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Sigma-1受体对N型钙通道的负性调节作用及其机制研究

缩略词表第6-8页
中文摘要第8-13页
Abstract第13-18页
前言第19-25页
第1章 Sigma-1 受体在ChIs上对钙离子通道的调节作用第25-40页
    1 实验材料第25-27页
        1.1 动物、引物、抗体第25页
        1.2 药品试剂、耗材第25-26页
        1.3 仪器设备第26-27页
    2 实验方法第27-32页
        2.1 溶液配制第27-29页
        2.2 纹状体脑片制备第29页
        2.3 大胆碱能神经元定位第29-30页
        2.4 单细胞RT-PCR第30-31页
        2.5 连续切片的制备第31页
        2.6 免疫荧光染色第31页
        2.7 全细胞膜片钳记录第31-32页
        2.8 统计分析第32页
    3 实验结果第32-37页
        3.1 大胆碱能神经元中Sigma-1 受体及钙离子通道的表达第32-34页
        3.2 免疫荧光染色第34页
        3.3 全细胞膜片钳记录到Sigma-1 受体对大胆碱能神经元钙电流的抑制作用第34-37页
    4 讨论第37-38页
    5 小结第38-40页
第2章 Sigma-1 受体对爪蟾卵母细胞上N型钙通道的调节作用第40-62页
    1 实验材料第40-42页
        1.1 动物、菌种、抗体、质粒第40页
        1.2 药品试剂、耗材第40-41页
        1.3 仪器设备第41-42页
    2 实验方法第42-51页
        2.1 溶液配制第42-44页
        2.2 细菌培养第44页
        2.3 提取质粒第44-45页
        2.4 体外转录第45-48页
        2.5 爪蟾卵母细胞的分离及培养第48-49页
        2.6 爪蟾卵母细胞的注射第49页
        2.7 双电极电压钳记录第49-50页
        2.8 Western Blot第50-51页
        2.9 统计分析第51页
    3 实验结果第51-58页
        3.1 成功建立独立表达Sigma-1 受体和N型钙通道的卵母细胞表达模型第51-52页
        3.2 不同浓度的Sigma-1 受体对N型钙通道在卵母细胞中的抑制作用不同第52-54页
        3.3 Sigma-1 受体介导SKF-10047 对N型钙通道的抑制作用第54-56页
        3.4 卵母细胞中不同浓度的SKF-10047 对N型钙电流的抑制作用第56-57页
        3.5 N型钙电流受卵母细胞内胞内钙释放通道和胞内钙离子的影响第57-58页
    4 讨论第58-61页
    5 小结第61-62页
第3章 Sigma-1 受体对N型钙通道调节机制的初步探讨第62-73页
    1 实验材料第62-63页
        1.1 细胞、抗体、质粒第62页
        1.2 药品试剂和耗材第62-63页
        1.3 仪器设备第63页
    2 实验方法第63-65页
        2.1 溶液配制第63页
        2.2 细胞复苏第63页
        2.3 细胞传代第63页
        2.4 细胞冻存第63-64页
        2.5 细胞瞬时转染第64页
        2.6 观察细胞荧光第64页
        2.7 荧光共振能量转移第64-65页
        2.8 免疫共沉淀第65页
    3 实验结果第65-69页
        3.1 Sigma-1 受体与N型钙通道在HEK-293T细胞上的表达第65-67页
        3.2 Sigma-1 受体与N型钙通道在HEK-293T细胞中发生蛋白相互作用第67-68页
        3.3 Sigma-1 受体与N型钙通道在HEK-293T细胞中可以形成蛋白复合体第68-69页
    4 讨论第69-72页
    5 小结第72-73页
结论第73-74页
参考文献第74-85页
附录第85-86页
个人简历第86-87页
致谢第87页

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