| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 縮略词表 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-37页 |
| 1 植物细胞死亡的特点研究进展 | 第17-21页 |
| ·植物细胞死亡的发生 | 第17-18页 |
| ·植物细胞死亡的调控特点 | 第18-21页 |
| 2 主要细胞器与植物细胞死亡的关系 | 第21-30页 |
| ·线粒体 | 第21-26页 |
| ·液泡 | 第26-29页 |
| ·细胞核 | 第29-30页 |
| 3 细胞死亡过程中的信号分子及反应 | 第30-35页 |
| ·活性氧 | 第30-32页 |
| ·钙离子 | 第32-33页 |
| ·植物激素 | 第33页 |
| ·蛋白激酶 | 第33-34页 |
| ·微丝骨架 | 第34页 |
| ·梨自花花粉管死亡信号转导反应 | 第34-35页 |
| 4 结语 | 第35-37页 |
| 第二章 梨自花花粉管线粒体代谢特点 | 第37-51页 |
| 摘要 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·花粉培养 | 第38页 |
| ·梨花柱S-RNase提取及活性和浓度检测 | 第38页 |
| ·花柱S-RNase处理花粉管 | 第38-39页 |
| ·花粉管呼吸氧消耗检测 | 第39页 |
| ·花粉管线粒体提纯及完整性检测 | 第39-40页 |
| ·分离的线粒体呼吸氧消耗测定 | 第40页 |
| ·花粉管线粒体可溶性总蛋白二维电泳 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-48页 |
| ·梨自花花粉管呼吸氧消耗的变化 | 第41-42页 |
| ·分离得到梨花粉管线粒体完整性和纯度 | 第42-43页 |
| ·梨自花花粉管线粒体呼吸链变化 | 第43-45页 |
| ·梨自花花粉管线粒体可溶性蛋白变化 | 第45-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 梨花粉管衰老过程中线粒体作用特点 | 第51-77页 |
| 第一节 离体梨花粉管衰老特点 | 第51-62页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| 1 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·花粉培养 | 第52页 |
| ·花粉管生长统计 | 第52页 |
| ·FDA测定花粉管死亡率 | 第52页 |
| ·MDA含量测定 | 第52页 |
| ·电解质渗漏测定 | 第52-53页 |
| ·标记微丝骨架 | 第53页 |
| ·细胞核DNA降解检测 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-60页 |
| ·梨花粉管生长发育特点 | 第53-55页 |
| ·梨花粉管活力变化 | 第55-57页 |
| ·梨花粉管生长发育过程中MDA含量和电解质渗漏变化 | 第57页 |
| ·衰老梨花粉管发生微丝骨架解聚 | 第57-59页 |
| ·衰老梨花粉管核DNA降解 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 第二节 梨花粉管衰老过程中线粒体变化及其影响 | 第62-77页 |
| 摘要 | 第62-63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·花粉培养及处理 | 第63页 |
| ·花粉管长度统计 | 第63页 |
| ·FDA染色统计花粉管活力 | 第63页 |
| ·花粉管线粒体亚细胞结构检测 | 第63-64页 |
| ·花粉管线粒体膜电位标记与分析 | 第64页 |
| ·花粉管线粒体的分离及其完整性和纯度检测 | 第64页 |
| ·花粉管及分离的线粒体呼吸作用测定 | 第64页 |
| ·花粉管胞内ATP含量测定 | 第64页 |
| ·花粉管胞内pH检测 | 第64页 |
| ·花粉管V-ATPase活性检测 | 第64-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-74页 |
| ·衰老梨花粉管线粒体结构变化 | 第65-67页 |
| ·衰老花粉管线粒体膜电位变化 | 第67-68页 |
| ·衰老花粉管胞内ATP及其呼吸氧消耗变化 | 第68页 |
| ·pH值对分离的花粉管线粒体呼吸链复合体活性影响 | 第68-72页 |
| ·衰老花粉管胞质发生酸化 | 第72页 |
| ·衰老导致梨花粉管V-ATPase活性降低 | 第72-73页 |
| ·V-ATPase特异性抑制剂诱导花粉管早衰 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 线粒体膜电位抑制剂缬氨霉素诱导梨花粉管细胞核降解 | 第77-89页 |
| 摘要 | 第77-78页 |
| 1 材料与方法 | 第78-80页 |
| ·实验材料 | 第78页 |
| ·花粉培养及处理 | 第78页 |
| ·花粉萌发及花粉管生长统计 | 第78页 |
| ·花粉管线粒体膜电位测定 | 第78-79页 |
| ·DAPI荧光标记花粉管细胞核 | 第79页 |
| ·花粉管细胞提取 | 第79-80页 |
| ·细胞核完整性及细胞质污染检测 | 第80页 |
| ·花粉管胞内核酸内切酶检测 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-87页 |
| ·缬氨霉素对梨花粉萌发及生长的影响 | 第80-81页 |
| ·缬氨霉素对梨花粉管线粒体膜电位的影响 | 第81-82页 |
| ·线粒体功能衰退对细胞核的作用 | 第82-84页 |
| ·梨花粉管细胞核提取纯化 | 第84-87页 |
| ·梨花粉管胞内核酸内切酶检测 | 第87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 第五章 线粒体和NADPH氧化酶对梨花粉管尖端活性氧的影响 | 第89-105页 |
| 摘要 | 第89-90页 |
| 1 材料与方法 | 第90-94页 |
| ·实验材料 | 第90页 |
| ·花粉培养 | 第90页 |
| ·低温和线粒体呼吸抑制剂处理花粉管 | 第90页 |
| ·花粉管呼吸氧消耗测定 | 第90页 |
| ·NBT染色检测花粉管尖端活性氧(ROS) | 第90-91页 |
| ·花粉管过氧化氢(H_2O_2)亚细胞分析定位 | 第91页 |
| ·引物设计 | 第91页 |
| ·花粉管总RNA提取 | 第91-92页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第92页 |
| ·花粉管NADPH氧化酶基因克隆 | 第92-93页 |
| ·梨花粉管PrRBOH蛋白序列分析 | 第93页 |
| ·荧光定量PCR检测PrRBOH基因表达 | 第93-94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-103页 |
| ·NaN_3对梨花粉管线粒体呼吸功能的影响 | 第94页 |
| ·NaN_3对梨花粉管尖端ROS的影响 | 第94-95页 |
| ·DPI及低温对梨花粉管尖端ROS的影响 | 第95-97页 |
| ·低温对梨花粉管H_2O_2亚细胞定位分析 | 第97-98页 |
| ·梨花粉管NADPH氧化酶基因PrRBOH的克隆 | 第98-100页 |
| ·PrRBOH蛋白序列分析 | 第100-102页 |
| ·PrRBOH基因qRT-PCR定量表达分析 | 第102-103页 |
| 3 讨论 | 第103-105页 |
| 第六章 低温胁迫下梨花粉管线粒体的变化及其作用 | 第105-115页 |
| 摘要 | 第105-106页 |
| 1 材料与方法 | 第106-107页 |
| ·实验材料 | 第106页 |
| ·花粉培养及处理 | 第106页 |
| ·花粉管生长统计 | 第106页 |
| ·FM4-64标记花粉管囊泡 | 第106-107页 |
| ·花粉管囊泡亚细胞分布 | 第107页 |
| ·花粉管呼吸氧消耗测定 | 第107页 |
| ·花粉管内ATP含量测定 | 第107页 |
| 2 结果与分析 | 第107-113页 |
| ·低温抑制花粉管生长 | 第107-109页 |
| ·低温下花粉管胞吞作用变化 | 第109-110页 |
| ·梨花粉管尖端囊泡的亚细胞分布 | 第110-111页 |
| ·低温下花粉管呼吸氧消耗及胞内ATP含量变化 | 第111页 |
| ·花粉管线粒体呼吸抑制剂对花粉管生长的影响 | 第111-113页 |
| 3 讨论 | 第113-115页 |
| 综合讨论 | 第115-121页 |
| 全文结论 | 第121-123页 |
| 全文创新点 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-143页 |
| 致谢 | 第143-145页 |
| 在读期间发表和投稿的学术论文 | 第145页 |
