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超微量、高通量蛋白质结晶和筛选方法的研究

致谢第5-7页
摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 绪论第13-47页
    1.1 引言第13-16页
        1.1.1 蛋白质结构测定方法第13-15页
            1.1.1.1 X射线晶体学技术第14页
            1.1.1.2 核磁共振波谱技术第14-15页
            1.1.1.3 三维电镜重构技术第15页
        1.1.2 商品化的蛋白质结晶仪器第15-16页
    1.2 基于微流控技术的蛋白质结晶筛选方法第16-34页
        1.2.1 基于PDMS薄膜的微泵微阀技术第16-21页
            1.2.1.1 PDMS芯片微阀技术第17-19页
            1.2.1.2 PDMS芯片微泵技术第19-21页
        1.2.2 微流控液滴技术第21-30页
            1.2.2.1 连续流液滴技术第21-25页
            1.2.2.2 液滴储存器技术(Droplet cartridge)第25-26页
            1.2.2.3 基于PDMS微泵微阀的液滴技术第26-29页
            1.2.2.4 液滴实验室(DropLab)第29-30页
        1.2.3 滑动芯片(SlipChip)第30-33页
            1.2.3.1 液滴预装载(Pre-loaded)模式第30-31页
            1.2.3.2 用户装载(User-loaded)模式第31-33页
        1.2.4 其他系统第33-34页
    1.3 基于微流控技术的膜蛋白结晶方法第34-38页
        1.3.1 基于去垢剂的微流控膜蛋白结晶第35-36页
        1.3.2 基于脂质立方相的微流控膜蛋白结晶第36-38页
    1.4 小结与选题意义第38-39页
    1.5 参考文献第39-47页
第二章 基于顺序操作液滴阵列(SODA)技术的高通量纳升级蛋白质结晶筛选方法的研究第47-86页
    2.1 引言第47-48页
    2.2 实验部分第48-57页
        2.2.1 实验试剂与材料第48-51页
        2.2.3 仪器设备第51-53页
        2.2.4 芯片加工第53-54页
        2.2.5 毛细管探针加工第54-55页
        2.2.6 实验操作第55-57页
            2.2.6.1 蛋白质结晶条件筛选第55-56页
            2.2.6.2 蛋白质结晶二维相图实验第56-57页
    2.3 结果与讨论第57-82页
        2.3.1 蛋白质结晶条件筛选系统的液滴生成及操控性能第58-63页
            2.3.1.1 不同粘度液体液滴的生成第58-60页
            2.3.1.2 不同体积液滴的生成精度第60-61页
            2.3.1.3 等体积连续试样加入技术的液滴生成精度第61-62页
            2.3.1.4 变体积连续试样加入技术的液滴生成精度第62-63页
        2.3.2 交叉污染第63-64页
        2.3.3 大规模蛋白质结晶条件筛选第64-67页
            2.3.3.1 Lysozyme结晶条件筛选实验与放大实验第64-65页
            2.3.3.2 Xylanase结晶条件的筛选实验及放大实验第65-67页
            2.3.3.3 其他水溶性蛋白质的结晶第67页
        2.3.4 液滴体积对蛋白质结晶行为的影响第67-72页
            2.3.4.1 不同液滴体积对蛋白质晶体数目的影响第67-70页
            2.3.4.2 结晶时间对蛋白质结晶行为的影响第70-72页
        2.3.5 膜蛋白的结晶第72-79页
            2.3.5.1 去垢剂溶液的点样精度第72-73页
            2.3.5.2 半封闭体系的MscL结晶筛选实验第73-77页
            2.3.5.3 加有盖片的全封闭体系的MscL结晶筛选实验第77-79页
        2.3.6 二维液滴阵列用于蛋白质结晶相图的快速测定第79-82页
    2.4 结论与展望第82-83页
    2.5 参考文献第83-86页
附表-1第86-88页
附表-2第88-89页
附表-3第89-90页
附表-4第90-93页
附录第93页

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