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混合体细胞滋养层对牛IVF胚胎培养的影响

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
文献综述第10-20页
   ·哺乳动物早期胚胎在体内的形成过程第10-11页
     ·精子在雌性生殖道内的运行第10页
     ·卵子在生殖道内的运行第10页
     ·配子在受精前的生理变化第10-11页
     ·受精第11页
     ·雌雄原核形成及融合第11页
   ·哺乳动物的早期胚胎在体内发育的生理机制第11-12页
     ·胚胎早期发育阶段输卵管的生理特点第11-12页
   ·影响哺乳动物胚胎体外发育的因素第12-15页
     ·胚胎自身对早期体外发育的影响第12页
     ·培养液成分对早期体外发育的影响第12-14页
     ·体外培养系统对早期体外发育的影响第14页
     ·影响胚胎体外发育的其他因素第14-15页
   ·体细胞的体外培养第15-16页
     ·培养细胞的生物学特性第15-16页
   ·IVF 胚胎与体细胞共培养的研究进展第16-20页
     ·引发早期胚胎体外发育阻滞的因素第16页
     ·共培养克服早期胚胎体外发育阻滞的可能机制第16-17页
     ·IVF 胚胎与体细胞共培养的意义第17-18页
     ·胚胎与体细胞共培养的研究进展第18页
     ·混合体细胞滋养层与牛 IVF 胚胎共培养的研究第18-20页
胎鼠成纤维细胞培养方法研究第20-27页
   ·试验材料第20-22页
     ·小鼠来源第20页
     ·主要试剂和设备第20页
     ·主要溶液的配制第20-22页
   ·试验方法第22-24页
     ·获取小鼠胚胎第22页
     ·胎鼠成纤维细胞的原代培养(组织块培养法)第22页
     ·胎鼠成纤维细胞的传代培养第22-23页
     ·台盼蓝染色检测细胞活力第23页
     ·试验设计第23-24页
   ·试验结果第24-25页
     ·不同胎龄胎鼠成纤维细胞的筛选第24-25页
     ·不同胰酶消化液浓度对分离胎鼠 MEF 的影响第25页
   ·讨论与结论第25-27页
     ·不同胎龄胎鼠对 MEF 培养的影响第25-26页
     ·不同胰酶消化液浓度对分离胎鼠 MEF 的影响第26-27页
牛卵巢颗粒细胞及输卵管上皮细胞的培养第27-35页
   ·试验材料第27-29页
     ·卵巢来源第27页
     ·输卵管来源第27页
     ·主要试剂和设备第27页
     ·主要溶液的配制第27-29页
   ·试验方法第29-31页
     ·牛卵巢颗粒细胞的采集及原代培养第29页
     ·牛卵巢颗粒细胞的传代培养第29-30页
     ·牛输卵管上皮细胞的原代培养第30页
     ·牛输卵管上皮细胞的传代培养第30-31页
     ·试验设计第31页
   ·试验结果第31-33页
     ·不同消化方式对颗粒细胞贴壁效果的影响第31-32页
     ·原代不同方法获取输卵管上皮细胞的培养观察第32-33页
   ·讨论与结论第33-35页
     ·颗粒细胞生长状态观察第33页
     ·不同消化方式对颗粒细胞贴壁效果的影响第33页
     ·不同的获取方法对输卵管上皮细胞原代培养的影响第33-35页
体细胞的混合培养研究第35-38页
   ·试验材料第35页
     ·小鼠来源、卵巢来源、输卵管来源第35页
     ·主要试剂和设备第35页
     ·主要溶液的配制第35页
   ·试验方法第35-36页
     ·胎鼠成纤维细胞、颗粒细胞及输卵管上皮细胞的原代、继代培养第35页
     ·体细胞混合培养第35-36页
     ·试验设计第36页
   ·试验结果第36-37页
     ·不同组合的混合培养细胞生长状况比较第36-37页
   ·讨论第37-38页
不同共培养体系对牛 IVF 胚胎发育的影响第38-46页
   ·试验材料第38-40页
     ·小鼠来源、卵巢来源、输卵管来源第38页
     ·主要试剂和设备第38页
     ·主要溶液的配制第38-40页
   ·试验方法第40-42页
     ·牛卵母细胞的采集第40页
     ·牛卵母细胞成熟培养第40页
     ·牛卵母细胞的成熟与评定第40页
     ·精子的获能(上浮法)第40-41页
     ·卵母细胞体外受精及早期胚胎的体外培养第41页
     ·早期胚胎与胎鼠成纤维细胞共培养的方法第41页
     ·颗粒细胞共培养方法第41页
     ·输卵管上皮细胞共培养方法第41页
     ·混合体细胞的培养及台盼蓝染色鉴定活力方法第41-42页
     ·混合细胞滋养层与牛 IVF 胚胎共培养方法第42页
     ·混合体细胞滋养层的制备第42页
     ·统计分析第42页
   ·试验结果第42-44页
     ·不同共培养体系对牛 IVF 胚胎体外发育的影响第42-44页
   ·讨论第44-46页
     ·与体细胞共培养对牛 IVF 胚胎发育的影响第44-45页
     ·体细胞混合培养体系对牛 IVF 胚胎发育的影响第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页

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