| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第13-18页 |
| 1.1 大黄鱼简介 | 第13页 |
| 1.1.1 大黄鱼概况 | 第13页 |
| 1.1.2 养殖病害 | 第13页 |
| 1.2 鱼类细胞因子家族功能及其研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 鱼类白细胞介素家族主要功能及其研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.2 鱼类干扰素家族主要功能及其研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第2章 大黄鱼白细胞介素-6 的特征与表达分析 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 RNA的提取与检测 | 第19-20页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第20页 |
| 2.2.3 cDNA第一条链的纯化 | 第20-21页 |
| 2.2.4 纯化的c DNA 3’末端添加poly C | 第21页 |
| 2.2.5 cDNA第一链的检测 | 第21页 |
| 2.2.6 全长c DNA的克隆方法 | 第21-22页 |
| 2.2.7 割胶纯化基因片段 | 第22页 |
| 2.2.8 PCR产物与pMD19-T载体连接 | 第22页 |
| 2.2.9 转化感受态细胞 | 第22页 |
| 2.2.10菌液PCR检测重组子 | 第22页 |
| 2.2.11 Real-time PCR反应体系及条件 | 第22-23页 |
| 2.2.12基因组DNA提取 | 第23页 |
| 2.2.13基因组片段的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.14序列和数据分析 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-33页 |
| 2.3.1 总RNA提取结果 | 第24页 |
| 2.3.2 全长c DNA序列克隆 | 第24-26页 |
| 2.3.3 氨基酸序列特征 | 第26-27页 |
| 2.3.4 系统进化树 | 第27-28页 |
| 2.3.5 基因组序列分析 | 第28-29页 |
| 2.3.6 基因表达分析 | 第29-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第3章 大黄鱼白细胞介素-8 的特征与表达分析 | 第34-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 3.1.2 实验菌 | 第34页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第34-36页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 RNA的提取与检测 | 第36页 |
| 3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第36页 |
| 3.2.3 cDNA第一链的纯化 | 第36页 |
| 3.2.4 纯化的c DNA 3’ 末端添加ploy C | 第36页 |
| 3.2.5 cDNA第一链的检测 | 第36-37页 |
| 3.2.6 全长c DNA克隆方法 | 第37页 |
| 3.2.7 割胶纯化基因片段 | 第37页 |
| 3.2.8 PCR产物与pMD 19-T载体连接 | 第37页 |
| 3.2.9 转化感受态细胞 | 第37页 |
| 3.2.10 菌液PCR检测重组子 | 第37页 |
| 3.2.11 Real-time PCR反应体系及条件 | 第37-38页 |
| 3.2.12 基因组DNA的提取 | 第38页 |
| 3.2.13 基因组片段的扩增 | 第38页 |
| 3.2.14 序列和数据分析 | 第38页 |
| 3.2.15 LcIL-8/ pGEX-4T-2 重组质粒的构建 | 第38-40页 |
| 3.2.16 LcIL-8 基因重组蛋白表达 | 第40-41页 |
| 3.2.17 PCR-SSCP | 第41页 |
| 3.3 结果 | 第41-51页 |
| 3.3.1 全长c DNA克隆 | 第41-43页 |
| 3.3.2 推导的氨基酸序列特征 | 第43页 |
| 3.3.3 系统进化树 | 第43-45页 |
| 3.3.4 基因组序列分析 | 第45-46页 |
| 3.3.5 基因表达分析 | 第46-50页 |
| 3.3.6 重组表达分析 | 第50页 |
| 3.3.7 SNP分析 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 第4章 大黄鱼白细胞介素-12的特征与表达分析 | 第52-72页 |
| 4.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 RNA的提取与检测 | 第52-53页 |
| 4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第53页 |
| 4.2.3 cDNA第一链的纯化 | 第53页 |
| 4.2.4 纯化的cDNA 3’ 末端添加ploy C | 第53页 |
| 4.2.5 cDNA第一链的检测 | 第53页 |
| 4.2.6 全长cDNA克隆方法 | 第53-54页 |
| 4.2.7 割胶纯化基因片段 | 第54页 |
| 4.2.8 PCR产物与pMD 19-T载体连接 | 第54页 |
| 4.2.9 转化感受态细胞 | 第54页 |
| 4.2.10 菌液PCR检测重组子 | 第54-55页 |
| 4.2.11 Real-time PCR反应体系及条件 | 第55页 |
| 4.2.12 基因组DNA的提取 | 第55页 |
| 4.2.13 基因组片段的扩增 | 第55页 |
| 4.2.14 序列和数据分析 | 第55页 |
| 4.3 结果 | 第55-70页 |
| 4.3.1 全长cDNA序列 | 第55-59页 |
| 4.3.2 氨基酸序列特征 | 第59-61页 |
| 4.3.3 系统进化树 | 第61-63页 |
| 4.3.4 基因组片段的扩增 | 第63-64页 |
| 4.3.5 基因表达分析 | 第64-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-72页 |
| 第5章 大黄鱼I型IFN基因的特征与表达分析 | 第72-86页 |
| 5.1 实验材料 | 第72页 |
| 5.2 实验方法 | 第72-74页 |
| 5.2.1 RNA的提取与检测 | 第72页 |
| 5.2.2 cDNA第一链的合成 | 第72页 |
| 5.2.3 cDNA第一链的纯化 | 第72页 |
| 5.2.4 纯化的cDNA 3’ 末端添加ploy C | 第72页 |
| 5.2.5 cDNA第一链的检测 | 第72-73页 |
| 5.2.6 全长cDNA克隆方法 | 第73页 |
| 5.2.7 割胶纯化基因片段 | 第73页 |
| 5.2.8 PCR产物与pMD 19-T载体连接 | 第73页 |
| 5.2.9 转化感受态细胞 | 第73-74页 |
| 5.2.10 菌液PCR检测重组子 | 第74页 |
| 5.2.11 Real-time PCR反应体系及条件 | 第74页 |
| 5.2.12 基因组DNA的提取 | 第74页 |
| 5.2.13 基因组片段的扩增 | 第74页 |
| 5.2.14 序列和数据分析 | 第74页 |
| 5.3 结果 | 第74-84页 |
| 5.3.1 全长c DNA克隆 | 第74-76页 |
| 5.3.2 推导的氨基酸序列特征 | 第76-77页 |
| 5.3.3 系统进化树 | 第77-79页 |
| 5.3.4 基因组序列分析 | 第79-80页 |
| 5.3.5 基因表达分析 | 第80-84页 |
| 5.4 讨论 | 第84-86页 |
| 第6章 小结 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-94页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第94页 |
