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JSRV-Env真核表达产物与体外细胞作用后对细胞信号通路中关键酶的影响

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
缩略表第11-12页
1 引言第12-19页
   ·绵羊肺腺瘤概述第12-13页
     ·绵羊肺腺瘤临床症状及其病变第12页
     ·绵羊肺腺瘤的病原学第12-13页
     ·绵羊肺腺瘤的诊断与防治第13页
   ·JSRV概述第13-15页
     ·JSRV基因组结构特征第13页
     ·JSRV的基因及其编码的蛋白第13-14页
     ·JSRV的生命周期第14页
     ·内、外源性绵羊肺腺瘤病毒第14-15页
   ·透明质酸酶2(Hyal-2)第15页
   ·JSRV的致瘤机制第15页
   ·JSRV Env诱导转化细胞信号通路第15-18页
     ·P13K-Akt-mTor通路第16页
     ·Ras-Raf-MEK-MAPK信号通路第16-17页
     ·Hyal2/RON信号通路第17-18页
   ·肺泡上皮细胞第18页
   ·研究的目的和意义第18-19页
2 构建稳定表达JSRV受体绵羊Hyal-2蛋白的体外传代细胞系第19-26页
 摘要第19页
   ·材料第19-20页
     ·质粒及细胞第19页
     ·试验试剂第19页
     ·试验仪器第19-20页
   ·方法第20-22页
     ·稳定表达Hyal-2细胞系的建立第20页
       ·G418筛选浓度的确定第20页
       ·脂质体转染第20页
       ·G418筛选第20页
       ·单克隆分离第20页
     ·稳定表达Hyal-2细胞系的鉴定第20-22页
       ·激光共聚焦显微镜观察目的蛋白定位第20-21页
       ·RT-PCR检测第21页
       ·Western blot检测第21-22页
   ·结果第22-25页
     ·G418最佳筛选浓度的试验结果第22-23页
     ·激光共聚焦显微镜观察红色荧光的定位第23页
     ·细胞总RNA的测定第23-24页
     ·RT-PCR检测结果第24页
     ·Western blot检测结果第24-25页
   ·讨论第25页
   ·小结第25-26页
3 JSRV Env转染3种体外培养细胞第26-33页
 摘要第26页
   ·材料第26-27页
     ·质粒及细胞第26页
     ·试验试剂第26页
     ·试验仪器第26-27页
   ·方法第27-28页
     ·细胞转染第27页
     ·激光共聚焦显微镜观察Env在细胞内的定位第27页
     ·用RT-PCR方法鉴定Env的表达第27页
     ·Western blot方法鉴定Env的表达第27-28页
   ·结果第28-31页
     ·激光共聚焦显微镜观察结果第28-30页
     ·RT-PCR方法鉴定结果第30-31页
     ·Western blot鉴定结果第31页
   ·讨论第31-32页
   ·小结第32-33页
4 JSRV Env对细胞信号通路中关键酶的影响第33-51页
 摘要第33页
   ·材料第33-34页
     ·质粒及细胞第33页
     ·试验试剂第33-34页
     ·试验仪器第34页
   ·方法第34-35页
     ·设计引物第34页
     ·JSRV Env对AKT、ERK和TERT mRNA表达的影响第34-35页
     ·JSRV Env对AKT、ERK和TERT蛋白表达的影响第35页
     ·数据分析第35页
   ·结果第35-50页
     ·荧光定量PCR产物的鉴定第35-36页
     ·AKT、MAPK、TERT和β-actin的标准曲线第36-37页
     ·AKT、ERK、TERT和β-actin的扩增曲线和溶解曲线第37-40页
     ·JSRV Env对AKT、ERK和TERT mRNA表达的影响第40-43页
     ·JSRV Env对AKT、MAPK和TERT蛋白表达的影响第43-50页
   ·讨论第50-51页
   ·小结第51页
5 全文结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-60页
作者简介第60页

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