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文蛤弧菌病的病原分析、免疫应答及抗性选育研究

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 文献综述第13-37页
   ·引言第13-14页
   ·养殖贝类主要疾病——弧菌病第14-20页
     ·贝类弧菌病的文献报道第14-15页
     ·弧菌的种类与鉴定手段第15-19页
       ·弧菌的生化鉴定第15-17页
       ·弧菌的分子鉴定第17-19页
     ·弧菌的流行病学与致病机理第19-20页
     ·贝类的免疫应答第20-28页
     ·直接效应免疫相关基因——溶菌酶第21-24页
       ·溶菌酶的种类与功能第22页
       ·i 型溶菌酶第22-24页
     ·间接效应免疫相关基因——热休克蛋白第24-28页
       ·热休克蛋白的种类与功能第24-26页
       ·热休克蛋白70第26-28页
   ·贝类的抗性选育第28-34页
     ·贝类抗性选育的原理第28-30页
       ·数量遗传学的兴起第28-29页
       ·贝类抗性选育的可行性第29页
       ·贝类抗病指标的选择第29-30页
     ·贝类抗性选育的方法第30-34页
       ·表型选择与基因型选择第30-33页
       ·品系选育与家系选育第33-34页
   ·研究的目的和意义第34-37页
第二章 文蛤致病菌的分离、鉴定与致病机理分析第37-65页
   ·引言第37-38页
   ·文蛤致病菌副溶血弧菌的分离、鉴定、致病力与致病机理分析第38-51页
     ·材料与方法第38-41页
       ·患病文蛤体内细菌的分离与形态学分析第38页
       ·细菌的分子鉴定第38-39页
       ·细菌的生化鉴定与抗生素敏感检测第39页
       ·细菌致病力的初步筛查分析第39-40页
       ·毒力最强菌株的定量毒力检验第40-41页
       ·感染文蛤的细胞病理学观察第41页
       ·毒力基因toxR,tlh,tdh 的检测第41页
       ·统计分析第41页
     ·结果第41-48页
       ·细菌的分离及其毒力初步筛查分析第41-42页
       ·菌株MM21 的鉴定第42-45页
       ·菌株MM21 的定量毒力分析第45-46页
       ·感染MM21 后文蛤的细胞病理学变化第46-48页
     ·讨论第48-51页
   ·文蛤致病菌类弗尼斯弧菌的分离、鉴定、致病力与致病机理分析第51-65页
     ·材料与方法第51-53页
       ·患病文蛤体内细菌的分离与致病力分析第51页
       ·细菌的分子鉴定第51-52页
       ·细菌的生化鉴定第52页
       ·细菌的毒力检测第52-53页
       ·感染文蛤的细胞病理学观察第53页
       ·感染文蛤的组织病理学观察第53页
       ·统计分析第53页
     ·结果第53-62页
       ·菌株MM5 的形态特征第53-54页
       ·MM5 的分子鉴定结果第54-55页
       ·MM5 的生化鉴定结果第55-57页
       ·MM5 的毒力测试第57页
       ·感染MM5 文蛤的细胞病理学变化第57-59页
       ·MM5 引起的组织病理学变化第59-62页
     ·讨论第62-65页
第三章 文蛤免疫相关基因的克隆及其在宿主免疫应答中的功能分析第65-103页
   ·引言第65-66页
   ·文蛤溶菌酶基因的克隆与功能分析第66-83页
     ·材料与方法第66-73页
       ·感染实验与样品采集第66页
       ·文蛤溶菌酶cDNA 全长的克隆第66-67页
       ·序列特性分析第67-69页
       ·文蛤溶菌酶的原核重组表达第69-70页
       ·重组蛋白的质谱鉴定第70页
       ·重组蛋白的溶菌酶活性分析第70-71页
       ·重组蛋白的抗菌活性分析第71-72页
       ·文蛤溶菌酶转录本的半定量检测第72页
       ·文蛤溶菌酶多克隆抗体的制备第72-73页
       ·文蛤溶菌酶蛋白的半定量检测第73页
       ·统计分析第73页
     ·结果第73-82页
       ·文蛤溶菌酶的序列分析第73-76页
       ·文蛤溶菌酶重组蛋白的获得和鉴定第76-78页
       ·文蛤溶菌酶重组蛋白的活性分析第78-80页
       ·文蛤溶菌酶的组织分布第80页
       ·弧菌感染引起的文蛤溶菌酶的表达变化第80-82页
     ·讨论第82-83页
   ·文蛤热休克蛋白70 的克隆与功能分析第83-103页
     ·材料与方法第83-90页
       ·感染实验与样品采集第83-84页
       ·文蛤热休克蛋白70 cDNA 全长的克隆第84-85页
       ·序列特性分析第85-87页
       ·文蛤热休克蛋白70 转录本的定量检测第87-88页
       ·文蛤热休克蛋白70 蛋白的定量检测第88-89页
       ·统计分析第89-90页
     ·结果第90-99页
       ·文蛤热休克蛋白70 的序列分析第90-93页
       ·弧菌感染引起的文蛤热休克蛋白70 mRNA 的空间表达变化第93-95页
       ·弧菌感染引起的文蛤热休克蛋白70 mRNA 的时间表达变化第95-96页
       ·弧菌感染引起的文蛤热休克蛋白70 蛋白的空间表达变化第96-99页
     ·讨论第99-103页
第四章 弧菌抗性文蛤群体的选育及溶菌酶SNP 在选育群体中的分析第103-123页
   ·引言第103-104页
   ·弧菌抗性文蛤群体的培育第104-109页
     ·材料与方法第104-107页
       ·文蛤亲本的弧菌感染实验第104页
       ·文蛤的催产与受精第104-105页
       ·文蛤幼虫与稚贝的培育第105页
       ·文蛤F1 子代的弧菌感染实验第105-106页
       ·统计分析第106-107页
     ·结果第107-108页
       ·弧菌抗性文蛤亲本(09-P)及其F1 子代(09RP)的获得第107-108页
       ·09RP 的弧菌抗性确认第108页
     ·讨论第108-109页
   ·文蛤溶菌酶SNP 与弧菌抗性及生长的相关性分析第109-123页
     ·材料与方法第109-112页
       ·检测所用文蛤群体第109页
       ·DNA 提取与体重测量第109-110页
       ·溶菌酶gDNA 片段的PCR 扩增与测序第110-111页
       ·SNP 检测与分型第111页
       ·数据分析第111-112页
     ·结果第112-120页
       ·检测到的溶菌酶SNP第112页
       ·溶菌酶SNP 与弧菌抗性的相关性分析第112-116页
       ·溶菌酶SNP 与生长的相关性分析第116-120页
     ·讨论第120-123页
结论第123-125页
参考文献第125-140页
博士期间发表的文章及申请的专利第140-141页
致谢第141-142页

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