致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
第一章、文献综述 | 第9-16页 |
一、猪 a 干扰素的研究进展 | 第9-11页 |
1 干扰素研究概况 | 第9-10页 |
·干扰素的分类和命名 | 第9页 |
·干扰素的生物学活性 | 第9-10页 |
·免疫调节作用 | 第9页 |
·抗病毒活性 | 第9-10页 |
·抑制细胞分裂活性 | 第10页 |
2 猪α干扰素的研究进展 | 第10-11页 |
·猪α干扰素的分子机构 | 第10页 |
·猪α干扰素的生物学特性 | 第10页 |
·猪α干扰素基因工程的研究近况 | 第10-11页 |
·猪 a 干扰素的应用 | 第11页 |
·前景展望 | 第11页 |
二、黄芪多糖的研究进展 | 第11-16页 |
1 黄芪多糖的活性物质组分 | 第11-12页 |
2 黄芪多糖的提取与测定 | 第12页 |
3 黄芪多糖的生物学功能 | 第12-13页 |
·黄芪多糖的药理作用 | 第12-13页 |
·对机体免疫功能的影响 | 第12-13页 |
·对免疫器官发育的影响 | 第12页 |
·对特异性免疫的促进作用 | 第12-13页 |
·对非特异性免疫的促进作用 | 第13页 |
·抗病毒作用 | 第13页 |
·抗肿瘤作用 | 第13页 |
·抗氧化作用 | 第13页 |
·促生长作用 | 第13页 |
4 黄芪多糖在养猪业上的应用 | 第13-14页 |
·作为免疫增强剂 | 第13-14页 |
·提高生产性能 | 第14页 |
·防治疾病 | 第14页 |
·防治病毒性疾病: | 第14页 |
·细菌性感染疾病的防治 | 第14页 |
5 黄芪多糖应用前景与展望 | 第14-16页 |
第二章 引言 | 第16-17页 |
第三章 试验研究 | 第17-37页 |
试验一 重组猪α干扰素的表达与纯化 | 第17-27页 |
1 材料与方法 | 第17-24页 |
·材料 | 第17-19页 |
·质粒与菌体 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·酶类及其他相关试剂 | 第17页 |
·蛋白表达相关试剂 | 第17页 |
·蛋白电泳相关试剂 | 第17-18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·方法 | 第19-24页 |
·引物设计与合成 | 第19页 |
·猪 IFN-α基因的 PCR 扩增及扩增产物的回收 | 第19-20页 |
·表达载体的构建 | 第20-22页 |
·目的片段与表达质粒 pET30a 的酶切回收 | 第20页 |
·目的片段与 pET30a 载体的连接 | 第20页 |
·感受态大肠杆菌 BL21 的制备 | 第20页 |
·连接产物感受态大肠杆菌 BL21 的转化 | 第20-21页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第21-22页 |
·重组质粒 pET30a-pIFN-α的诱导表达 | 第22页 |
·表达产物的检测-目的蛋白 SDS-PAGE 电泳 | 第22-23页 |
·表达产物的的纯化与复性 | 第23-24页 |
·包涵体的制备及纯化 | 第23页 |
·表达产物的复性 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-26页 |
·目的基因的扩增 | 第24页 |
·表达载体的鉴定 | 第24-25页 |
·重组猪 IFN-α的表达 | 第25页 |
·重组蛋白的纯化 | 第25-26页 |
3 结论与讨论 | 第26-27页 |
试验二 猪α干扰素抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性检测 | 第27-31页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
·材料 | 第27页 |
·细胞、毒株 | 第27页 |
·干扰素 | 第27页 |
·细胞培养相关试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·方法 | 第27-28页 |
·病毒增殖和毒力测定 | 第27-28页 |
·病毒增殖 | 第27-28页 |
·病毒毒力测定 | 第28页 |
·重组 PoIFN-α蛋白(rPoIFN-α)含量和病毒毒价(TCID50)测定 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-29页 |
·病毒增殖与毒力测定 | 第28-29页 |
·猪α干扰素抗病毒效价测定 | 第29页 |
3 结论与讨论 | 第29-31页 |
试验三 重组猪α干扰素联合黄芪多糖抗猪繁殖与呼吸障碍病毒的研究 | 第31-37页 |
1 材料与方法 | 第31-32页 |
·材料 | 第31页 |
·药物 | 第31页 |
·病毒与毒株 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·细胞培养 | 第31页 |
·病毒的增殖及 TCID50的测定 | 第31页 |
·黄芪多糖对 Marc-145 细胞的毒性试验 | 第31-32页 |
·黄芪多糖抑制 PRRSV 增殖试验 | 第32页 |
·重组猪α干扰素联合黄芪多糖抑制 PRRSV 增殖试验 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-35页 |
·病毒的 TCID50测定结果 | 第32页 |
·黄芪多糖对 Marc-145 细胞毒性的评价 | 第32-33页 |
·黄芪多糖抑制 PRRSV 增殖试验结果 | 第33-34页 |
·重组猪α干扰素联合黄芪多糖抑制 PRRSV 增殖试验结果 | 第34-35页 |
3 结论与讨论 | 第35-36页 |
4 全文总结与创新点 | 第36-37页 |
·全文总结 | 第36页 |
·创新点 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
Abstract | 第43-44页 |