| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-22页 |
| 1. 植物防御体系研究进展 | 第11-13页 |
| ·HR | 第11-12页 |
| ·SAR | 第12页 |
| ·脂质转移蛋白(LTP) | 第12-13页 |
| 2. 碘化丙啶 | 第13-14页 |
| 3. 绿色荧光蛋白 | 第14页 |
| 4. 定量PCR(RT-qPCR)技术的原理 | 第14-21页 |
| ·SYBR Green I DNA染料 | 第14-15页 |
| ·荧光阈值和Ct值 | 第15页 |
| ·RT-qPCR的定量原理 | 第15-17页 |
| ·RT-qPCR数据分析 | 第17-20页 |
| ·绝对定量 | 第18页 |
| ·相对定量 | 第18-20页 |
| ·以质量单位作为标准进行相对定量 | 第18页 |
| ·以参照基因作为标准进行相对定量 | 第18-20页 |
| ·RT-qPCR实验体系的优化 | 第20-21页 |
| ·引物和扩增片段的设计 | 第20页 |
| ·RT-qPCR实验体系的优化 | 第20-21页 |
| ·退火温度的优化 | 第20-21页 |
| ·用标准曲线进行RT-qPCR反应的评估 | 第21页 |
| 5. 本研究的内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 RT-qPCR实验体系的设计和优化 | 第22-30页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-26页 |
| ·材料、仪器、试剂与耗材 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-26页 |
| ·MS培养基的配制 | 第22页 |
| ·拟南芥的种植 | 第22-23页 |
| ·RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·cDNA合成 | 第24-25页 |
| ·引物设计和退火温度的优化 | 第25页 |
| ·用标准曲线进行反应体系的评估 | 第25-26页 |
| 2. RT-qPCR反应体系的优化结果 | 第26-29页 |
| ·引物、扩增子和最适退火温度的选择 | 第26-28页 |
| ·反应体系的评估 | 第28-29页 |
| 3. 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 AtDHyPRP1转基因株系的鉴定 | 第30-38页 |
| 1. 材料与方法 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·AtDHyPRP1蛋白的计算机分析 | 第30页 |
| ·拟南芥和烟草的种植与培养条件 | 第30页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·拟南芥和烟草转基因株系的鉴定 | 第31-32页 |
| 2. 结果 | 第32-37页 |
| ·AtDHyPRP1蛋白的理化性质 | 第32-34页 |
| ·植物转化载体的结构 | 第34-35页 |
| ·转基因株系的鉴定 | 第35-37页 |
| 3. 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 AtDHyPRP1蛋白的亚细胞定位特征 | 第38-45页 |
| 1. 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料与试剂 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·蛋白质提取 | 第39页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE电泳及转膜 | 第40页 |
| ·亚细胞定位方法 | 第40-41页 |
| 2. 结果 | 第41-44页 |
| ·拟南芥表达的AtDHyPRP1-GFP融合蛋白的稳定性 | 第41-43页 |
| ·AtDHyPRP1-GFP融合蛋白的亚细胞定位特征 | 第43页 |
| ·病原体对AtDHyPRP1-GFP亚细胞定位的影响 | 第43-44页 |
| 3. 小结 | 第44-45页 |
| 第五章 AtDHyPRP1的时空和诱导表达模式 | 第45-48页 |
| 1. 材料与方法 | 第45页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45页 |
| ·AtDHyPRP1在不同组织中的表达模式 | 第45页 |
| ·植物激素对AtDHyPRP1表达的诱导作用 | 第45页 |
| 2. 结果 | 第45-47页 |
| ·AtDHyPRP1在不同组织中的表达模式 | 第45页 |
| ·植物激素对AtDHyPRP1表达的影响 | 第45-47页 |
| 3. 小结 | 第47-48页 |
| 第六章 AtDHyPRP1在系统获得性抗性中的功能 | 第48-54页 |
| 1. 材料与方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·AtDHyPRP1 RNA干扰株系中DIR1和AtLTP1基因的表达分析 | 第48-49页 |
| ·丁香假单胞菌的培养 | 第49页 |
| ·丁香假单胞菌对AtDHyPRP1表达的影响 | 第49页 |
| ·AtDHyPRP1对SAR防御反应的影响 | 第49页 |
| ·菌落计数方法 | 第49-50页 |
| ·拟南芥SAR中病程相关基因的分析 | 第50页 |
| 2. 结果 | 第50-53页 |
| ·AtDHyPRP1 RNAi株系中D1R1和AtLTP1基因的表达水平 | 第50-51页 |
| ·丁香假单胞菌侵染对AtDHyPRP1表达的影响 | 第51-52页 |
| ·AtDHyPRP1表达发生变化后对SAR的影响 | 第52-53页 |
| ·AtDHyPRP1对SAR相关抗性基因的影响 | 第53页 |
| 3. 小结 | 第53-54页 |
| 第七章 AtDHyPRP1对真菌病原体赤霉菌的抗性 | 第54-59页 |
| 1. 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·材料和培养基 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·赤霉菌的培养 | 第54页 |
| ·赤霉菌接种实验 | 第54页 |
| ·AtDHyPRP1转基因烟草中SAR相关抗性基因的表达分析 | 第54-55页 |
| 2. 结果 | 第55-57页 |
| ·AtDHyPRP1对拟南芥赤霉菌抗性的影响 | 第55页 |
| ·AtDHyPRP1对烟草赤霉菌抗性的影响 | 第55-57页 |
| 3. 小结 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第68页 |
| 攻读硕士学位期间的获奖情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
