trypsin-Like)活性的调控增强 | 第60-61页 |
| 3.3.2 氧化应激会促进REG_γ和20S蛋白酶体的结合 | 第61-63页 |
| 3.4 评估氧化对细胞的毒性效应 | 第63-67页 |
| 3.4.1 氧化应激对细胞凋亡的影响 | 第63-65页 |
| 3.4.2 氧化应激对细胞形态的影响 | 第65-67页 |
| 4. 讨论与展望 | 第67-71页 |
| 附录 | 第71-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
