| 中文摘要 | 第8-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 符号说明 | 第18-20页 |
| 1. 前言 | 第20-25页 |
| 2. 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.1 质粒 | 第25页 |
| 2.2 菌株 | 第25页 |
| 2.3 细胞 | 第25页 |
| 2.4 试剂 | 第25-27页 |
| 2.4.1 工具酶、分子量标准Markers | 第25页 |
| 2.4.2 抗体 | 第25页 |
| 2.4.3 引物 | 第25-26页 |
| 2.4.4 试剂盒 | 第26页 |
| 2.4.5 其他生化试剂 | 第26-27页 |
| 2.5 仪器设备 | 第27页 |
| 2.6 主要溶液的配制 | 第27-29页 |
| 2.6.1 Western Blot试剂 | 第27-28页 |
| 2.6.2 RPMI-1640培养基(含10%胎牛血清的RPM-1640完全培养基) | 第28页 |
| 2.6.3 PBS磷酸盐缓冲液 | 第28-29页 |
| 2.6.4 细胞消化液(0.25%胰酶+0. 02%EDTA) | 第29页 |
| 2.6.5 细胞冻存液 | 第29页 |
| 2.6.6 4%多聚甲醛 | 第29页 |
| 2.7 组织标本 | 第29页 |
| 3. 实验方法 | 第29-41页 |
| 3.1 常规实验方法 | 第29-30页 |
| 3.2 细胞培养 | 第30页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第30页 |
| 3.2.2 细胞冻存与复苏 | 第30页 |
| 3.3 反转录、聚合酶链式反应和实时荧光定量PCR | 第30-34页 |
| 3.3.1 细胞总RNA提取 | 第30-31页 |
| 3.3.2 细胞内miRNA提取及反转录 | 第31-33页 |
| 3.3.3 逆转录反应合成cDNA | 第33页 |
| 3.3.4 实时荧光定量PCR扩增目的基因 | 第33-34页 |
| 3.4 蛋白质印迹 | 第34-35页 |
| 3.5 细胞转染 | 第35-36页 |
| 3.5.1 质粒转染真核细胞 | 第35-36页 |
| 3.5.2 microRNA核苷酸片段转染真核细胞 | 第36页 |
| 3.6 荧光素酶报告实验 | 第36-37页 |
| 3.7 免疫组织化学分析 | 第37-39页 |
| 3.8 CCK-8细胞增殖实验 | 第39页 |
| 3.8.1 细胞活性检测 | 第39页 |
| 3.8.2 制作标准曲线 | 第39页 |
| 3.9 Transwell侵袭实验 | 第39-40页 |
| 3.10 统计学分析 | 第40-41页 |
| 4. 实验结果 | 第41-52页 |
| 4.1 LOX在卵巢癌组织标本和细胞系中的表达 | 第41-42页 |
| 4.1.1 LOX在卵巢透明细胞癌组织标本中的表达 | 第41页 |
| 4.1.2 LOX在卵巢癌细胞系中的表达 | 第41-42页 |
| 4.2 LOX对卵巢透明细胞癌增殖和侵袭的影响 | 第42-44页 |
| 4.2.1 LOX过表达体系的构建 | 第42-43页 |
| 4.2.2 LOX对细胞增殖能力的影响 | 第43页 |
| 4.2.3 LOX对细胞侵袭能力的影响 | 第43-44页 |
| 4.3 筛选并证实调控LOX的microRNA,分析其与LOX表达量之间的关系 | 第44-49页 |
| 4.3.1 生物信息学预测并筛选调控LOX的microRNA | 第44-45页 |
| 4.3.2 miR-29b在卵巢癌细胞系中的表达谱 | 第45-46页 |
| 4.3.3 miR-29b能够通过与LOX基因m RNA 3' UTR区互补配对发挥转录后调控作用 | 第46-48页 |
| 4.3.4 过表达miR-29b能够抑制内源性LOX蛋白表达水平 | 第48-49页 |
| 4.4 miR-29b对卵巢透明细胞癌增殖和侵袭的影响 | 第49-52页 |
| 4.4.1 miR-29b在ES-2细胞中过表达和敲低体系的构建 | 第49-50页 |
| 4.4.2 miR-29b对细胞增殖能力的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.3 miR-29b对细胞侵袭能力的影响 | 第51-52页 |
| 5. 讨论 | 第52-57页 |
| 6. 结论 | 第57-58页 |
| 7. 参考文献 | 第58-64页 |
| 8. 致谢 | 第64-65页 |
| 9. 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-66页 |
| 10. 学位论文评阅及答辩情况 | 第66-67页 |
| 11. 外文论文 | 第67-107页 |
