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miRNA对Cripto-1高表达的肿瘤细胞增殖及侵袭的调控作用及机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
引言第10-23页
    一、肿瘤的发生机制第10-12页
        (一)肿瘤发生的相关因素第10-11页
        (二)原癌基因在肿瘤中的作用第11-12页
    二、Cripto-1的研究进展第12-16页
        (一)Cripto-1的概述第12-14页
        (二)Cripto-1的主要生物学功能第14页
        (三)Cripto-1与肿瘤的关系第14-15页
        (四)Cripto-1基因的表达调控第15-16页
    三、真核基因的表达调控第16-18页
        (一)染色质水平的调控第16页
        (二)转录水平的调控第16-17页
        (三)转录后水平的调控第17页
        (四)翻译水平的调控第17页
        (五)翻译后水平的调控第17-18页
    四、miRNA的研究进展第18-23页
        (一)miRNA的简介及其生物合成第18-19页
        (二)miRNA作用调节机制的研究进展第19-21页
        (三)miRNA与肿瘤的关系第21页
        (四)本研究的目的与意义第21-23页
第一部分 材料和方法第23-33页
    一、实验仪器和材料第23-24页
        (一)实验仪器第23页
        (二)实验试剂及材料第23-24页
    二、实验方法第24-33页
        (一)靶向Cripto-1的miRNA的预测第24-25页
        (二)细胞培养相关技术第25页
        (三)细胞瞬时转染第25-26页
        (四)荧光素酶活性检测第26页
        (五)qRT-PCR第26-28页
        (六)蛋白免疫印迹分析第28-29页
        (七)MTT分析第29-30页
        (八)BrdU掺入实验第30页
        (九)Ki67免疫荧光染色第30页
        (十)Boyden小室实验第30-31页
        (十一)细胞划痕实验第31页
        (十二)细胞凋亡检测实验第31-32页
        (十三)细胞周期检测实验第32-33页
第二部分 实验结果与分析第33-47页
    一、靶向Cripto-1基因的mi RNA的预测及鉴定第33-37页
        (一)靶向Cripto-1基因的miRNA的预测第33-34页
        (二)miRNA和Cripto-1mRNA 3'UTR特异性结合的鉴定第34-35页
        (三)miRNA对Cripto-1表达水平的影响第35-37页
        (四)miRNA靶向Cripto-1的反向验证第37页
    二、miRNA对Cripto-1高表达的肿瘤细胞增殖及侵袭的影响第37-41页
        (一)miRNA对HeLa细胞活力的影响第38页
        (二)miRNA对HeLa细胞增殖能力的影响第38-39页
        (三)miRNA对HeLa细胞侵袭能力的影响第39-40页
        (四)miRNA对HeLa细胞迁移能力的影响第40-41页
    三、miRNA抑制Cripto-1高表达的肿瘤细胞活力及侵袭能力的作用机制研究第41-47页
        (一)miRNA对HeLa细胞凋亡的影响第41-44页
        (二)miRNA对HeLa细胞周期的影响第44-45页
        (三)miRNA对HeLa细胞EMT相关蛋白的影响第45-47页
第三部分 讨论第47-50页
    一、miRNA对Cripto-1的表达调控研究第47-48页
    二、miRNA对Cripto-1高表达肿瘤细胞的增殖及侵袭能力的影响及其机制研究第48-50页
第四部分 结论第50-51页
参考文献第51-55页
附录第55-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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