摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
引言 | 第10-16页 |
1.转抗病基因鱼类的研究进展 | 第10-13页 |
·鱼类溶菌酶基因研究 | 第11-12页 |
·鱼类抗菌肽基因研究 | 第12-13页 |
2.转基因鱼研究的主要技术 | 第13-15页 |
·外源基因的构建 | 第13-14页 |
·外源基因的导入 | 第14-15页 |
·外源基因的检测 | 第15页 |
3.本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
第一章 罗非鱼 3 种 C 型溶菌酶重组蛋白的制备及与几种鱼虾溶菌酶溶菌谱的比较 | 第16-27页 |
1 材料 | 第16-20页 |
2 方法 | 第20-22页 |
·奥利亚罗非鱼 C1、C2 和 C3 溶菌酶的诱导表达 | 第20页 |
·表达产物的纯化 | 第20页 |
·其他几种溶菌酶的制备 | 第20-21页 |
·溶菌酶活性的测定 | 第21页 |
·重组溶菌酶溶菌谱的检测 | 第21-22页 |
3 结果 | 第22-24页 |
·奥利亚罗非鱼 3 种重组溶菌酶的诱导表达与检测 | 第22页 |
·重组溶菌酶活性检测 | 第22-23页 |
·重组溶菌酶溶菌谱的检测 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-27页 |
第二章 罗非鱼 Lysozyme-C3 基因在斑马鱼中的转植研究 | 第27-42页 |
1 材料 | 第27-29页 |
·实验动物与试剂 | 第27-28页 |
·菌种和质粒 | 第28页 |
·常用缓冲液 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-37页 |
·pTgf2-hsp70-eGFP-Hsp70-C3 表达载体的构建 | 第29-34页 |
·显微注射和绿色荧光蛋白的检测 | 第34-35页 |
·RT-PCR 检测 | 第35-36页 |
·SDS-PAGE 和 Western blot 检测 | 第36页 |
·溶菌活性测定 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-39页 |
·表达载体的构建 | 第37页 |
·显微注射和绿色荧光蛋白的检测 | 第37-38页 |
·RT-PCR 检测目的基因在 F1 代中的表达 | 第38页 |
·SDS-PAGE 和 Western blotting 检测 F1 代转植基因的表达 | 第38-39页 |
·转溶菌酶基因斑马鱼溶菌活性的测定 | 第39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
全文总结 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
附录 A 缩略词表 | 第50-51页 |
附录 B 质粒图谱 | 第51-54页 |
附图 1:pTgf2-eGFP-C3 载体 | 第51-54页 |
附录 C 在读期间发表文章 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |