| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第10-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-32页 |
| 1. 原花青素的性质及生物学功能 | 第16-19页 |
| 1.1 原花青素结构 | 第17-18页 |
| 1.2 原花青素的生物学功能 | 第18-19页 |
| 2.原花青素代谢途径及其关键酶基因 | 第19-21页 |
| 3.原花青素在牧草育种中的应用及进展 | 第21-24页 |
| 3.1 传统育种 | 第23页 |
| 3.2 生物技术育种 | 第23-24页 |
| 4.抗草丁膦除草剂bar基因及其应用 | 第24-26页 |
| 4.1 草丁膦的作用机理 | 第24-25页 |
| 4.2 bar基因的抗性机理 | 第25页 |
| 4.3 抗除草剂bar基因的应用 | 第25-26页 |
| 5.红豆草 | 第26-29页 |
| 5.1 红豆草概况 | 第26-28页 |
| 5.2 红豆草的生物学特性 | 第28页 |
| 5.3 红豆草原花青素 | 第28-29页 |
| 6.科学问题的提出 | 第29页 |
| 7.研究目的及意义 | 第29-30页 |
| 8.主要研究内容 | 第30页 |
| 9.技术路线 | 第30-32页 |
| 第二章 红豆草不同生育期原花青素和花青素含量动态变化 | 第32-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第33-35页 |
| 1.1 材料 | 第33页 |
| 1.2 花青素含量测定 | 第33-34页 |
| 1.3 原花青素含量测定 | 第34-35页 |
| 2. 结果与分析 | 第35-40页 |
| 2.1 不同器官花青素含量变化 | 第35页 |
| 2.2 不同生育期花青素含量变化 | 第35-37页 |
| 2.3 可溶性原花青素在不同生育期和不同器官的变化 | 第37-38页 |
| 2.4 不溶性原花青素含量在不同生育期和不同器官的变化 | 第38-40页 |
| 2.5 原花青素总量在不同生育期和不同器官的变化 | 第40页 |
| 3. 讨论 | 第40-41页 |
| 4. 小结 | 第41-43页 |
| 第三章 甘肃红豆草BAN和LAR基因的克隆与序列分析 | 第43-71页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-52页 |
| 1.1 植物材料 | 第43页 |
| 1.2 菌株 | 第43页 |
| 1.3 试验试剂和处理方法 | 第43页 |
| 1.4 总RNA提取方法 | 第43-45页 |
| 1.5 总RNA质量检测 | 第45页 |
| 1.6 First-Strand cDNA合成 | 第45页 |
| 1.7 克隆BAN和LAR基因 | 第45-50页 |
| 1.8 BAN和LAR基因生物信息学分析 | 第50-51页 |
| 1.9 BAN和LAR基因的组织特异性分析 | 第51-52页 |
| 2. 结果与分析 | 第52-66页 |
| 2.1 RNA的提取和琼脂糖凝胶电泳检测 | 第52-53页 |
| 2.2 BAN和LAR基因的扩增及克隆 | 第53-54页 |
| 2.3 BAN的cDNA序列和编码的氨基酸及蛋白质 | 第54-59页 |
| 2.4 LAR基因的cDNA序列和编码的氨基酸及蛋白质 | 第59-65页 |
| 2.5 不同器官BAN基因表达 | 第65页 |
| 2.6 不同器官LAR基因表达 | 第65-66页 |
| 3. 讨论 | 第66-69页 |
| 3.1 甘肃红豆草总RNA提取法的改良及其效果评价 | 第66-67页 |
| 3.2 甘肃红豆草BAN的核酸和氨基酸序列特征分析 | 第67-68页 |
| 3.3 甘肃红豆草LAR基因序列和表达分析 | 第68-69页 |
| 3.4 BAN和LAR基因组织特异表达特征 | 第69页 |
| 4.小结 | 第69-71页 |
| 第四章 甘肃红豆草BAN和LAR双标记植物表达载体的构建及其对紫花苜蓿的遗传转化 | 第71-85页 |
| 1. 实验材料 | 第71-73页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第71页 |
| 1.2 植物材料 | 第71-72页 |
| 1.3 酶与试剂 | 第72页 |
| 1.4 培养基配制 | 第72页 |
| 1.5 种子消毒及培养条件 | 第72页 |
| 1.6 受体材料的制备 | 第72页 |
| 1.7 菌株培养 | 第72页 |
| 1.8 菌液制备 | 第72-73页 |
| 2. 实验方法 | 第73-75页 |
| 2.1 GFP基因的亚克隆 | 第73-74页 |
| 2.2 含BAN基因的双标记选择载体的构建 | 第74页 |
| 2.3 含LAR基因的双标记选择载体的构建 | 第74-75页 |
| 2.4 载体CPB-BAN-GFP和CPB-LAR-GFP转化农杆菌 | 第75页 |
| 2.5 农杆菌侵染及共培养 | 第75页 |
| 2.6 转基因愈伤的检测 | 第75页 |
| 2.7 原花青素含量检测 | 第75页 |
| 3. 结果与分析 | 第75-82页 |
| 3.1 GFP基因的亚克隆 | 第75-76页 |
| 3.2 BAN基因的双标记植物表达载体的构建 | 第76页 |
| 3.3 LAR基因的双标记植物表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 3.4 植物表达载体CPB-BAN-GFP和CPB-LAR-GFP转化农杆菌 | 第77-78页 |
| 3.5 紫花苜蓿遗传转化及转基因愈伤的获得 | 第78-79页 |
| 3.6 转基因愈伤的PCR检测 | 第79-80页 |
| 3.7 转基因愈伤GFP荧光检测 | 第80页 |
| 3.8 转基因愈伤抗除草剂浓度的确定 | 第80页 |
| 3.9 转基因愈伤原花青素含量的检测 | 第80-82页 |
| 4. 讨论 | 第82-83页 |
| 5. 小结 | 第83-85页 |
| 第五章 结论、创新点与展望 | 第85-89页 |
| 1 结论 | 第85-87页 |
| 1.1 甘肃红豆草不同器官原花青素和花青素含量季节变化特征 | 第85页 |
| 1.2 甘肃红豆草原花青素生物合成相关基因的克隆和信息学分析 | 第85-86页 |
| 1.3 携带GFP和bar基因的双标记选择植物表达载体的构建和转化分析 | 第86-87页 |
| 2 创新点 | 第87页 |
| 3.展望 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 附录 | 第97-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简介 | 第101-102页 |
| 导师简介 | 第102-103页 |
