| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一篇 研究内容 | 第15-76页 |
| 第一章 禽类 H7N9 亚型流感病毒病原生态学调查研究 | 第15-32页 |
| 1. 材料与方法 | 第16页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·实验鸡胚、动物、毒株 | 第16页 |
| 2 方法 | 第16-22页 |
| ·样本 | 第16-17页 |
| ·样本来源 | 第16-17页 |
| ·样本组成及数量 | 第17页 |
| ·采集鸟类 | 第17页 |
| ·病毒分离 | 第17-18页 |
| ·样品初步处理 | 第17页 |
| ·病毒分离 | 第17-18页 |
| ·病毒亚型鉴定 | 第18-20页 |
| ·病毒总 RNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第19-20页 |
| ·病毒受体结合特性分析 | 第20-21页 |
| ·尿囊液处理 | 第20页 |
| ·病毒受体结合特性检测方法 | 第20-21页 |
| ·病毒遗传进化分析 | 第21页 |
| ·绿头鸭的 H7N9 病毒人工感染实验 | 第21-22页 |
| ·感染剂量和方法 | 第21-22页 |
| ·样本收集 | 第22页 |
| ·鸡胚接种 | 第22页 |
| 3. 结果 | 第22-27页 |
| ·流感病毒分离结果 | 第22-23页 |
| ·病毒亚型鉴定结果 | 第23-24页 |
| ·病毒受体结合特性分析结果 | 第24-25页 |
| ·病毒遗传进化结果 | 第25-27页 |
| ·绿头鸭的 H7N9 人工感染实验结果 | 第27页 |
| ·临床症状 | 第27页 |
| ·病毒滴定结果 | 第27页 |
| 4．讨论 | 第27-29页 |
| 小结 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二章 A 型流感病毒通用型人源化抗体的筛选 | 第32-43页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| 2. 方法 | 第33页 |
| ·流感抗体序列信息的收集 | 第33页 |
| ·分子模拟 | 第33页 |
| ·分子对接 | 第33页 |
| 3. 结果 | 第33-40页 |
| ·抗流感中和抗体的序列信息 | 第33-34页 |
| ·抗体轻、重链可变区氨基酸分析 | 第34-37页 |
| ·F10 重链分析 | 第34-35页 |
| ·F10 重链可变区拓扑结构分析 | 第35-36页 |
| ·F10 重链可变区结构特征分析 | 第36-37页 |
| ·轻链可变区序列特征分析 | 第37-39页 |
| ·轻链氨基酸位点分析 | 第38页 |
| ·F10 轻链可变区结构特征 | 第38-39页 |
| ·编号 F10 抗体轻链可变区构象 | 第39页 |
| ·抗体 F1 与 HA 作用模式分析 | 第39-40页 |
| 4．讨论 | 第40-41页 |
| 小结 | 第41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第三章 流感病毒通用型人源化抗体重组载体的构建 | 第43-59页 |
| 1 材料 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-50页 |
| ·基因的优化与合成 | 第44页 |
| ·合成基因的转化 | 第44-45页 |
| ·含有轻、重链可变区基因的质粒提取 | 第45页 |
| ·重组表达质粒及载体的制备 | 第45-47页 |
| ·酶切轻链位置的载体 PAC-κ-CH3 与轻链 L1 连接 | 第47-49页 |
| ·转染 PAC-κ-L1-H1-CH3 质粒至 sf9 细胞 | 第49-50页 |
| 3. 结果 | 第50-54页 |
| ·合成基因电泳结果 | 第50-51页 |
| ·合成轻链和重链的酶切鉴定结果 | 第51-52页 |
| ·载体 PAC-κ-CH3 与回收轻链连接结果 | 第52页 |
| ·PAC-κ-L-CH3 酶切鉴定结果 | 第52-53页 |
| ·PAC-κ-L-CH3 与重链可变区基因连接结果 | 第53-54页 |
| ·重组载体转染 sf9 细胞结果 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第四章 流感病毒通用型人源化抗体的鉴定 | 第59-70页 |
| 1 材料 | 第59-60页 |
| ·主要仪器 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| 2. 方法 | 第60-64页 |
| ·转染细胞上清的收获 | 第60页 |
| ·血凝抑制实验 | 第60页 |
| ·流感病毒 4 单位抗原的配制 | 第60-61页 |
| ·血凝抑制实验 | 第61页 |
| ·ELISA 实验 | 第61-64页 |
| ·ELISA 相关溶液配制 | 第61-63页 |
| ·蛋白包被量确定 | 第63页 |
| ·ELISA 检测方法 | 第63-64页 |
| ·免疫荧光实验 | 第64页 |
| 3．结果 | 第64-66页 |
| ·血凝抑制实验结果 | 第64-65页 |
| ·ElISA 结果 | 第65页 |
| ·转染细胞荧光抗体实验结果 | 第65-66页 |
| 4．讨论 | 第66-67页 |
| 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 全文结论 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-76页 |
| 第二篇 文献综述 | 第76-91页 |
| 摘要 | 第76页 |
| 一、流感病毒致病机理研究进展 | 第76-80页 |
| 二、广谱中和流感病毒的抗体研究进展 | 第80-82页 |
| 三、流感病毒感染人类及先天性免疫研究 | 第82-86页 |
| 四、结语 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-91页 |
| 在学期间发表的论文、课题负责人及科研课题情况 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
