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ShRNA沉默ROCK1和ROCK2的表达对缺氧致大鼠心肌细胞凋亡的影响

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第1章 引言第11-13页
第2章 材料和方法第13-25页
   ·材料第13-17页
     ·实验动物第13页
     ·主要试剂第13-14页
     ·自配试剂第14-16页
     ·主要仪器设备第16-17页
   ·方法第17-25页
     ·心肌细胞培养第17-18页
     ·心肌细胞缺氧模型制备及各种条件培养第18页
     ·检测心肌细胞受损的相关指标第18-19页
     ·构建重组质粒shRNA(short hairpin RNA,短发夹RNA)第19-20页
     ·质粒的提取和转染第20-22页
     ·Western blot检测第22-24页
     ·统计学分析第24-25页
第3章 结果第25-31页
   ·心肌细胞的鉴定第25页
   ·缺氧后ROCK1和ROCK2蛋白的表达第25-26页
   ·靶向ROCK1和ROCK2的有效shRNA的筛选第26-28页
   ·荧光显微镜检测结果第28页
   ·shRNA转染和缺氧后心肌细胞搏动频率与节律的变化第28-29页
   ·shRNA转染和缺氧后心肌细胞培养液LDH含量、细胞存活率及凋亡率的变化第29-30页
   ·shRNA转染和缺氧后心肌细胞Caspase3、p-PI3K和PI3K蛋白表达的变化第30-31页
第4章 讨论第31-35页
   ·ROCK1和ROCK2与心血管疾病之间的关系第31-32页
   ·靶向大鼠心肌细胞ROCK1和ROCK2的RNA干扰第32页
   ·ROCK1和ROCK2与心肌细胞凋亡和Caspase3之间的关系第32-33页
   ·ROCK1和ROCK2与PI3K之间的关系第33-35页
第5章 结论第35-36页
致谢第36-37页
参考文献第37-40页
攻读学位期间的研究成果第40-41页
综述第41-46页
 参考文献第44-46页

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