中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
英文缩略词 | 第13-15页 |
前言 | 第15-19页 |
1 研究目的与意义 | 第15-16页 |
2 P-糖蛋白(P-g P) | 第16-18页 |
3 PI3K/Akt信号通路与多药耐药 | 第18-19页 |
第一部分 新藤黄酸和阿霉素对MCF-7/ADR细胞活力的影响 | 第19-31页 |
1 实验材料及仪器 | 第19-21页 |
·细胞株 | 第19页 |
·药物 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要试剂的配制 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
2 实验方法 | 第21-24页 |
·细胞培养和传代 | 第21页 |
·细胞冻存和复苏 | 第21-22页 |
·细胞冻存 | 第21页 |
·细胞复苏 | 第21-22页 |
·细胞分组 | 第22页 |
·新藤黄酸药液的配制 | 第22页 |
·细胞计数 | 第22页 |
·药物敏感性实验(MTT法) | 第22-23页 |
·GNA增加MCF-7/ADR细胞对ADR敏感性的实验 | 第23页 |
·检测MCF-7/ADR和MCF-7 细胞内ADR的积累 | 第23-24页 |
·统计处理方法 | 第24页 |
3 实验结果 | 第24-29页 |
·药物对MCF-7/ADR细胞的敏感性试验(MTT法) | 第24-26页 |
·GNA增加MCF-7/ADR细胞对ADR敏感性的实验 | 第26-28页 |
·MCF-7/ADR和MCF-7 细胞内ADR的积累 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
5 小结 | 第30-31页 |
第二部分 新藤黄酸对人乳腺癌多药耐药细胞的逆转作用 | 第31-45页 |
1 实验材料及仪器 | 第31-33页 |
·细胞系及细胞培养 | 第31页 |
·药物 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·主要试剂的配制 | 第32页 |
·实验主要仪器 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-36页 |
·细胞培养和传代 | 第33页 |
·细胞冻存和复苏 | 第33-34页 |
·细胞冻存 | 第33页 |
·细胞复苏 | 第33-34页 |
·细胞分组 | 第34页 |
·新藤黄酸药液的配制 | 第34页 |
·细胞计数方法 | 第34页 |
·检测MCF-7/ADR细胞内ADR的积累 | 第34页 |
·检测MCF-7/ADR细胞内罗丹明123的积累 | 第34-35页 |
·检测MCF-7/ADR细胞内罗丹明123的外排 | 第35页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞细胞周期的影响的检测(PI单染) | 第35页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞内P-g P蛋白的影响的检测 | 第35-36页 |
·统计处理方法 | 第36页 |
3 实验结果 | 第36-42页 |
·GNA对MCF-7/ADR细胞内ADR浓度的影响 | 第36-37页 |
·GNA对MCF-7/ADR细胞内罗丹明123积累的影响 | 第37-38页 |
·GNA对MCF-7/ADR细胞内罗丹明123外排的影响 | 第38-40页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞细胞周期的影响(PI单染) | 第40-41页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞内P-g P蛋白的影响 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
5 小结 | 第43-45页 |
第三部分 新藤黄酸对人乳腺癌多药耐药逆转作用细胞的相关机制研究 | 第45-60页 |
1 实验材料及仪器 | 第45-48页 |
·细胞系及细胞培养 | 第45页 |
·药物 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-46页 |
·主要试剂的配制 | 第46-47页 |
·实验主要仪器 | 第47-48页 |
2 实验方法 | 第48-53页 |
·细胞培养和传代 | 第48页 |
·细胞冻存和复苏 | 第48页 |
·细胞冻存 | 第48页 |
·细胞复苏 | 第48页 |
·细胞分组 | 第48页 |
·新藤黄酸药液的配制 | 第48-49页 |
·细胞计数方法 | 第49页 |
·Western blot(WB)法检测细胞中P-g P、PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平 | 第49页 |
·蛋白样品制备 | 第49页 |
·蛋白含量的测定 | 第49-50页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第50-53页 |
·统计处理方法 | 第53页 |
3 实验结果 | 第53-57页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞P-g P蛋白的影响 | 第53-54页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
·新藤黄酸对MCF-7/ADR细胞PTEN的影响 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
5 小结 | 第59-60页 |
讨论 | 第60-61页 |
总结 | 第61-63页 |
实验线路图 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
综述 | 第71-82页 |
参考文献 | 第78-82页 |
附录 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |