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福州温泉嗜热菌多样性及嗜热菌Geobacillus thermoglucosidasius低温适应的机制

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
第1章 引言第14-28页
   ·嗜热菌多样性研究现状第14-19页
     ·嗜热菌第14-15页
     ·嗜热菌研究意义第15页
     ·温泉嗜热菌第15-18页
       ·温泉嗜热菌多样性第16页
       ·温泉嗜热菌多样性研究方法第16-17页
       ·不依赖培养的方式间接研究温泉菌多样性第17-18页
     ·嗜热菌温度适应机制研究第18-19页
   ·嗜热菌温度适应机制的研究方法与适应性进化技术第19-22页
     ·嗜热菌温度适应机制的研究方法第19-21页
       ·温度胁迫下的表达变化第20页
       ·比较基因组学方法研究嗜热菌温度适应机制第20-21页
     ·适应性进化(Experimental evolution)研究嗜热菌温度适应机制第21-22页
   ·Geobacillus属研究进展第22-26页
     ·Geobacillus的定义第22-23页
     ·Geobacillus spp.应用第23-24页
     ·Geobacillus遗传转化体系研究进展第24-25页
     ·Geobacillus低温适应性及研究进展第25-26页
   ·本研究的内容和意义第26-28页
第2章 福州温泉细菌多样性第28-56页
   ·材料和方法第28-30页
     ·材料第28页
     ·方法第28-30页
       ·水体取样及样品处理第28-29页
       ·温泉水体中总细菌的16S rDNA高通量测序第29页
       ·温泉细菌多样性与温泉泉水理化性质的关系第29页
       ·温泉底泥取样及处理第29-30页
       ·可培养菌株16S rDNA序列的扩增、测序及比对第30页
       ·细菌系统发育分析第30页
       ·可培养细菌种类数据分析第30页
   ·结果与分析第30-49页
     ·温泉水非可培养细菌多样性第30-42页
       ·温泉水理化性质分析第30-31页
       ·水体样品基因组的提取与扩增第31页
       ·Illumina MiSeq高通量测序数据处理第31-36页
       ·各温泉水样中细菌分类学分析第36-38页
       ·温泉微生物多样性与水体理化性质的相关性第38-42页
     ·温泉底泥样品可培养细菌多样性第42-49页
       ·采样点环境第42页
       ·三处温泉底泥理化性质分析第42页
       ·培养嗜热菌种属多样性第42-43页
       ·培养嗜热菌的系统进化分析第43-46页
       ·培养嗜热菌种类数目与环境关系第46-49页
   ·讨论第49-53页
     ·福州温泉非可培养细菌多样性影响因素第49-51页
     ·可培养菌多样性与非可培养多样性的比较第51-52页
     ·福州温泉细菌多样性与国内外温泉微生物的比较第52-53页
   ·小结第53-56页
第3章 嗜热菌Geobacillus sp.CHB1的低温适应机制第56-93页
   ·材料与方法第56-61页
     ·菌株和试剂第56-57页
     ·Geobacillus sp.CHB1多相鉴定第57-58页
       ·样品分离与保藏第57页
       ·Geobacillus sp.CHB1的表型和生理生化特征鉴定第57页
       ·Geobacillus sp.CHB1的16S rDNA鉴定第57-58页
       ·细胞膜磷质脂肪酸鉴定第58页
       ·基因组G+C百分含量测定第58页
       ·Geobacillus sp.CHB1与近缘种的基因组杂交第58页
     ·菌株CHB1适应低温进化第58-61页
       ·初始菌株的准备第59页
       ·适应低温进化实验第59页
       ·适应低温生长的进化菌株的获取第59页
       ·菌体生长曲线绘制第59-60页
       ·脂肪酸的测定第60页
       ·菌体总蛋白的提取第60页
       ·总蛋白的SDS-PAGE电泳第60页
       ·总蛋白的2-D电泳第60-61页
       ·基因组测序第61页
   ·结果与分析第61-91页
     ·菌株CHB1的鉴定第61-65页
       ·菌株CHB1菌株表型特征第61页
       ·菌株CHB1的生理生化特征第61-62页
       ·CHB1的16S rDNA同源性鉴定第62页
       ·细胞膜磷脂脂肪酸组成分析第62-64页
       ·CHB1与其它标准菌株基因组水平的差异第64-65页
       ·菌株CHB1种属确定第65页
     ·CHB1基因组特征第65-68页
     ·菌株Geobacillus sp.CHB1的低温适应机制第68-91页
       ·Geobacillus sp.CHB1的适应性进化第68-70页
       ·进化菌株的确认第70-72页
       ·进化菌株细胞膜磷脂脂肪酸水平变化第72-74页
       ·蛋白组水平的变化第74-80页
       ·比较基因组学分析Geobacillus sp.CHB1低温适应机制第80-83页
       ·进化群体和进化个体的基因组水平的比较第83-84页
       ·低温进化过程中表型改变第84-91页
   ·讨论第91-92页
   ·小结第92-93页
第4章 过氧化氢酶与低温适应性第93-109页
   ·材料与方法第93-98页
     ·材料第93页
     ·初始菌株和进化菌株的获取第93-94页
     ·过氧化氢酶活性比较第94页
     ·过氧化氢酶基因转录水平的测定第94-95页
     ·过氧化氢对菌株生长的影响第95页
     ·过氧化氢酶反应温度和pH测定第95页
     ·过氧化氢酶基因的克隆和表达第95-97页
     ·重组过氧化氢酶的纯化第97-98页
     ·重组过氧化氢酶的动力学常数测定第98页
   ·结果与分析第98-106页
     ·初始菌株与进化菌株产过长氧化氢酶能力比较第98-99页
     ·过氧化氢酶基因在翻译和转录水平的变化第99-102页
     ·过氧化氢酶基因的克隆第102页
     ·载体构建及表达第102-104页
     ·菌株过氧化氢耐受性的改变第104-105页
     ·过氧化氢酶的性质第105-106页
   ·讨论第106-108页
   ·小结第108-109页
总结与展望第109-111页
参考文献第111-123页
附录第123-129页
致谢第129页

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