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布氏杆菌LPS抗原及其单克隆抗体的制备与纯化

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-25页
   ·布氏杆菌第14-15页
   ·布氏杆菌的研究现状第15-16页
     ·流行病学第15页
     ·病理变化和临床表现第15页
     ·致病机理第15-16页
   ·布氏杆菌诊断研究第16-18页
     ·传统检测方法第16-17页
       ·凝集试验第16-17页
       ·补体结合试验(CFT)第17页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第17页
     ·分子生物学方法第17-18页
       ·PCR 法第17-18页
       ·荧光探针法(FPA)第18页
   ·表面抗原研究进展第18-19页
     ·脂多糖的外露多糖链(O 链)第18-19页
     ·布氏杆菌的外膜蛋白(OMPS)第19页
     ·半抗原多糖(NH)和多糖 B第19页
   ·抗体生成理论第19-20页
   ·单克隆技术的产生及其原理第20-21页
     ·单克隆抗体的制备原理第20页
     ·单克隆抗体及其制备路线第20-21页
   ·单克隆抗体的特性及其应用第21-23页
     ·鼠源性单克隆抗体的优缺点第21-22页
     ·单克隆抗体的应用第22-23页
       ·单克隆抗体在生物学研究方面的应用第22-23页
       ·单克隆抗体在疾病诊断和疾病治疗方面的应用第23页
   ·研究的目的和意义第23-25页
第二章 布氏杆菌 LPS 抗原制备及其免疫原性测定第25-35页
   ·材料第25-26页
     ·菌株第25页
     ·试验动物第25页
     ·主要试剂第25页
     ·仪器设备第25-26页
   ·方法第26-30页
     ·菌体复苏制备第26页
     ·LPS 抗原粗品制备第26页
     ·LPS 纯化第26页
     ·LPS 多糖含量测定第26-27页
     ·LPS SDS-PAGE 电泳银染第27-29页
     ·小鼠免疫第29页
     ·血清效价测定第29-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·菌体制备及纯化第30页
     ·LPS 得率第30-31页
     ·SDS-PAGE 银染鉴定第31-32页
     ·免疫小鼠血清效价测定第32-33页
       ·血凝试验检测血清效价第32-33页
       ·DOT-Elisa 检测抗体血清效价第33页
   ·讨论第33-34页
     ·布氏杆菌的培养第33页
     ·LPS 的提取与纯化第33-34页
     ·LPS 的免疫原性第34页
   ·小结第34-35页
第三章 布氏杆菌病抗 LPS 单克隆抗体的制备第35-56页
   ·材料第35-36页
     ·抗原第35页
     ·实验动物第35页
     ·主要试剂第35页
     ·主要设备第35-36页
   ·单抗制备及鉴定第36-41页
     ·抗原乳化第36页
     ·抗原免疫第36页
     ·ELI SA 检测体系的建立第36页
     ·饲养层细胞的制备第36-37页
     ·SP2/0 骨髓瘤细胞的复苏和培养第37页
     ·免疫脾细胞的制备及培养第37-38页
     ·细胞融合第38页
     ·融合稀薄的选择性培养第38页
     ·杂交瘤细胞的筛选第38-39页
     ·杂交瘤细胞的克隆化第39页
     ·单克隆抗体的鉴定第39-40页
       ·单抗效价的测定第39页
       ·杂交瘤细胞株稳定性的检测第39-40页
       ·抗体亲和力的测定第40页
     ·单克隆抗体的纯化第40-41页
       ·硫酸铵盐析沉淀纯化抗体第40页
       ·亲和层析纯化抗体第40-41页
   ·结果第41-52页
     ·ELISA 反应体系的建立第41页
     ·饲养细胞的制备第41页
     ·骨髓瘤细胞的复苏及其传代培养第41-42页
     ·免疫脾细胞制备第42-43页
     ·杂交瘤细胞筛选结果第43-45页
     ·杂交瘤细胞的克隆化培养第45-47页
     ·单抗亲和力测定第47-50页
     ·单抗的纯化第50-52页
   ·讨论第52-54页
     ·动物免疫过程第53页
     ·细胞融合过程第53页
     ·阳性细胞筛选过程第53-54页
     ·细胞克隆化培养过程第54页
     ·单克隆抗体纯化第54页
   ·本章总结第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-63页
附录第63-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66-67页
致谢第67页

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