致谢 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第13-47页 |
1.1 引言 | 第13-16页 |
1.1.1 蛋白质结构测定方法 | 第13-15页 |
1.1.1.1 X射线晶体学技术 | 第14页 |
1.1.1.2 核磁共振波谱技术 | 第14-15页 |
1.1.1.3 三维电镜重构技术 | 第15页 |
1.1.2 商品化的蛋白质结晶仪器 | 第15-16页 |
1.2 基于微流控技术的蛋白质结晶筛选方法 | 第16-34页 |
1.2.1 基于PDMS薄膜的微泵微阀技术 | 第16-21页 |
1.2.1.1 PDMS芯片微阀技术 | 第17-19页 |
1.2.1.2 PDMS芯片微泵技术 | 第19-21页 |
1.2.2 微流控液滴技术 | 第21-30页 |
1.2.2.1 连续流液滴技术 | 第21-25页 |
1.2.2.2 液滴储存器技术(Droplet cartridge) | 第25-26页 |
1.2.2.3 基于PDMS微泵微阀的液滴技术 | 第26-29页 |
1.2.2.4 液滴实验室(DropLab) | 第29-30页 |
1.2.3 滑动芯片(SlipChip) | 第30-33页 |
1.2.3.1 液滴预装载(Pre-loaded)模式 | 第30-31页 |
1.2.3.2 用户装载(User-loaded)模式 | 第31-33页 |
1.2.4 其他系统 | 第33-34页 |
1.3 基于微流控技术的膜蛋白结晶方法 | 第34-38页 |
1.3.1 基于去垢剂的微流控膜蛋白结晶 | 第35-36页 |
1.3.2 基于脂质立方相的微流控膜蛋白结晶 | 第36-38页 |
1.4 小结与选题意义 | 第38-39页 |
1.5 参考文献 | 第39-47页 |
第二章 基于顺序操作液滴阵列(SODA)技术的高通量纳升级蛋白质结晶筛选方法的研究 | 第47-86页 |
2.1 引言 | 第47-48页 |
2.2 实验部分 | 第48-57页 |
2.2.1 实验试剂与材料 | 第48-51页 |
2.2.3 仪器设备 | 第51-53页 |
2.2.4 芯片加工 | 第53-54页 |
2.2.5 毛细管探针加工 | 第54-55页 |
2.2.6 实验操作 | 第55-57页 |
2.2.6.1 蛋白质结晶条件筛选 | 第55-56页 |
2.2.6.2 蛋白质结晶二维相图实验 | 第56-57页 |
2.3 结果与讨论 | 第57-82页 |
2.3.1 蛋白质结晶条件筛选系统的液滴生成及操控性能 | 第58-63页 |
2.3.1.1 不同粘度液体液滴的生成 | 第58-60页 |
2.3.1.2 不同体积液滴的生成精度 | 第60-61页 |
2.3.1.3 等体积连续试样加入技术的液滴生成精度 | 第61-62页 |
2.3.1.4 变体积连续试样加入技术的液滴生成精度 | 第62-63页 |
2.3.2 交叉污染 | 第63-64页 |
2.3.3 大规模蛋白质结晶条件筛选 | 第64-67页 |
2.3.3.1 Lysozyme结晶条件筛选实验与放大实验 | 第64-65页 |
2.3.3.2 Xylanase结晶条件的筛选实验及放大实验 | 第65-67页 |
2.3.3.3 其他水溶性蛋白质的结晶 | 第67页 |
2.3.4 液滴体积对蛋白质结晶行为的影响 | 第67-72页 |
2.3.4.1 不同液滴体积对蛋白质晶体数目的影响 | 第67-70页 |
2.3.4.2 结晶时间对蛋白质结晶行为的影响 | 第70-72页 |
2.3.5 膜蛋白的结晶 | 第72-79页 |
2.3.5.1 去垢剂溶液的点样精度 | 第72-73页 |
2.3.5.2 半封闭体系的MscL结晶筛选实验 | 第73-77页 |
2.3.5.3 加有盖片的全封闭体系的MscL结晶筛选实验 | 第77-79页 |
2.3.6 二维液滴阵列用于蛋白质结晶相图的快速测定 | 第79-82页 |
2.4 结论与展望 | 第82-83页 |
2.5 参考文献 | 第83-86页 |
附表-1 | 第86-88页 |
附表-2 | 第88-89页 |
附表-3 | 第89-90页 |
附表-4 | 第90-93页 |
附录 | 第93页 |