| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·几丁质酶及RC7基因的研究进展 | 第10-12页 |
| ·杨树(Poplar)组织培养 | 第12-14页 |
| ·杨树组织培养概述 | 第12页 |
| ·影响杨树组织培养的一般因素 | 第12-14页 |
| ·转基因杨树抗病研究进展 | 第14-15页 |
| ·抗病毒病研究 | 第14页 |
| ·抗细菌病研究 | 第14页 |
| ·抗真菌病研究 | 第14-15页 |
| ·基因工程在杨树抗胁迫方面的研究进展 | 第15-16页 |
| ·转基因杨树抗虫研究进展 | 第15页 |
| ·转基因杨树耐旱研究进展 | 第15-16页 |
| ·转基因杨树耐盐研究进展 | 第16页 |
| ·杨树遗传转化技术概述 | 第16-19页 |
| ·植物遗传转化的常用方法 | 第16-17页 |
| ·影响农杆菌转化效率的一般因素 | 第17-19页 |
| ·杨树基因工程中存在的问题 | 第19-20页 |
| ·研究技术路线 | 第20-22页 |
| ·载体构建技术路线图 | 第20-21页 |
| ·试验整体技术路线图 | 第21-22页 |
| 第二章 pBI121-RC7表达载体的构建 | 第22-33页 |
| ·试验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·酶和试剂 | 第23页 |
| ·仪器和设备 | 第23页 |
| ·主要用到的缓冲溶液 | 第23页 |
| ·本试验所用的引物 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-28页 |
| ·引物设计扩增目的基因 | 第24页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第24页 |
| ·PCR扩增产物的琼脂糖凝胶回收目的 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌化学法感受态细胞的制备及转化方式 | 第25页 |
| ·pBI121载体的大量制备 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第26-27页 |
| ·pBI121载体与目的基因的酶切 | 第27页 |
| ·pBI121载体与目的基因的连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第27-28页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化方式 | 第28页 |
| ·结果分析 | 第28-31页 |
| ·RC7基因片段的PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·pBI121表达载体结构 | 第29页 |
| ·大肠杆菌的菌落检测 | 第29-30页 |
| ·pBI121-RC7载体的双酶切 | 第30-31页 |
| ·农杆菌菌落检测 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 湘林90再生体体系的建立 | 第33-41页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·环境 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·统计方式 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·不同种类及浓度配比生长调节剂对茎段腋芽的发育的影响 | 第36-37页 |
| ·不同种类及浓度配比生长调节剂对叶片愈伤组织诱导分化的影响 | 第37页 |
| ·不同种类及浓度配比生长调节剂对不定芽生长发育的影响 | 第37-38页 |
| ·不同种类及浓度配比生长调节剂对生根培养的影响 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 RC7基因转化湘林90的研究 | 第41-49页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·培养环境及分析指标 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·湘林90叶片不定芽生长发育卡那霉素的临界值确定 | 第43-44页 |
| ·工程菌液的制备 | 第44页 |
| ·菌液浓度对产生kan~r芽的影响 | 第44-45页 |
| ·侵染时间对产生kan~r芽的影响 | 第45-46页 |
| ·共培养时间对转化苗的影响 | 第46页 |
| ·Kan~r植株的获得 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 湘林90无性系转RC7基因的分子检测 | 第49-52页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·菌株与质粒 | 第49页 |
| ·引物 | 第49页 |
| ·溶液与试剂 | 第49页 |
| ·仪器 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50页 |
| ·植物基因组DNA提取 | 第50页 |
| ·PCR检测 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-51页 |
| ·植物基因组DNA提取 | 第50-51页 |
| ·PCR结果 | 第51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第六章 总结 | 第52-53页 |
| ·湘林90再生体系的构建 | 第52页 |
| ·RC7基因对湘林90的遗传转化 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 图版 | 第62-66页 |
| 附录A | 第66-67页 |
| 附录B (攻读硕士学位期间的学术成果) | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
