| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-18页 |
| ·棉花早衰的研究 | 第13-15页 |
| ·棉花早衰的表现及危害 | 第13页 |
| ·棉花轮纹斑病 | 第13-14页 |
| ·棉花早衰成因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·植物基因功能研究 | 第15-16页 |
| ·基因差异表达研究 | 第15-16页 |
| ·基因功能研究—病毒诱导的基因沉默技术 | 第16页 |
| ·植物防御反应研究进展 | 第16-17页 |
| ·植物产生防御反应的种类 | 第16页 |
| ·植物产生防御反应的表现形式 | 第16-17页 |
| ·乙烯在植物叶片衰老过程中的作用 | 第17页 |
| ·研究目的、意义 | 第17-18页 |
| 第二章 基因芯片技术分析链格孢菌诱导棉花叶片衰老过程中的基因表达变化 | 第18-31页 |
| ·仪器与设备 | 第18页 |
| ·低温处理 | 第18页 |
| ·棉花材料及培养 | 第18页 |
| ·棉花植株低温处理 | 第18页 |
| ·棉花轮纹斑病接种 | 第18-19页 |
| ·供试链格孢菌株 | 第18-19页 |
| ·供试培养基 | 第19页 |
| ·棉花轮纹斑病接种 | 第19页 |
| ·棉花叶片 RNA 提取 | 第19-20页 |
| ·仪器与生化试剂 | 第19-20页 |
| ·RNA 提取步骤 | 第20页 |
| ·基因芯片测试及数据分析 | 第20-21页 |
| ·基因芯片测试 | 第20-21页 |
| ·数据分析 | 第21页 |
| ·QRT-PCR 验证芯片结果 | 第21-23页 |
| ·仪器与试剂 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21-23页 |
| ·实验步骤 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-29页 |
| ·正常生长的棉花接菌 3 天后基因表达的变化 | 第23-25页 |
| ·正常生长的棉花接菌 6 天后基因表达的变化 | 第25-26页 |
| ·低温诱导轮纹斑病发生的分子机理 | 第26-28页 |
| ·实时荧光定量 PCR 对芯片结果的验证 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-31页 |
| 第三章 利用 VIGS 技术研究防御应答相关基因功能 | 第31-45页 |
| ·材料与设备 | 第31页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·载体和菌株 | 第31页 |
| ·供试培养基 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·载体构建 | 第31-36页 |
| ·提取棉花 RNA | 第31页 |
| ·RNA 纯化 | 第31-32页 |
| ·cDNA 合成 | 第32页 |
| ·以 cDNA 为模板扩增片段(PCR) | 第32-33页 |
| ·目的片段与 pMD18-T Simple Vector 连接及转化 | 第33-34页 |
| ·VIGS 沉默载体构建 | 第34-35页 |
| ·VIGS 载体转入农杆菌菌株 EHA105 | 第35-36页 |
| ·注射病毒接种 | 第36-38页 |
| ·仪器与试剂 | 第36页 |
| ·接种方法 | 第36-37页 |
| ·RNA 提取及荧光定量 PCR 检测目的基因表达量 | 第37-38页 |
| ·接菌 | 第38页 |
| ·轮纹斑病发病情况调查 | 第38页 |
| ·DAB 染色和 H2O2含量的测定 | 第38-39页 |
| ·DAB 染色 | 第38页 |
| ·H_2O_2含量的测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·沉默载体在新陆早 13 号中高效沉默目的基因 | 第39-41页 |
| ·目的基因沉默的棉花叶片轮纹斑病抗性鉴定 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 乙烯对棉花叶片衰老进程的影响 | 第45-50页 |
| ·材料与设备 | 第45页 |
| ·试验材料 | 第45页 |
| ·载体和菌株 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45页 |
| ·乙烯合成的检测 | 第45-46页 |
| ·生化试剂 | 第45页 |
| ·乙烯合成的检测 | 第45-46页 |
| ·利用 VIGS 技术研究乙烯信号转导相关基因功能 | 第46-47页 |
| ·载体构建 | 第46页 |
| ·注射病毒接种 | 第46页 |
| ·接菌 | 第46-47页 |
| ·轮纹斑病发病情况调查 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-49页 |
| ·低温处理导致轮纹斑病发生过程中产生乙烯的情况 | 第47-48页 |
| ·沉默载体在新陆早 13 号棉花中高效沉默目的基因 | 第48页 |
| ·目的基因沉默的棉花植株的发病情况 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第五章 讨论 | 第50-52页 |
| 第六章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60页 |