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构建及筛选S1型断裂蛋白质内含子用于蛋白质定点标记

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
符号说明第10-12页
第1章 绪论第12-25页
   ·引言第12-15页
   ·断裂蛋白质内含子及其反式剪接机制第15-17页
   ·断裂蛋白质内含子的应用第17-20页
   ·蛋白质标记的应用进展第20-22页
   ·目前研究存在的问题第22-23页
   ·本课题研究的内容、目的及意义第23-25页
第2章 实验材料、技术与设计方案第25-41页
   ·材料和仪器第25-31页
   ·DNA实验技术第31-35页
   ·蛋白实验技术第35-39页
   ·实验流程第39-41页
第3章 构建C端无半胱氨酸的S1型断裂蛋白质内含子第41-50页
   ·将MINI-INTEIN C端的半胱氨酸突变为丝氨酸第41-43页
   ·将MINI-INTEIN改造为S1 SPLIT INTEIN第43-44页
   ·将构建完成的S1 INTEIN装入至PMAL载体中第44-46页
   ·C端无半胱氨酸的RBS1 INTEIN和CPES1 INTEIN的构建第46-50页
第4章 C端无半胱氨酸S1 SPLIT INTEIN剪接活性的检测第50-56页
   ·检测C端无半胱氨酸S1 SPLITINTEIN的体内剪接活性第50页
   ·制备CF-S1 SPLIT INTEIN的C端表达质粒第50-52页
   ·C端无半胱氨酸的S 1 SPLIT INTEIN蛋白分段表达及体外纯化第52页
   ·检测C端无半胱氨酸S1 SPLIT INTEIN的体外剪接活性第52-53页
   ·CFRBS1 INTEIN体外剪接的进一步研究第53-56页
第5章 CFRBS1 INTEIN的应用研究第56-61页
   ·利用CFRBS1 INTEIN进行荧光标记第56-57页
   ·CFRBS1 INTEIN应用于ERP44蛋白第57-61页
第6章 实验结果与分析第61-79页
   ·构建C端无半胱氨酸的S1 INTEIN第61-65页
   ·C端无半胱氨酸S1 SPLIT INTEIN剪接活性的检测第65-74页
   ·CFRBS1 SPLIT INTEIN的应用研究第74-79页
第7章 结论第79-83页
   ·结论第79-80页
   ·创新点第80页
   ·展望第80-83页
参考文献第83-87页
硕士期间参加科研情况说明第87-88页
致谢第88页

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