摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
缩略词表 | 第13-15页 |
引言 | 第15-19页 |
第一部分 Plk1 依赖的 Erbin 磷酸化及其相互作用 | 第19-43页 |
摘要 | 第19-21页 |
·前言 | 第21-22页 |
·材料 | 第22-23页 |
·实验细胞 | 第22页 |
·实验试剂 | 第22-23页 |
·表达载体及质粒 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·其它常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》(第二版)配制 | 第23页 |
·方法 | 第23-28页 |
·细胞的培养 | 第23-24页 |
·细胞周期的同步化法一 | 第24页 |
·质粒在细胞中的过表达 | 第24-25页 |
·siRNA 干涉 | 第25-26页 |
·免疫印迹(Western blot)检测 | 第26页 |
·免疫荧光(IF) | 第26-27页 |
·免疫共沉淀(Co-IP) | 第27-28页 |
·GST 沉淀实验(GST pull-down) | 第28页 |
·结果 | 第28-37页 |
·G2/M 期 Erbin 发生磷酸化修饰 | 第28-29页 |
·M 期 Erbin 磷酸化依赖于激酶 Plk1 | 第29-31页 |
·Erbin 在细胞周期有丝分裂中的定位变化 | 第31页 |
·Erbin 与 Plk1 的相互作用 | 第31-33页 |
·Erbin 的核定位基础 | 第33页 |
·Erbin-PDZ 与 Plk1 的共定位以及 Plk1 磷酸化 Erbin 的点火激酶 | 第33-35页 |
·Erbin 与 Plk1 的相互作用 Mapping | 第35-37页 |
·结论 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
第二部分 干涉 Erbin 对细胞有丝分裂的影响及其生物学意义 | 第43-57页 |
摘要 | 第43-44页 |
·前言 | 第44-45页 |
·材料 | 第45-46页 |
·实验细胞 | 第45页 |
·实验试剂 | 第45页 |
·主要仪器设备 | 第45页 |
·其它常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》(第二版)配制 | 第45-46页 |
·方法 | 第46-49页 |
·细胞的培养 | 第46页 |
·免疫印迹(Western blot) | 第46页 |
·细胞周期的同步化法二 | 第46-47页 |
·流式细胞术 | 第47-48页 |
·慢病毒感染 | 第48页 |
·DAPI+Golgin-97 染色 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-53页 |
·Erbin 敲低促进了 Plk1 的磷酸化及细胞有丝分裂的进入 | 第49-51页 |
·敲低 Erbin 不影响细胞的出有丝分裂 | 第51-52页 |
·敲低 Erbin 表达诱导多核细胞的产生 | 第52-53页 |
·敲低 Erbin 表达促进了细胞的增殖 | 第53页 |
·结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
文献综述 | 第57-84页 |
摘要 | 第57页 |
1 背景 | 第57-58页 |
2 Plk1 在不同亚细胞结构中的募集 | 第58-59页 |
3 Plk1 在中心体中的功能 | 第59-61页 |
4 Plk1 在着丝粒中的功能 | 第61-63页 |
5 Plk1 在细胞分裂后期和末期未知的功能 | 第63-64页 |
6 在胞质分裂期完成细胞的分离 | 第64-66页 |
7 Polo-like Kinase 1 在胞质分裂中的定位 | 第66-67页 |
8 Plk1 通过 RhoGEF 蛋白 Ect2 和 GTPase RhoA 控制胞质分裂的起始 | 第67-68页 |
9 Plk1 控制胞质分离两种可能方式 | 第68-69页 |
10 Plk1 的新功能和胞质分离时期有丝分裂激酶的联系 | 第69-71页 |
11 Cdk1 指导 Plk1 募集到纺锤体的中间区域 | 第71-72页 |
12 在后期 B 增加姐妹纺锤体之间的延伸距离 | 第72-73页 |
13 在细胞分裂期酵母和人类的 Polo 和 Rho 是保守的连接吗? | 第73-74页 |
14 Plk1 作为癌症治疗中的一个靶点 | 第74-75页 |
15 展望 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-87页 |