| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 图表目录 | 第13-15页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-35页 |
| ·细胞凋亡 | 第17-21页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第17-18页 |
| ·细胞凋亡的分子机制 | 第18-20页 |
| ·细胞凋亡与肿瘤的关系 | 第20-21页 |
| ·细胞自噬 | 第21-27页 |
| ·细胞自噬的过程及分类 | 第21-22页 |
| ·细胞自噬的分子机制 | 第22-25页 |
| ·细胞自噬与肿瘤的关系 | 第25-27页 |
| ·细胞自噬和细胞凋亡的关系 | 第27-28页 |
| ·内质网应激 | 第28-31页 |
| ·内质网应激的概述 | 第28-29页 |
| ·内质网应激与细胞凋亡 | 第29-30页 |
| ·内质网应激与细胞自噬 | 第30-31页 |
| ·iTRAQ技术 | 第31-32页 |
| ·ATF6 | 第32-33页 |
| ·ATF6的结构 | 第32页 |
| ·ATF6与内质网应激 | 第32-33页 |
| ·研究目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 内质网应激诱导肝癌细胞HepG2发生凋亡 | 第35-53页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·药物 | 第35页 |
| ·细胞株 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-43页 |
| ·溶液配制 | 第36-38页 |
| ·细胞培养与保存 | 第38-39页 |
| ·细胞存活率的测定(MTT试验) | 第39页 |
| ·Hochest3342染色荧光显微镜检测细胞凋亡 | 第39页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第39-40页 |
| ·线粒体膜电位检测 | 第40-41页 |
| ·Caspase酶活性的检测 | 第41页 |
| ·Western blot测定蛋白表达 | 第41-43页 |
| ·统计分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-50页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞活性和凋亡的影响 | 第43-47页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞凋亡信号通路的影响 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞凋亡的作用 | 第50-51页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞凋亡中的调控机制 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第三章 内质网应激诱导肝癌细胞HepG2发生自噬 | 第53-67页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·药物 | 第53页 |
| ·细胞株 | 第53页 |
| ·宿主菌和质粒 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·溶液配制 | 第54页 |
| ·MDC染色荧光显微镜检测细胞自噬 | 第54页 |
| ·pEGFP-LC3质粒瞬时转染 | 第54-55页 |
| ·流式细胞术检测细胞自噬发生率 | 第55页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染法检测凋亡 | 第55页 |
| ·Western blot测定蛋白表达 | 第55-56页 |
| ·统计学分析 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-63页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞自噬形态的影响 | 第56页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞GFP-LC3蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞自噬发生率的影响 | 第57-59页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞自噬相关蛋白表达的影响 | 第59-61页 |
| ·自噬对内质网应激引起的HepG2细胞凋亡的影响 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·内质网应激对HepG2细胞自噬的作用 | 第63-64页 |
| ·自噬对内质网应激致HepG2细胞凋亡的影响 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| 第四章 ATF6在内质网应激引起的自噬与凋亡中的作用 | 第67-89页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·药物 | 第67页 |
| ·细胞株 | 第67页 |
| ·宿主菌和质粒 | 第67-68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·主要仪器 | 第68页 |
| ·方法 | 第68-76页 |
| ·溶液配制 | 第68-69页 |
| ·重组质粒的构建 | 第69-72页 |
| ·荧光显微镜检测细胞凋亡和自噬 | 第72-73页 |
| ·自噬和凋亡的流式细胞术分析 | 第73页 |
| ·Rhodamine 123(Rho123)法检测线粒体膜电势 | 第73页 |
| ·Caspase酶活性的检测 | 第73页 |
| ·pEGFP-LC3质粒与相关质粒共同瞬时转染 | 第73页 |
| ·透射电子显微镜检测自噬 | 第73页 |
| ·QRT-PCR检测自噬与凋亡相关基因 | 第73-76页 |
| ·Western blot测定自噬与凋亡相关蛋白 | 第76页 |
| ·统计学分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-85页 |
| ·重组质粒瞬时转染的效率检测 | 第76-77页 |
| ·ATF6对内质网应激引起的HepG2细胞凋亡的影响 | 第77-81页 |
| ·ATF6在内质网应激引起HepG2细胞自噬中的作用 | 第81-85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| ·ATF6在内质网应激引起的凋亡中的作用 | 第85-86页 |
| ·ATF6在内质网应激引起的自噬中的作用 | 第86页 |
| ·小结 | 第86-89页 |
| 第五章 内质网应激引起的HepG2细胞自噬与凋亡中ATF6信号通路的研究 | 第89-109页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·药物 | 第89页 |
| ·细胞株 | 第89页 |
| ·宿主菌和质粒 | 第89页 |
| ·主要试剂 | 第89-90页 |
| ·主要仪器 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-93页 |
| ·溶液配制 | 第90页 |
| ·细胞瞬时转染及处理 | 第90页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第90-91页 |
| ·蛋白定量及蛋白酶解 | 第91页 |
| ·iTRAQ标记 | 第91页 |
| ·酶解肽段离线预分离及LC-MS/MS质谱分析 | 第91页 |
| ·数据的生物信息解析(功能分析及通路分析) | 第91页 |
| ·相关基因的QRT-PCR检测 | 第91-92页 |
| ·相关蛋白的Western blot检测 | 第92-93页 |
| ·Western blot检测几种抑制剂作用后的相关蛋白 | 第93页 |
| ·统计学分析 | 第93页 |
| ·结果与分析 | 第93-105页 |
| ·iTRAQ鉴定质量评估 | 第93-95页 |
| ·差异表达蛋白的鉴定 | 第95-98页 |
| ·Pathway Maps富集分析 | 第98-101页 |
| ·部分差异表达蛋白mRNA水平分析 | 第101-102页 |
| ·部分差异蛋白表达分析 | 第102页 |
| ·几种抑制剂对ATF6引起的自噬与凋亡的影响 | 第102-105页 |
| ·讨论 | 第105-107页 |
| ·内质网应激模型中ATF6高表达后差异蛋白的筛选 | 第105-106页 |
| ·ATF6在内质网应激引起的细胞自噬与凋亡中的相关通路 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107-109页 |
| 第六章 结论与展望 | 第109-113页 |
| ·结论 | 第109-111页 |
| ·研究展望 | 第111-113页 |
| 创新点 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-131页 |
| 致谢 | 第131-133页 |
| 个人简介 | 第133-134页 |
