| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-36页 |
| ·水稻白叶枯病和水稻细菌性条斑病研究现状 | 第13-15页 |
| ·发生和分布 | 第13-14页 |
| ·危害症状 | 第14页 |
| ·病原分化 | 第14-15页 |
| ·传播途径和发生条件 | 第15页 |
| ·防治方法 | 第15页 |
| ·植物对病原菌的免疫反应 | 第15-28页 |
| ·植物的先天免疫反应 | 第16-25页 |
| ·病原相关分子模式激发的植物基础抗性 | 第17-20页 |
| ·病原模式相关分子与受体的识别 | 第17-19页 |
| ·PTI 信号传导途径 | 第19-20页 |
| ·植物 R 基因介导的质量抗病性 | 第20-23页 |
| ·质量抗病性的概念 | 第21页 |
| ·基因对基因假说 | 第21页 |
| ·防卫假说 | 第21-22页 |
| ·NBS-LRR 蛋白及其介导的 ETI 信号途径 | 第22-23页 |
| ·微效基因介导的数量抗病性 | 第23-24页 |
| ·非寄主抗性 | 第24-25页 |
| ·植物的后天免疫反应 | 第25页 |
| ·水稻白叶枯病和细菌性条斑病的抗性研究进展 | 第25-28页 |
| ·水稻白叶枯病的抗性遗传基础研究 | 第25-27页 |
| ·水稻条斑病抗性遗传研究 | 第27-28页 |
| ·病原菌的致病机制研究 | 第28-35页 |
| ·病原细菌对植物天然免疫的干扰 | 第28页 |
| ·病原细菌对植物防卫反应的抑制作用 | 第28-30页 |
| ·寄主植物相关感病途径 | 第30-31页 |
| ·非寄主植物与潜在病原微生物的互作 | 第31页 |
| ·水稻白叶枯菌和条斑病菌的致病机制研究 | 第31-35页 |
| ·水稻白叶枯病菌效应蛋白致病机制的研究 | 第31-32页 |
| ·水稻条斑病菌的致病相关研究 | 第32-34页 |
| ·无毒基因 avrRxo1 的研究现状 | 第34-35页 |
| ·目的意义 | 第35-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-44页 |
| ·植物材料与来源 | 第36页 |
| ·菌株 | 第36页 |
| ·RS105 基因组文库筛选 | 第36-37页 |
| ·基因组文库克隆的转化 | 第36-37页 |
| ·PXO99a 感受态细胞的简易制备（需现用现制） | 第36页 |
| ·文库质粒的提取（SDS 碱裂解法） | 第36-37页 |
| ·文库质粒的电击转化 | 第37页 |
| ·PXO99a 转化菌株接种 NB | 第37页 |
| ·目的基因的鉴定与克隆 | 第37-44页 |
| ·目的基因序列分析 | 第37页 |
| ·目的基因的克隆 | 第37-41页 |
| ·不同扩增用途的引物设计 | 第37页 |
| ·avrRxo1 基因不同目的片段的分离 | 第37-38页 |
| ·条斑病菌株基因组的提取 | 第37页 |
| ·avrRxo1 基因不同目的片段 PCR 扩增体系的建立 | 第37-38页 |
| ·目的产物的切胶回收 | 第38页 |
| ·不同水稻条斑病菌株 avrRxo1 基因克隆载体的构建及氨基酸序列分析 | 第38页 |
| ·不同水稻条斑病菌株 avrRxo1 基因表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·RS105-avrRxo1 基因不同截短序列及位点突变的表达载体构建 | 第39-40页 |
| ·RS105-avrRxo1 基因超量表达载体构建 | 第40页 |
| ·空载体和目的片段的酶切产物纯化（乙醇沉淀） | 第40-41页 |
| ·连接产物热激转化（转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞） | 第41页 |
| ·质粒提取及不同表达载体电击转化 PXO99a 和农杆菌 EHA105 | 第41页 |
| ·不同菌株接种不同植物材料 | 第41-42页 |
| ·PXO99a 转化菌株接种玉米 B73 | 第41页 |
| ·PXO99a 转化菌株接种不同抗性的水稻材料 | 第41页 |
| ·水稻条斑病菌 RS105 接种水稻植株 | 第41-42页 |
| ·水稻细菌生长曲线检测 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第42页 |
| ·转基因植株阳性检测 | 第42-43页 |
| ·植物基因组 DNA 提取 | 第42页 |
| ·PCR 阳性检测 | 第42页 |
| ·GUS 染色 | 第42-43页 |
| ·RNA 提取 | 第43页 |
| ·RT-PCR | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-61页 |
| ·携带 avrRxo1 完整基因的克隆能抑制 PXO99a 在非寄主 NB 上产生的 HR 反应 | 第44-45页 |
| ·文库克隆 G20 能够抑制 PXO99a 在 NB 上产生 HR | 第44页 |
| ·功能基因片段序列分析 | 第44-45页 |
| ·不同 avrRxo1 等位基因的同源性分析及进化分析 | 第45-47页 |
| ·五条斑菌 avrRxo1 等位基因的 PCR 扩增 | 第45页 |
| ·五种 avrRxo1 等位基因的 TA 克隆酶切检测 | 第45页 |
| ·不同 avrRxo1 等位基因的氨基酸同源序列分析 | 第45-46页 |
| ·不同水稻条斑病菌株的进化关系 | 第46-47页 |
| ·不同 avrRxo1 等位基因编码蛋白不影响与抗病蛋白识别和抑制子的功能 | 第47-49页 |
| ·不同 avrRxo1 等位基因表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·重组表达载体 pHM1:: avrRxo1RS105的 PCR 阳性检测 | 第47页 |
| ·RS85、JSB2-24、HNB4-47 及 SD-1 四菌株 avrRxo1 基因表达载体 PCR 检测... | 第47-48页 |
| ·不同 AvrRxo1 蛋白均能与非寄主抗病蛋白 Rxo1 相互识别 | 第48-49页 |
| ·不同 AvrRxo1 蛋白不影响其抑制 PXO99a 在 NB 上产生 HR 反应的功能 | 第49页 |
| ·AvrRxo1 蛋白关键功能结构域的探索 | 第49-55页 |
| ·RS105 来源的 avrRxo1 基因不同结构域的 PCR 验证 | 第50-52页 |
| ·avrRxo1 基因不同截短序列表达载体的 PCR 验证 | 第50-51页 |
| ·AvrRxo1 蛋白重要酶活位点的融合突变 | 第51-52页 |
| ·AvrRxo1 与 Rxo1 识别及抑制烟草 HR 反应的关键功能结构域的鉴定 | 第52-53页 |
| ·AvrRxo1 造成 PXO99a 侵染病斑缩短的结构域与其识别功能域保持一致 | 第53-55页 |
| ·转化菌株 PXO99a(AvrRxo1)在水稻上的生长量显著降低 | 第55页 |
| ·AvrRxo1 在转基因水稻中的功能鉴定 | 第55-61页 |
| ·avrRxo1 基因超量表达载体的酶切检测 | 第55-56页 |
| ·avrRxo1 转基因株系的获得 | 第56页 |
| ·avrRxo1 转基因 T0 代株系的阳性检测 | 第56-57页 |
| ·avrRxo1 转基因 T0 株系的 PCR 检测 | 第56-57页 |
| ·avrRxo1 转基因阳性 T0 株系的 GUS 溶液染色 | 第57页 |
| ·avrRxo1 转基因阳性水稻株系对病原细菌的抗性增强 | 第57-59页 |
| ·avrRxo1 转基因 T0 阳性株系对水稻条斑病菌 RS105 产生抗性 | 第57-58页 |
| ·avrRxo1 转基因 T0 阳性株系对水稻白叶病菌增强抵抗力 | 第58-59页 |
| ·avrRxo1 基因在 T0 阳性株系中能够稳定表达 | 第59-60页 |
| ·avrRxo1 转基因 T0 阳性株系中 PR 基因表达水平显著提高 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| ·病原效应子 AvrRxo1 的发掘为阐释致病机制带来新希望 | 第61-62页 |
| ·AvrRxo1 蛋白关键功能结构域的分析 | 第62页 |
| ·AvrRxo1 在病原菌与寄主水稻互作中的机制 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| ·AvrRxo1 蛋白具有多重功能 | 第64页 |
| ·AvrRxo1 蛋白关键功能结构域的解析 | 第64页 |
| ·AvrRxo1 蛋白能激发水稻非 Rxo1 介导的抗病反应 | 第64页 |
| ·avrRxo1 的转基因阳性株系对水稻病原细菌产生显著的抗性 | 第64-65页 |
| 6 结语 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-78页 |
| 附录 I 实验部分补充数据 | 第78-82页 |
| 附录 II 常用培养基及溶液配制 | 第82-90页 |
| 附录 III 硕士期间获得的研究成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
