| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-37页 |
| ·透皮给药技术 | 第13-19页 |
| ·概述 | 第13-14页 |
| ·皮肤结构 | 第14-15页 |
| ·透皮给药特点 | 第15页 |
| ·药物透皮假说 | 第15-16页 |
| ·透皮影响因素 | 第16-17页 |
| ·透皮增强方法学 | 第17-19页 |
| ·化学方法 | 第17页 |
| ·物理方法 | 第17-18页 |
| ·生物方法 | 第18-19页 |
| ·透皮给药药剂学方法 | 第19页 |
| ·基质处方筛选 | 第19页 |
| ·微乳 | 第19页 |
| ·脂质体 | 第19页 |
| ·透皮增强肽 | 第19-23页 |
| ·细胞渗透肽 | 第19-21页 |
| ·透皮增强肽 | 第21-22页 |
| ·透皮增强肽机理研究 | 第22-23页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第23-24页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第23页 |
| ·噬菌体展示技术筛选透皮肽方法学 | 第23-24页 |
| ·表皮生长因子 | 第24-26页 |
| ·表皮生长因子结构 | 第24-25页 |
| ·表皮生长因子信号转导[70,71] | 第25页 |
| ·表皮生长因子功能与应用 | 第25-26页 |
| ·钠钾ATP酶(Na+/K+-ATPase) | 第26-28页 |
| ·钠钾ATP酶(Na+/K+-ATPase) | 第26-28页 |
| ·钠钾ATP酶结构 | 第26-27页 |
| ·钠钾ATP酶的工作原理 | 第27-28页 |
| ·钠钾ATP酶β亚基 | 第28页 |
| ·ATP1B1基因的结构 | 第28页 |
| ·ATP1B1基因的功能 | 第28页 |
| ·透皮给药数学建模 | 第28-30页 |
| ·Fick定律 | 第29-30页 |
| ·朗缪尔方程 | 第30页 |
| ·阴道炎 | 第30-31页 |
| ·实验技术 | 第31-37页 |
| ·融合蛋白技术 | 第31-32页 |
| ·亲和纯化技术 | 第32-33页 |
| ·MTT实验 | 第33页 |
| ·Franz扩散系统 | 第33-34页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第34-37页 |
| 第2章 实验与方法 | 第37-55页 |
| ·分子实验方法 | 第37-43页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR反应) | 第37-38页 |
| ·质粒提取 | 第38页 |
| ·酶切与连接反应 | 第38页 |
| ·转化实验 | 第38-39页 |
| ·蛋白表达 | 第39-40页 |
| ·蛋白纯化 | 第40页 |
| ·TEV蛋白酶诱导表达及纯化 | 第40-41页 |
| ·分子筛 | 第41页 |
| ·BCA蛋白浓度测定 | 第41页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE电泳 | 第41-42页 |
| ·药物热稳定性测试 | 第42页 |
| ·药物皮内稳定性测试 | 第42-43页 |
| ·SPACE-EGF和siRNA连接 | 第43页 |
| ·细胞实验方法 | 第43-45页 |
| ·细胞培养 | 第43页 |
| ·细胞迁移检测 | 第43-44页 |
| ·ERK信号通路激活实验 | 第44页 |
| ·细胞渗透研究 | 第44-45页 |
| ·酵母双杂交 | 第45-46页 |
| ·转化酵母 | 第45页 |
| ·酵母结合筛库 | 第45页 |
| ·双杂交报告基因筛选 | 第45-46页 |
| ·酵母质粒DNA抽提 | 第46页 |
| ·免疫学方法 | 第46-48页 |
| ·免疫印迹实验 | 第46-47页 |
| ·免疫组化 | 第47-48页 |
| ·免疫共沉淀 | 第48页 |
| ·动物实验方法 | 第48-53页 |
| ·动物饲养及伦理陈述 | 第48-49页 |
| ·动物来源 | 第48页 |
| ·饲养条件 | 第48页 |
| ·实验许可 | 第48-49页 |
| ·皮肤处理及分离 | 第49页 |
| ·表皮层与真皮层分离 | 第49页 |
| ·体外透皮实验 | 第49-50页 |
| ·体内透皮实验 | 第50页 |
| ·冰冻切片 | 第50-51页 |
| ·大鼠阴道炎建模 | 第51-53页 |
| ·数据处理与分析 | 第53页 |
| ·处理数据软件 | 第53页 |
| ·数据统计与分析 | 第53页 |
| ·常用实验仪器 | 第53-55页 |
| 第3章 实验结果 | 第55-103页 |
| 第1节 TD1-hEGF融合蛋白制备和活性鉴定 | 第55-68页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·TD1-hEGF设计及克隆构建 | 第55-57页 |
| ·TD1-hEGF表达纯化 | 第57-58页 |
| ·TD1-hEGF理化性质鉴定 | 第58-60页 |
| ·TD1-hEGF细胞活性鉴定 | 第60-62页 |
| ·MTT实验检定TD1-hEGF对balb/c 3T3细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
| ·促balb/c 3T3细胞迁移鉴定融合蛋白活性 | 第61页 |
| ·促ERK1/2信号通路激活 | 第61-62页 |
| ·TD1-hEGF透皮活性鉴定 | 第62-66页 |
| ·体外透皮实验 | 第62-64页 |
| ·体内透皮实验 | 第64页 |
| ·融合模式与混合模式比较 | 第64-65页 |
| ·皮肤内积累情况 | 第65-66页 |
| ·药物稳定性研究 | 第66-67页 |
| ·本节小结 | 第67-68页 |
| 第2节 TD1-hEGF透皮能量依赖性研究 | 第68-75页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·能量抑制剂对TD1-hEGF透皮的影响 | 第68-69页 |
| ·温度对TD1-hEGF透皮的影响 | 第69-70页 |
| ·ATP对TD1-hEGF透皮的影响 | 第70-72页 |
| ·皮肤活性对TD1-hEGF透皮的影响 | 第72页 |
| ·能量类似物对TD1-hEGF透皮的影响 | 第72-73页 |
| ·TD1-hEGF在人皮中的透皮 | 第73-74页 |
| ·本节小结 | 第74-75页 |
| 第3节 TD1与Na~+,K~+-ATPase相互作用研究 | 第75-83页 |
| ·引言 | 第75页 |
| ·TD1与皮肤细胞的相互作用 | 第75-76页 |
| ·酵母双杂交技术筛选TD1相互作用蛋白 | 第76-78页 |
| ·TD1与ATP1B1相互作用的鉴定 | 第78-79页 |
| ·TD1与ATP1B1的C端相互作用 | 第79-80页 |
| ·TD1与ATP1B1相互作用的生物学效应 | 第80-81页 |
| ·ATP1B1对TD1介导的蛋白透皮给药的影响 | 第81-82页 |
| ·本节小结 | 第82-83页 |
| 第4节 透皮模型的建立 | 第83-92页 |
| ·引言 | 第83页 |
| ·透皮给药理论建模 | 第83-88页 |
| ·TD1和hEGF的传质过程 | 第83-85页 |
| ·边界和初始条件 | 第85-86页 |
| ·参数设置 | 第86-88页 |
| ·TD1不同初始浓度对传质的影响 | 第88-90页 |
| ·hEGF不同初始浓度对传质的影响 | 第90页 |
| ·本节小结 | 第90-92页 |
| 第5节 TD1-hEGF联合抗菌药对阴道炎治疗效果 | 第92-97页 |
| ·引言 | 第92页 |
| ·TD1-hEGF对阴道炎模型大鼠血清IL-1含量的影响 | 第92-93页 |
| ·TD1-hEGF对阴道炎模型大鼠阴道脏器指数的影响 | 第93-94页 |
| ·TD1-hEGF联合抗菌药对阴道炎模型大鼠病理组织学的影响 | 第94-96页 |
| ·本节小结 | 第96-97页 |
| 第6节 应用融合肽经皮靶向输运siRNA沉默黑色素瘤细胞关键基因 | 第97-103页 |
| ·引言 | 第97页 |
| ·SPACE-hEGF物理性质鉴定 | 第97-98页 |
| ·SE-siRC皮肤渗透研究 | 第98页 |
| ·SE-siRC细胞渗透和靶向研究 | 第98-100页 |
| ·基因沉默对黑色素瘤细胞杀伤作用 | 第100-101页 |
| ·本节小结 | 第101-103页 |
| 第4章 总结与展望 | 第103-105页 |
| ·TD1-hEGF应用研究 | 第103页 |
| ·透皮肽机理研究 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-119页 |
| 附录1 常用縮略词 | 第119-121页 |
| 附录2 攻读研究生期间发表学术论文及取得的研究成果 | 第121-122页 |
| 附录3 发表的文章 | 第122-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
