摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第10-23页 |
一、肿瘤的发生机制 | 第10-12页 |
(一)肿瘤发生的相关因素 | 第10-11页 |
(二)原癌基因在肿瘤中的作用 | 第11-12页 |
二、Cripto-1的研究进展 | 第12-16页 |
(一)Cripto-1的概述 | 第12-14页 |
(二)Cripto-1的主要生物学功能 | 第14页 |
(三)Cripto-1与肿瘤的关系 | 第14-15页 |
(四)Cripto-1基因的表达调控 | 第15-16页 |
三、真核基因的表达调控 | 第16-18页 |
(一)染色质水平的调控 | 第16页 |
(二)转录水平的调控 | 第16-17页 |
(三)转录后水平的调控 | 第17页 |
(四)翻译水平的调控 | 第17页 |
(五)翻译后水平的调控 | 第17-18页 |
四、miRNA的研究进展 | 第18-23页 |
(一)miRNA的简介及其生物合成 | 第18-19页 |
(二)miRNA作用调节机制的研究进展 | 第19-21页 |
(三)miRNA与肿瘤的关系 | 第21页 |
(四)本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
第一部分 材料和方法 | 第23-33页 |
一、实验仪器和材料 | 第23-24页 |
(一)实验仪器 | 第23页 |
(二)实验试剂及材料 | 第23-24页 |
二、实验方法 | 第24-33页 |
(一)靶向Cripto-1的miRNA的预测 | 第24-25页 |
(二)细胞培养相关技术 | 第25页 |
(三)细胞瞬时转染 | 第25-26页 |
(四)荧光素酶活性检测 | 第26页 |
(五)qRT-PCR | 第26-28页 |
(六)蛋白免疫印迹分析 | 第28-29页 |
(七)MTT分析 | 第29-30页 |
(八)BrdU掺入实验 | 第30页 |
(九)Ki67免疫荧光染色 | 第30页 |
(十)Boyden小室实验 | 第30-31页 |
(十一)细胞划痕实验 | 第31页 |
(十二)细胞凋亡检测实验 | 第31-32页 |
(十三)细胞周期检测实验 | 第32-33页 |
第二部分 实验结果与分析 | 第33-47页 |
一、靶向Cripto-1基因的mi RNA的预测及鉴定 | 第33-37页 |
(一)靶向Cripto-1基因的miRNA的预测 | 第33-34页 |
(二)miRNA和Cripto-1mRNA 3'UTR特异性结合的鉴定 | 第34-35页 |
(三)miRNA对Cripto-1表达水平的影响 | 第35-37页 |
(四)miRNA靶向Cripto-1的反向验证 | 第37页 |
二、miRNA对Cripto-1高表达的肿瘤细胞增殖及侵袭的影响 | 第37-41页 |
(一)miRNA对HeLa细胞活力的影响 | 第38页 |
(二)miRNA对HeLa细胞增殖能力的影响 | 第38-39页 |
(三)miRNA对HeLa细胞侵袭能力的影响 | 第39-40页 |
(四)miRNA对HeLa细胞迁移能力的影响 | 第40-41页 |
三、miRNA抑制Cripto-1高表达的肿瘤细胞活力及侵袭能力的作用机制研究 | 第41-47页 |
(一)miRNA对HeLa细胞凋亡的影响 | 第41-44页 |
(二)miRNA对HeLa细胞周期的影响 | 第44-45页 |
(三)miRNA对HeLa细胞EMT相关蛋白的影响 | 第45-47页 |
第三部分 讨论 | 第47-50页 |
一、miRNA对Cripto-1的表达调控研究 | 第47-48页 |
二、miRNA对Cripto-1高表达肿瘤细胞的增殖及侵袭能力的影响及其机制研究 | 第48-50页 |
第四部分 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |