| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-25页 |
| ·布氏杆菌 | 第14-15页 |
| ·布氏杆菌的研究现状 | 第15-16页 |
| ·流行病学 | 第15页 |
| ·病理变化和临床表现 | 第15页 |
| ·致病机理 | 第15-16页 |
| ·布氏杆菌诊断研究 | 第16-18页 |
| ·传统检测方法 | 第16-17页 |
| ·凝集试验 | 第16-17页 |
| ·补体结合试验(CFT) | 第17页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第17页 |
| ·分子生物学方法 | 第17-18页 |
| ·PCR 法 | 第17-18页 |
| ·荧光探针法(FPA) | 第18页 |
| ·表面抗原研究进展 | 第18-19页 |
| ·脂多糖的外露多糖链(O 链) | 第18-19页 |
| ·布氏杆菌的外膜蛋白(OMPS) | 第19页 |
| ·半抗原多糖(NH)和多糖 B | 第19页 |
| ·抗体生成理论 | 第19-20页 |
| ·单克隆技术的产生及其原理 | 第20-21页 |
| ·单克隆抗体的制备原理 | 第20页 |
| ·单克隆抗体及其制备路线 | 第20-21页 |
| ·单克隆抗体的特性及其应用 | 第21-23页 |
| ·鼠源性单克隆抗体的优缺点 | 第21-22页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第22-23页 |
| ·单克隆抗体在生物学研究方面的应用 | 第22-23页 |
| ·单克隆抗体在疾病诊断和疾病治疗方面的应用 | 第23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 布氏杆菌 LPS 抗原制备及其免疫原性测定 | 第25-35页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·菌体复苏制备 | 第26页 |
| ·LPS 抗原粗品制备 | 第26页 |
| ·LPS 纯化 | 第26页 |
| ·LPS 多糖含量测定 | 第26-27页 |
| ·LPS SDS-PAGE 电泳银染 | 第27-29页 |
| ·小鼠免疫 | 第29页 |
| ·血清效价测定 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·菌体制备及纯化 | 第30页 |
| ·LPS 得率 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE 银染鉴定 | 第31-32页 |
| ·免疫小鼠血清效价测定 | 第32-33页 |
| ·血凝试验检测血清效价 | 第32-33页 |
| ·DOT-Elisa 检测抗体血清效价 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·布氏杆菌的培养 | 第33页 |
| ·LPS 的提取与纯化 | 第33-34页 |
| ·LPS 的免疫原性 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 布氏杆菌病抗 LPS 单克隆抗体的制备 | 第35-56页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·抗原 | 第35页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要设备 | 第35-36页 |
| ·单抗制备及鉴定 | 第36-41页 |
| ·抗原乳化 | 第36页 |
| ·抗原免疫 | 第36页 |
| ·ELI SA 检测体系的建立 | 第36页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·SP2/0 骨髓瘤细胞的复苏和培养 | 第37页 |
| ·免疫脾细胞的制备及培养 | 第37-38页 |
| ·细胞融合 | 第38页 |
| ·融合稀薄的选择性培养 | 第38页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化 | 第39页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·单抗效价的测定 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞株稳定性的检测 | 第39-40页 |
| ·抗体亲和力的测定 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第40-41页 |
| ·硫酸铵盐析沉淀纯化抗体 | 第40页 |
| ·亲和层析纯化抗体 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-52页 |
| ·ELISA 反应体系的建立 | 第41页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第41页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏及其传代培养 | 第41-42页 |
| ·免疫脾细胞制备 | 第42-43页 |
| ·杂交瘤细胞筛选结果 | 第43-45页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化培养 | 第45-47页 |
| ·单抗亲和力测定 | 第47-50页 |
| ·单抗的纯化 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·动物免疫过程 | 第53页 |
| ·细胞融合过程 | 第53页 |
| ·阳性细胞筛选过程 | 第53-54页 |
| ·细胞克隆化培养过程 | 第54页 |
| ·单克隆抗体纯化 | 第54页 |
| ·本章总结 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |