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Erbin与Plk1激酶相互作用的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
缩略词表第13-15页
引言第15-19页
第一部分 Plk1 依赖的 Erbin 磷酸化及其相互作用第19-43页
 摘要第19-21页
   ·前言第21-22页
   ·材料第22-23页
     ·实验细胞第22页
     ·实验试剂第22-23页
     ·表达载体及质粒第23页
     ·主要仪器设备第23页
     ·其它常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》(第二版)配制第23页
   ·方法第23-28页
     ·细胞的培养第23-24页
     ·细胞周期的同步化法一第24页
     ·质粒在细胞中的过表达第24-25页
     ·siRNA 干涉第25-26页
     ·免疫印迹(Western blot)检测第26页
     ·免疫荧光(IF)第26-27页
     ·免疫共沉淀(Co-IP)第27-28页
     ·GST 沉淀实验(GST pull-down)第28页
   ·结果第28-37页
     ·G2/M 期 Erbin 发生磷酸化修饰第28-29页
     ·M 期 Erbin 磷酸化依赖于激酶 Plk1第29-31页
     ·Erbin 在细胞周期有丝分裂中的定位变化第31页
     ·Erbin 与 Plk1 的相互作用第31-33页
     ·Erbin 的核定位基础第33页
     ·Erbin-PDZ 与 Plk1 的共定位以及 Plk1 磷酸化 Erbin 的点火激酶第33-35页
     ·Erbin 与 Plk1 的相互作用 Mapping第35-37页
   ·结论第37-39页
 参考文献第39-43页
第二部分 干涉 Erbin 对细胞有丝分裂的影响及其生物学意义第43-57页
 摘要第43-44页
   ·前言第44-45页
   ·材料第45-46页
     ·实验细胞第45页
     ·实验试剂第45页
     ·主要仪器设备第45页
     ·其它常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》(第二版)配制第45-46页
   ·方法第46-49页
     ·细胞的培养第46页
     ·免疫印迹(Western blot)第46页
     ·细胞周期的同步化法二第46-47页
     ·流式细胞术第47-48页
     ·慢病毒感染第48页
     ·DAPI+Golgin-97 染色第48-49页
   ·结果第49-53页
     ·Erbin 敲低促进了 Plk1 的磷酸化及细胞有丝分裂的进入第49-51页
     ·敲低 Erbin 不影响细胞的出有丝分裂第51-52页
     ·敲低 Erbin 表达诱导多核细胞的产生第52-53页
     ·敲低 Erbin 表达促进了细胞的增殖第53页
   ·结论第53-55页
 参考文献第55-57页
文献综述第57-84页
 摘要第57页
 1 背景第57-58页
 2 Plk1 在不同亚细胞结构中的募集第58-59页
 3 Plk1 在中心体中的功能第59-61页
 4 Plk1 在着丝粒中的功能第61-63页
 5 Plk1 在细胞分裂后期和末期未知的功能第63-64页
 6 在胞质分裂期完成细胞的分离第64-66页
 7 Polo-like Kinase 1 在胞质分裂中的定位第66-67页
 8 Plk1 通过 RhoGEF 蛋白 Ect2 和 GTPase RhoA 控制胞质分裂的起始第67-68页
 9 Plk1 控制胞质分离两种可能方式第68-69页
 10 Plk1 的新功能和胞质分离时期有丝分裂激酶的联系第69-71页
 11 Cdk1 指导 Plk1 募集到纺锤体的中间区域第71-72页
 12 在后期 B 增加姐妹纺锤体之间的延伸距离第72-73页
 13 在细胞分裂期酵母和人类的 Polo 和 Rho 是保守的连接吗?第73-74页
 14 Plk1 作为癌症治疗中的一个靶点第74-75页
 15 展望第75-77页
 参考文献第77-84页
攻读学位期间发表的学术论文目录第84-85页
致谢第85-87页

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