| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 禽流感概述 | 第9-10页 |
| 1.2 凝素蛋白(HA) | 第10-13页 |
| 1.2.1 HA的翻译后加工和修饰过程 | 第10-11页 |
| 1.2.2 HA的细胞受体结合位点 | 第11-12页 |
| 1.2.3 HA的免疫原性 | 第12页 |
| 1.2.4 HA的抗原变异 | 第12-13页 |
| 1.3 历史上的流感疫情 | 第13-14页 |
| 1.4 高致病性禽流感的发生及危害 | 第14页 |
| 1.5 禽流感的公共卫生意义 | 第14-15页 |
| 1.6 禽流感病毒的诊断 | 第15-16页 |
| 1.6.1 病原学诊断 | 第15页 |
| 1.6.2 清学诊断 | 第15-16页 |
| 1.6.3 分子生物学诊断技术 | 第16页 |
| 1.7 本研究的目的意义 | 第16-17页 |
| 第二章 H5型禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第17-47页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验动物、细胞系和毒株 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要溶液及其配制 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 免疫原的制备 | 第19页 |
| 2.2.2 动物免疫 | 第19页 |
| 2.2.3 单抗筛选方法的建立 | 第19-20页 |
| 2.2.4 小鼠骨髓瘤细胞的准备 | 第20页 |
| 2.2.5 饲养细胞的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.6 细胞融合 | 第21页 |
| 2.2.7 针对H5HA蛋白阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第21-22页 |
| 2.2.8 杂交瘤细胞的克隆化(有限稀释法) | 第22页 |
| 2.2.9 细胞冻存 | 第22页 |
| 2.2.10 细胞复苏 | 第22-23页 |
| 2.2.11 单克隆抗体腹水的制备 | 第23页 |
| 2.2.12 杂交瘤细胞培养上清及腹水中单克隆抗体效价的测定 | 第23页 |
| 2.2.13 抗体亚类的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.14 杂交瘤细胞的染色体计数 | 第24页 |
| 2.2.15 特异性实验 | 第24-25页 |
| 2.2.16 HA单克隆抗体对不同H5型分离株光谱性检测 | 第25页 |
| 2.2.17 间接免疫荧光实验(IFA)检验血凝素蛋白的反应性 | 第25页 |
| 2.2.18 中和试验 | 第25页 |
| 2.2.19 HA质粒的构建 | 第25-30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-44页 |
| 2.3.1 抗原的制备 | 第30-31页 |
| 2.3.2 细胞融合与筛选 | 第31页 |
| 2.3.3 H5型病毒HA蛋白单克隆抗体细胞株的建立 | 第31页 |
| 2.3.4 单克隆抗体细胞株培养上清和腹水效价的测定 | 第31-32页 |
| 2.3.5 各株单克隆抗体亚类的鉴定结果 | 第32页 |
| 2.3.6 杂交瘤细胞染色体数目分析 | 第32-33页 |
| 2.3.7 单克隆抗体对禽流感病毒不同亚型病毒特异性实验 | 第33-34页 |
| 2.3.8 对其他具有HA活性病毒的反应性 | 第34-35页 |
| 2.3.9 H5亚型禽流感病毒特异性单克隆抗体对不同分支H5亚型病毒分离株的交叉特异性实验 | 第35-37页 |
| 2.3.10 单克隆抗体与病毒HA蛋白的反应性 | 第37-38页 |
| 2.3.11 HA单克隆抗体和H5亚型病毒之间的中和特性 | 第38-42页 |
| 2.3.12 DK/GD/S1322/2010病毒株HA质粒的构建及Western-blot结果 | 第42-44页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第44-47页 |
| 2.4.1 免疫原制备和动物免疫 | 第44-45页 |
| 2.4.2 细胞融合和杂交瘤细胞株的建立 | 第45页 |
| 2.4.3 单抗对H5亚型禽流感宾度分离株的交叉反应性 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
