缩略词表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-13页 |
Abstract | 第13-18页 |
前言 | 第19-25页 |
第1章 Sigma-1 受体在ChIs上对钙离子通道的调节作用 | 第25-40页 |
1 实验材料 | 第25-27页 |
1.1 动物、引物、抗体 | 第25页 |
1.2 药品试剂、耗材 | 第25-26页 |
1.3 仪器设备 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-32页 |
2.1 溶液配制 | 第27-29页 |
2.2 纹状体脑片制备 | 第29页 |
2.3 大胆碱能神经元定位 | 第29-30页 |
2.4 单细胞RT-PCR | 第30-31页 |
2.5 连续切片的制备 | 第31页 |
2.6 免疫荧光染色 | 第31页 |
2.7 全细胞膜片钳记录 | 第31-32页 |
2.8 统计分析 | 第32页 |
3 实验结果 | 第32-37页 |
3.1 大胆碱能神经元中Sigma-1 受体及钙离子通道的表达 | 第32-34页 |
3.2 免疫荧光染色 | 第34页 |
3.3 全细胞膜片钳记录到Sigma-1 受体对大胆碱能神经元钙电流的抑制作用 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 小结 | 第38-40页 |
第2章 Sigma-1 受体对爪蟾卵母细胞上N型钙通道的调节作用 | 第40-62页 |
1 实验材料 | 第40-42页 |
1.1 动物、菌种、抗体、质粒 | 第40页 |
1.2 药品试剂、耗材 | 第40-41页 |
1.3 仪器设备 | 第41-42页 |
2 实验方法 | 第42-51页 |
2.1 溶液配制 | 第42-44页 |
2.2 细菌培养 | 第44页 |
2.3 提取质粒 | 第44-45页 |
2.4 体外转录 | 第45-48页 |
2.5 爪蟾卵母细胞的分离及培养 | 第48-49页 |
2.6 爪蟾卵母细胞的注射 | 第49页 |
2.7 双电极电压钳记录 | 第49-50页 |
2.8 Western Blot | 第50-51页 |
2.9 统计分析 | 第51页 |
3 实验结果 | 第51-58页 |
3.1 成功建立独立表达Sigma-1 受体和N型钙通道的卵母细胞表达模型 | 第51-52页 |
3.2 不同浓度的Sigma-1 受体对N型钙通道在卵母细胞中的抑制作用不同 | 第52-54页 |
3.3 Sigma-1 受体介导SKF-10047 对N型钙通道的抑制作用 | 第54-56页 |
3.4 卵母细胞中不同浓度的SKF-10047 对N型钙电流的抑制作用 | 第56-57页 |
3.5 N型钙电流受卵母细胞内胞内钙释放通道和胞内钙离子的影响 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
5 小结 | 第61-62页 |
第3章 Sigma-1 受体对N型钙通道调节机制的初步探讨 | 第62-73页 |
1 实验材料 | 第62-63页 |
1.1 细胞、抗体、质粒 | 第62页 |
1.2 药品试剂和耗材 | 第62-63页 |
1.3 仪器设备 | 第63页 |
2 实验方法 | 第63-65页 |
2.1 溶液配制 | 第63页 |
2.2 细胞复苏 | 第63页 |
2.3 细胞传代 | 第63页 |
2.4 细胞冻存 | 第63-64页 |
2.5 细胞瞬时转染 | 第64页 |
2.6 观察细胞荧光 | 第64页 |
2.7 荧光共振能量转移 | 第64-65页 |
2.8 免疫共沉淀 | 第65页 |
3 实验结果 | 第65-69页 |
3.1 Sigma-1 受体与N型钙通道在HEK-293T细胞上的表达 | 第65-67页 |
3.2 Sigma-1 受体与N型钙通道在HEK-293T细胞中发生蛋白相互作用 | 第67-68页 |
3.3 Sigma-1 受体与N型钙通道在HEK-293T细胞中可以形成蛋白复合体 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-72页 |
5 小结 | 第72-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
附录 | 第85-86页 |
个人简历 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |