摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 白藜芦醇简介 | 第12-13页 |
1.2 芪合成酶简介 | 第13-14页 |
1.3 农杆菌介导的遗传转化 | 第14-16页 |
1.4 根癌农杆菌介导的遗传转化效率的影响因素 | 第16-17页 |
1.4.1 农杆菌菌株对遗传转化的效率影响 | 第16页 |
1.4.2 外植体材料对遗传转化效率的影响 | 第16页 |
1.4.3 乙酰丁香酮对遗传转化效率的影响 | 第16页 |
1.4.4 侵染菌液浓度对遗传转化效率的影响 | 第16页 |
1.4.5 预培养和共培养时间对遗传转化效率的影响 | 第16-17页 |
1.5 转基因植株的分子检测方法 | 第17-18页 |
1.5.1 DNA水平的检测 | 第17页 |
1.5.2 RNA水平的检测 | 第17-18页 |
1.5.3 蛋白质水平的检测 | 第18页 |
1.6 苯丙氨酸代谢途径简介 | 第18-19页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 中国野生毛葡萄芪合成酶基因VqSTS6转化无核白葡萄的研究 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21页 |
2.1.1 供试材料 | 第21页 |
2.1.2 载体 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
2.1.4 实验仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-24页 |
2.2.1 诱导葡萄品种无核白的体细胞胚 | 第21-22页 |
2.2.2 农杆菌介导的葡萄胚性愈伤组织的转化 | 第22页 |
2.2.3 抗性植株的检测 | 第22-23页 |
2.2.4 转基因株系中芪类物质的检测 | 第23-24页 |
2.2.5 转基因株系的抗病性检测 | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-31页 |
2.3.1 无核白葡萄胚性愈伤组织的诱导 | 第24-25页 |
2.3.2 胚性愈伤组织保持方法的改良 | 第25页 |
2.3.3 农杆菌介导的VqSTS6基因的遗传转化 | 第25-26页 |
2.3.4 抗性株系的PCR分析 | 第26-27页 |
2.3.5 抗性株系的Western blot分析 | 第27页 |
2.3.6 转基因株系的RT-PCR分析 | 第27-28页 |
2.3.7 转基因株系中白藜芦醇含量的检测 | 第28-29页 |
2.3.8 转基因株系对白粉菌的抗性检测 | 第29-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第三章 农杆菌介导的瞬时转化效率的研究 | 第33-39页 |
3.1 材料 | 第33页 |
3.1.1 供试材料 | 第33页 |
3.1.2 载体 | 第33页 |
3.1.3 主要试剂 | 第33页 |
3.1.4 仪器设备 | 第33页 |
3.2 方法 | 第33-35页 |
3.2.1 菌液的活化 | 第33页 |
3.2.2 不同条件下叶片及体细胞胚的瞬时转化 | 第33-34页 |
3.2.3 体细胞胚瞬时转化体系的优化 | 第34页 |
3.2.4 GUS组织化学染色 | 第34页 |
3.2.5 蛋白活性检测 | 第34-35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-37页 |
3.3.1 叶片及体细胞胚的GUS化学组织染色 | 第35-36页 |
3.3.2 体细胞胚的瞬时转化条件的优化 | 第36页 |
3.3.3 蛋白活性检测 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
第四章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |