| 摘要 | 第1-7页 |
| Summary | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 高等植物侧生器官的形态发育 | 第10-12页 |
| ·高等植物的侧生器官 | 第10-11页 |
| ·高等植物侧生器官的极性 | 第11-12页 |
| 2 控制植物侧生器官极性的基因 | 第12-14页 |
| ·控制植物远轴面极性的基因 | 第12-13页 |
| ·控制植物近轴面极性的基因 | 第13页 |
| ·对植物极性调控有关的 miRNA | 第13-14页 |
| 3 植物 KAN 基因的研究进展 | 第14-17页 |
| ·植物 KAN 基因的发现与鉴定 | 第14-15页 |
| ·植物 KAN 基因的结构及功能 | 第15-16页 |
| ·高等植物 KAN 基因的应用前景 | 第16-17页 |
| 4 本氏烟草生物学特性 | 第17-19页 |
| ·本氏烟草形态学特性 | 第17-18页 |
| ·本氏烟草的遗传学特性 | 第18-19页 |
| ·本氏烟草与其他物种相比 | 第19页 |
| 5 本实验目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 本氏烟草 KANADI 基因克隆及其生物信息学分析 | 第20-37页 |
| 1 材料与方法 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第20页 |
| ·酶及生化试剂 | 第20页 |
| ·仪器与设备 | 第20页 |
| ·试剂及配方 | 第20-21页 |
| ·培养液及配方 | 第21页 |
| 2 试验方法 | 第21-27页 |
| ·基因的克隆及测序 | 第21-27页 |
| ·植物总 RNA 提取和反转录 | 第21-23页 |
| ·KANADI 转录因子的 PCR 扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR 扩增产物回收 | 第24-25页 |
| ·胶回收片段与克隆载体的连接 | 第25页 |
| ·产物转化 | 第25-27页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第27页 |
| ·本氏烟草 KANADI 序列的生物信息学分析 | 第27页 |
| 3 结果分析 | 第27-35页 |
| ·本氏烟草总 RNA 质量分析 | 第27页 |
| ·cDNA 第一链合成检测 | 第27-28页 |
| ·KANADI 转录因子的 PCR 扩增 | 第28页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第28-29页 |
| ·生物信息学分析 | 第29-35页 |
| ·核苷酸及氨基酸的分析 | 第29-34页 |
| ·KANADI 蛋白二级结构分析 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·PCR 反应体系的优化 | 第35-36页 |
| ·生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 第三章 本氏烟草中 KANAD 表达检测及亚细胞定位载体的构建 | 第37-48页 |
| 1 材料与试剂 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株及载体 | 第37页 |
| ·酶及试剂盒 | 第37页 |
| ·仪器与设备 | 第37页 |
| ·试剂及培养基配方 | 第37-38页 |
| ·主要试剂及配方 | 第37-38页 |
| ·培养基的配方 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-42页 |
| ·KANADI 转录因子的器官表达检测 | 第38-40页 |
| ·不同器官的 RNA 提取及反转录成 cDNA 第一链 | 第38-39页 |
| ·实时荧光定量 PCR(Real-time PCR,qRT-PCR)引物设计 | 第39页 |
| ·不同器官表达检测 | 第39-40页 |
| ·KANADI::GFP 融合基因植物表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·GFP 表达载体引物设计 | 第40页 |
| ·KANADI 转录因子的亚克隆 | 第40页 |
| ·酶切反应 | 第40-41页 |
| ·目的基因与载体 pCAMBIA-1305.1 连接及转化 | 第41-42页 |
| ·GFP 亚细胞定位检测 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-45页 |
| ·本氏烟草不同器官的 RNA 提取及反转录检测 | 第42-43页 |
| ·基因表达定量分析 | 第43-44页 |
| ·本氏烟草亚细胞定位重组质粒的鉴定 | 第44-45页 |
| ·本氏烟草 KANADI::GFP 定位检测 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·不同器官的表达检测 | 第45-46页 |
| ·RNA 提取方法的优化 | 第45页 |
| ·实时荧光定量体系选择 | 第45-46页 |
| ·GFP 定位检测的优势 | 第46-48页 |
| 第四章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 导师简介 | 第57-58页 |
| 个人简介 | 第58-59页 |