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J亚群禽白血病病毒表位疫苗候选抗原表位的筛选与鉴定

符号说明第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-13页
1 前言第13-28页
   ·ALV-J病原学第13-19页
     ·病毒的概述第13-14页
     ·病毒的结构第14-15页
     ·病毒的基因组第15-16页
     ·ALV-J流行病学第16-17页
     ·ALV-J的致病性及危害第17-18页
     ·ALV-J的诊断与防控第18-19页
   ·抗原表位的介绍第19-25页
     ·抗原表位的概念与分类第19-20页
     ·B细胞抗原表位的研究方法第20-24页
     ·抗原表位的应用与研究意义第24-25页
   ·ALV-J抗原表位研究进展第25-26页
   ·ALV-J疫苗的研究第26页
   ·其他病毒表位疫苗研究进展第26-27页
   ·本课题的研究目的和意义第27-28页
2 实验材料第28-30页
   ·实验动物和细胞第28页
   ·实验主要菌种、病毒和载体质粒第28页
   ·主要试剂第28-29页
   ·主要仪器第29页
   ·实验地点第29-30页
3 实验方法第30-40页
   ·ALV-J抗原表位的筛选第30页
   ·多表位基因的串联合成第30页
   ·DH5α感受态细胞的制备第30-31页
   ·合成产物转化第31页
   ·质粒的提取第31-32页
   ·质粒酶切鉴定第32页
   ·原核表达载体的构建第32-33页
   ·重组菌的诱导表达第33页
   ·重组菌表达蛋白的鉴定第33-34页
   ·重组蛋白的提取与纯化第34页
   ·纯化蛋白的Western Blot验证第34-35页
   ·重组蛋白内毒素含量的检测第35-36页
   ·重组蛋白联合佐剂免疫动物实验第36页
     ·抗体消长规律监测第36页
     ·动物生长情况监测第36页
   ·体外病毒中和效果检测第36-37页
     ·中和作用病毒稀释条件验证第37页
     ·病毒中和实验第37页
   ·ALV-J gp85超变区抗原表位的鉴定第37-40页
     ·ALV-J gp85基因分段扩增第37-38页
     ·原核表达载体的构建第38-39页
     ·分段蛋白的表达与鉴定第39页
     ·包涵体的提取与纯化第39页
     ·ELISA分析抗原表位区域第39页
     ·抗原表位映射第39-40页
     ·抗原表位序列分析第40页
     ·氨基酸变异对抗原表位影响分析第40页
     ·表位肽对临床血清的检测第40页
4 结果与分析第40-55页
   ·ALV-J抗原表位的获得第40-41页
   ·多表位基因串联合成与鉴定第41-43页
   ·重组囊膜基因在大肠杆菌中的诱导表达第43页
   ·重组蛋白的纯化与Western Blot检测分析第43-45页
   ·重组蛋白内毒素含量的检测第45页
   ·重组蛋白联合佐剂免疫动物实验结果第45-47页
     ·抗体消长规律监测结果分析第45-46页
     ·鸡群生长情况监测结果第46-47页
   ·病毒中和效果检测第47-48页
   ·ALV-J gp85超变区抗原表位的鉴定第48-55页
     ·ALV-J gp85分段基因的获得第48-49页
     ·重组表达菌的获得第49页
     ·分段蛋白的诱导表达与鉴定第49-50页
     ·目的蛋白的提取与纯化分析第50-51页
     ·超变区抗原表位区域的初步分析第51页
     ·gp85抗原表位精确定位第51-52页
     ·表位氨基酸序列比对分析第52页
     ·氨基酸变异对表位抗原性影响分析第52-55页
     ·表位肽检测临床血清结果第55页
5 讨论第55-58页
6 结论第58-59页
参考文献第59-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间发表论文第69页

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