致谢 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语 | 第13-17页 |
1 引言 | 第17-20页 |
2 材料和方法 | 第20-53页 |
2.1 仪器设备和试剂 | 第20-24页 |
2.1.1 仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.2 主要生物化学试剂 | 第21-24页 |
2.2 细胞系和组织样本 | 第24页 |
2.2.1 细胞系 | 第24页 |
2.2.2 组织样本 | 第24页 |
2.3 缓冲液和培养液的配制方法 | 第24-31页 |
2.3.1 核酸凝胶电泳缓冲液 | 第24页 |
2.3.2 蛋白免疫印迹缓冲液 | 第24-28页 |
2.3.3 基因克隆缓冲液 | 第28页 |
2.3.4 细胞培养液 | 第28-29页 |
2.3.5 ChIRP缓冲液 | 第29-30页 |
2.3.6 蛋白质银染缓冲液 | 第30-31页 |
2.4 实验方法 | 第31-53页 |
2.4.1 RNA表达水平检测 | 第31-33页 |
2.4.2 蛋白表达水平检测 | 第33-34页 |
2.4.3 细胞免疫荧光 | 第34-35页 |
2.4.4 细胞迁移、侵袭实验 | 第35-36页 |
2.4.5 小鼠尾静脉注射检测结直肠癌细胞体内转移 | 第36页 |
2.4.6 组织化学染色 | 第36-37页 |
2.4.7 ChIRP实验及改良 | 第37-43页 |
2.4.8 蛋白质银染 | 第43页 |
2.4.9 RIP实验 | 第43-46页 |
2.4.10 siRNA和过表达载体的转染 | 第46-47页 |
2.4.11 PLKO.1慢病毒系统干扰实验 | 第47-51页 |
2.4.12 TGF-β体外诱导EMT模型的建立 | 第51页 |
2.4.13 临床资料和数据统计 | 第51-52页 |
2.4.14 实验中所用的核苷酸序列表 | 第52-53页 |
3 结果 | 第53-93页 |
3.1 转录组芯片筛选结直肠癌细胞受TGF-β处理后差异表达的lncRNA | 第53-64页 |
3.1.1 转录转录组芯片结果 | 第53-56页 |
3.1.2 LINC01133在不同结直肠癌细胞系中的表达情况检测 | 第56-57页 |
3.1.3 验证转录组芯片结果确认TGF-β对LINC01133的调控作用 | 第57-64页 |
3.2 LINC01133抑制结直肠癌EMT和转移 | 第64-82页 |
3.2.1 干扰LINC01133对结直肠癌细胞发生EMT和转移影响 | 第64-68页 |
3.2.2 过表达LINC01133对结直肠癌细胞EMT和转移的影响 | 第68-71页 |
3.2.3 LINC01133抑制结直肠癌细胞在小鼠体内转移 | 第71-77页 |
3.2.4 LINC01133在临床样本中的表达水平的临床意义 | 第77-82页 |
3.3 探索LINC01133调控结直肠癌细胞EMT和转移过程中的作用机制 | 第82-93页 |
3.3.1 分离鉴定LINC01133的结合蛋白SRSF6 | 第82-86页 |
3.3.2 SRSF6促进结直肠癌EMT和转移 | 第86-90页 |
3.3.3 LINC01133对结直肠癌细胞EMT和转移的抑制作用依赖于SRSF6 | 第90-93页 |
4 讨论 | 第93-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-103页 |
综述 | 第103-123页 |
参考文献 | 第118-123页 |
作者简历 | 第123-124页 |