| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-6页 |
| 缩略语 | 第6-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第10-20页 |
| 第一章 小反刍兽疫概述 | 第10-15页 |
| 1 病原学 | 第10-12页 |
| ·小反刍兽疫病毒概述 | 第10-11页 |
| ·病毒的蛋白及其功能 | 第11-12页 |
| 2 流行病学 | 第12页 |
| 3 临床症状及病理变化 | 第12-13页 |
| 4 诊断技术与防治措施 | 第13-14页 |
| ·诊断技术 | 第13-14页 |
| ·防治措施 | 第14页 |
| 5 小结 | 第14-15页 |
| 第二章 机体的抗病毒免疫及V蛋白介导的逃逸机制 | 第15-20页 |
| 1 机体的抗病毒免疫 | 第15-17页 |
| ·天然免疫及其模式识别受体 | 第15页 |
| ·抗病毒天然免疫信号转导概述 | 第15-17页 |
| 2 V 蛋白及其介导的免疫逃逸 | 第17-19页 |
| ·V蛋白概述 | 第17页 |
| ·V蛋白介导的免疫逃逸 | 第17-19页 |
| 3小结 | 第19-20页 |
| 第二篇 试验部分 | 第20-39页 |
| 第一章 小反刍兽疫病毒V蛋白的真核及原核表达 | 第20-30页 |
| 前言 | 第20页 |
| 1 材料和方法 | 第20-24页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·主要试剂和酶 | 第20-21页 |
| ·溶液配制 | 第21页 |
| ·V基因的合成 | 第21页 |
| ·重组质粒pCAGGS-HA-V及pGEX-4T-1-V的构建及鉴定 | 第21-22页 |
| ·V蛋白的真核表达及Western-blot分析 | 第22页 |
| ·V蛋白的原核表达 | 第22-23页 |
| ·不同温度对表达的影响 | 第22-23页 |
| ·不同IPTG浓度对表达的影响 | 第23页 |
| ·不同时间对表达的影响 | 第23页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第23页 |
| ·融合蛋白的大量表达 | 第23页 |
| ·V蛋白的纯化及Western-blot分析 | 第23-24页 |
| ·融合蛋白的初步纯化 | 第23页 |
| ·洗涤次数对纯化的影响 | 第23页 |
| ·不同洗涤缓冲液对纯化的影响 | 第23页 |
| ·不同洗脱缓冲液对纯化的影响 | 第23-24页 |
| ·纯化蛋白的浓度测定及Western-blot分析 | 第24页 |
| 2 结果 | 第24-28页 |
| ·重组质粒pCAGGS-HA-V的鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒pGEX-4T-1-V的鉴定 | 第24-25页 |
| ·V蛋白的真核表达及Western-bolt分析 | 第25页 |
| ·V蛋白的原核表达及可溶性分析 | 第25-27页 |
| ·V蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·纯化后V蛋白的浓度测定及Western-blot鉴定 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| 第二章 PPRV/V蛋白与宿主STAT1相互作用的验证 | 第30-39页 |
| 前言 | 第30页 |
| 1 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·菌株和载体 | 第31页 |
| ·主要试剂和酶 | 第31页 |
| ·引物设计及合成 | 第31-32页 |
| ·cDNA的制备 | 第32页 |
| ·STAT1基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·重组质粒pCAGGS-Flag-STAT1的构建与鉴定 | 第32页 |
| ·STAT1的真核表达及Western-blot分析 | 第32-33页 |
| ·细胞共定位实验检测V蛋白与STAT1的定位情况 | 第33页 |
| ·免疫共沉淀实验验证V蛋白与STAT1的相互作用 | 第33-34页 |
| ·GST-蛋白沉降技术验证V蛋白与STAT1的相互作用 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-37页 |
| ·重组质粒pCAGGS-Flag-STAT1的鉴定 | 第34-35页 |
| ·STAT1蛋白的真核表达及Western-blot分析 | 第35页 |
| ·瞬时表达的STAT1和V在哺乳动物细胞内共定位 | 第35-36页 |
| ·瞬时表达的STAT1和V共沉淀 | 第36页 |
| ·原核表达的V蛋白能够沉淀瞬时表达的STAT1 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 全文总结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-50页 |
| 导师简介 | 第50-52页 |
