玉米籽粒发育异常突变体defective kernel2014(dek2014)的表型分析及基因定位
| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| ·玉米的起源与发展 | 第11页 |
| ·玉米籽粒的发育 | 第11-19页 |
| ·胚的生长发育 | 第11-13页 |
| ·胚乳的生长发育 | 第13-18页 |
| ·胚乳传递细胞 | 第14-16页 |
| ·糊粉层细胞 | 第16-17页 |
| ·内胚乳细胞 | 第17页 |
| ·胚旁细胞 | 第17-18页 |
| ·胚乳组织的凋亡 | 第18页 |
| ·籽粒发育进程中胚与胚乳的互作 | 第18-19页 |
| ·玉米籽粒中淀粉的合成 | 第19-23页 |
| ·淀粉的生物合成途径 | 第19-22页 |
| ·直链淀粉的合成 | 第20-21页 |
| ·支链淀粉的合成 | 第21-22页 |
| ·淀粉合成途径相关的蛋白酶 | 第22-23页 |
| ·SUS | 第22页 |
| ·AGPase | 第22-23页 |
| ·SS和BE | 第23页 |
| ·DBE | 第23页 |
| ·图位克隆技术的应用 | 第23-27页 |
| ·遗传群体的构建 | 第24页 |
| ·多态性分子标记的筛选 | 第24-25页 |
| ·目的基因的粗定位 | 第25页 |
| ·精细定位 | 第25-26页 |
| ·候选基因的确定 | 第26页 |
| ·候选基因的功能验证 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-51页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·玉米自交系材料 | 第28页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第28页 |
| ·酶与生化试剂 | 第28页 |
| ·PCR引物和基因片段测序 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-51页 |
| ·玉米材料的种植 | 第29页 |
| ·表型观察 | 第29页 |
| ·组织切片观察突变体表型 | 第29-31页 |
| ·玉米基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·CTAB法提取玉米叶片基因组DNA | 第31页 |
| ·CTAB法提取玉米种子基因组DNA | 第31页 |
| ·PCR筛选多态性SSR分子标记 | 第31-32页 |
| ·PCR产物的检测 | 第32-33页 |
| ·50×TAE电泳母液配制 | 第32页 |
| ·4%琼脂糖凝胶的配制及PCR产物的检测 | 第32页 |
| ·8%聚丙烯酰胺凝胶的配制及PCR产物的检测 | 第32-33页 |
| ·SSR分子标记的开发 | 第33页 |
| ·PCR扩增候选基因序列 | 第33-34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与遗传转化 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌的菌落PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·DNA测序 | 第36页 |
| ·植物组织总RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第37-38页 |
| ·实时定量PCR | 第38页 |
| ·顺式作用元件分析 | 第38页 |
| ·突变位点功能分析 | 第38-42页 |
| ·DE1基因过表达载体的构建 | 第42-46页 |
| ·DE1基因敲除载体的构建 | 第46-50页 |
| ·农杆菌介导的玉米幼胚转化 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-65页 |
| ·突变体表型观察 | 第51-52页 |
| ·组织切片观察突变体表型 | 第52-53页 |
| ·分离比统计 | 第53-54页 |
| ·目的基因的图位克隆 | 第54-65页 |
| ·多态性SSR分子标记的筛选 | 第54-55页 |
| ·目的基因的粗定位 | 第55-56页 |
| ·目的基因的精细定位 | 第56-57页 |
| ·候选基因的获得 | 第57-58页 |
| ·突变位点的确定 | 第58-59页 |
| ·顺式作用元件分析 | 第59-60页 |
| ·突变位点的功能分析 | 第60-61页 |
| ·候选基因的功能验证 | 第61-65页 |
| ·SH2基因的功能验证 | 第61-63页 |
| ·DE1基因的功能验证 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-81页 |
| 附录 | 第81-84页 |
| 致谢 | 第84页 |