摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-11页 |
缩略表 | 第11-12页 |
1 引言 | 第12-19页 |
·绵羊肺腺瘤概述 | 第12-13页 |
·绵羊肺腺瘤临床症状及其病变 | 第12页 |
·绵羊肺腺瘤的病原学 | 第12-13页 |
·绵羊肺腺瘤的诊断与防治 | 第13页 |
·JSRV概述 | 第13-15页 |
·JSRV基因组结构特征 | 第13页 |
·JSRV的基因及其编码的蛋白 | 第13-14页 |
·JSRV的生命周期 | 第14页 |
·内、外源性绵羊肺腺瘤病毒 | 第14-15页 |
·透明质酸酶2(Hyal-2) | 第15页 |
·JSRV的致瘤机制 | 第15页 |
·JSRV Env诱导转化细胞信号通路 | 第15-18页 |
·P13K-Akt-mTor通路 | 第16页 |
·Ras-Raf-MEK-MAPK信号通路 | 第16-17页 |
·Hyal2/RON信号通路 | 第17-18页 |
·肺泡上皮细胞 | 第18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 构建稳定表达JSRV受体绵羊Hyal-2蛋白的体外传代细胞系 | 第19-26页 |
摘要 | 第19页 |
·材料 | 第19-20页 |
·质粒及细胞 | 第19页 |
·试验试剂 | 第19页 |
·试验仪器 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-22页 |
·稳定表达Hyal-2细胞系的建立 | 第20页 |
·G418筛选浓度的确定 | 第20页 |
·脂质体转染 | 第20页 |
·G418筛选 | 第20页 |
·单克隆分离 | 第20页 |
·稳定表达Hyal-2细胞系的鉴定 | 第20-22页 |
·激光共聚焦显微镜观察目的蛋白定位 | 第20-21页 |
·RT-PCR检测 | 第21页 |
·Western blot检测 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-25页 |
·G418最佳筛选浓度的试验结果 | 第22-23页 |
·激光共聚焦显微镜观察红色荧光的定位 | 第23页 |
·细胞总RNA的测定 | 第23-24页 |
·RT-PCR检测结果 | 第24页 |
·Western blot检测结果 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25页 |
·小结 | 第25-26页 |
3 JSRV Env转染3种体外培养细胞 | 第26-33页 |
摘要 | 第26页 |
·材料 | 第26-27页 |
·质粒及细胞 | 第26页 |
·试验试剂 | 第26页 |
·试验仪器 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-28页 |
·细胞转染 | 第27页 |
·激光共聚焦显微镜观察Env在细胞内的定位 | 第27页 |
·用RT-PCR方法鉴定Env的表达 | 第27页 |
·Western blot方法鉴定Env的表达 | 第27-28页 |
·结果 | 第28-31页 |
·激光共聚焦显微镜观察结果 | 第28-30页 |
·RT-PCR方法鉴定结果 | 第30-31页 |
·Western blot鉴定结果 | 第31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
·小结 | 第32-33页 |
4 JSRV Env对细胞信号通路中关键酶的影响 | 第33-51页 |
摘要 | 第33页 |
·材料 | 第33-34页 |
·质粒及细胞 | 第33页 |
·试验试剂 | 第33-34页 |
·试验仪器 | 第34页 |
·方法 | 第34-35页 |
·设计引物 | 第34页 |
·JSRV Env对AKT、ERK和TERT mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
·JSRV Env对AKT、ERK和TERT蛋白表达的影响 | 第35页 |
·数据分析 | 第35页 |
·结果 | 第35-50页 |
·荧光定量PCR产物的鉴定 | 第35-36页 |
·AKT、MAPK、TERT和β-actin的标准曲线 | 第36-37页 |
·AKT、ERK、TERT和β-actin的扩增曲线和溶解曲线 | 第37-40页 |
·JSRV Env对AKT、ERK和TERT mRNA表达的影响 | 第40-43页 |
·JSRV Env对AKT、MAPK和TERT蛋白表达的影响 | 第43-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
·小结 | 第51页 |
5 全文结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
作者简介 | 第60页 |