摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
第一章 综述 | 第14-29页 |
1 钙、磷在奶牛体内的分布、代谢与功能 | 第14-17页 |
·钙、磷在奶牛体内的含量与分布 | 第14-15页 |
·钙 | 第14页 |
·磷 | 第14-15页 |
·钙、磷的吸收与排泄 | 第15-16页 |
·钙 | 第15页 |
·磷 | 第15-16页 |
·钙、磷的的正常生理功能 | 第16-17页 |
·钙 | 第16-17页 |
·磷 | 第17页 |
2 钙、磷代谢紊乱概述 | 第17-23页 |
·引起钙、磷代谢紊乱的常见因素 | 第17-18页 |
·直接性因素 | 第17-18页 |
·间接性因素 | 第18页 |
·影响钙、磷代谢的主要调节因素 | 第18-21页 |
·肾脏对钙、磷代谢的调节 | 第18-19页 |
·甲状旁腺素(PTH)对钙、磷代谢的调节 | 第19-20页 |
·1,25(OH)_2D_3对钙、磷代谢的调节 | 第20页 |
·降钙素(CT)对钙、磷代谢的调节 | 第20-21页 |
·其激素对钙、磷代谢的调节 | 第21页 |
·钙、磷代谢紊乱 | 第21-22页 |
·高血钙症 | 第21页 |
·低血钙症 | 第21-22页 |
·高磷血症 | 第22页 |
·低磷血症 | 第22页 |
·常见钙、磷代谢紊乱疾病 | 第22-23页 |
·佝偻病 | 第22-23页 |
·骨软症和纤维素性骨营养不良 | 第23页 |
·牛产后血红蛋白尿病 | 第23页 |
·母牛倒地不起综合症 | 第23页 |
3 STC-1研究进展 | 第23-29页 |
·STC-1概述 | 第23-24页 |
·STC-1的结构 | 第24-25页 |
·STC-1的分布 | 第25页 |
·STC-1的受体 | 第25-26页 |
·STC-1的功能 | 第26-29页 |
·STC-1与钙、磷的关系 | 第26-27页 |
·STC-1与癌症 | 第27-28页 |
·STC-1与生殖 | 第28-29页 |
第二章 实验部分 | 第29-60页 |
实验Ⅰ:奶牛RTECS的培养 | 第29-39页 |
1 实验材料和仪器 | 第29-31页 |
·实验动物及主要实验仪器设备 | 第29页 |
·实验试剂及配制 | 第29-31页 |
2 实验方法 | 第31-34页 |
·奶牛RTECs的培养 | 第31-32页 |
·奶牛RTECs的原代培养 | 第31页 |
·奶牛RTECs的传代培养 | 第31页 |
·奶牛RTECs计数及活力测定 | 第31-32页 |
·奶牛RTECs的冻存与复苏 | 第32页 |
·奶牛RTECs的冻存 | 第32页 |
·奶牛RTECs的复苏 | 第32页 |
·奶牛RTECs的增殖曲线的测定 | 第32-33页 |
·奶牛RTECs的鉴定 | 第33-34页 |
·奶牛RTECs的形态学观察 | 第33页 |
·奶牛RTECs的免疫组化 | 第33-34页 |
3 实验结果与讨论 | 第34-39页 |
·奶牛RTECs的形态观察结果与分析 | 第34页 |
·奶牛RTECs的增殖曲线的测定结果与分析 | 第34-36页 |
·奶牛RTECs的免疫组化结果与分析 | 第36-37页 |
·实验讨论 | 第37-39页 |
实验Ⅱ:钙、磷离子对奶牛RTECS中STC-1MRNA和蛋白表达水平的影响 | 第39-60页 |
1 实验材料和仪器 | 第39-41页 |
·实验仪器 | 第39页 |
·主要实验试剂及配制 | 第39-41页 |
2 实验方法 | 第41-47页 |
·奶牛RTECs的分组培养 | 第41页 |
·钙、磷离子对奶牛RTECs中STC-1MRNA含量表达水平的影响 | 第41-44页 |
·总RNA提取 | 第41-42页 |
·总RNA的检测 | 第42页 |
·反转录 | 第42-43页 |
·荧光定量PCR测定STC-1mRNA含量的变化 | 第43-44页 |
·钙、磷离子对奶牛RTECs中STC-1蛋白表达水平的影响 | 第44-47页 |
·STC-1蛋白在奶牛RTECs中的表达定位 | 第44页 |
·蛋白样品制备和处理 | 第44-45页 |
·蛋白含量的测定 | 第45页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第45-46页 |
·染胶 | 第46页 |
·转膜 | 第46页 |
·免疫反应 | 第46页 |
·化学发光反应 | 第46-47页 |
·数据处理 | 第47页 |
3 实验结果与讨论 | 第47-60页 |
·总RNA检测结果 | 第47页 |
·PCR产物电泳结果 | 第47页 |
·荧光定量PCR结果 | 第47-55页 |
·奶牛RTECs中磷离子6h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第48-49页 |
·奶牛RTECs中磷离子12h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第49页 |
·奶牛RTECs中磷离子24h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第49页 |
·奶牛RTECs中磷离子48h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第49-52页 |
·奶牛RTECs中钙离子6h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第52页 |
·奶牛RTECs中钙离子12h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第52页 |
·奶牛RTECs中钙离子24h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第52页 |
·奶牛RTECs中钙离子48h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响 | 第52-55页 |
·奶牛RTECs中STC-1蛋白检测结果 | 第55-57页 |
·STC-1蛋白在奶牛RTECs中的表达结果 | 第55页 |
·考马氏亮蓝染色结果 | 第55-56页 |
·Western-blot方法检测STC-1蛋白结果 | 第56-57页 |
·实验结果分析和讨论 | 第57-60页 |
·磷离子与奶牛RTECs中STC-1的关系 | 第58-59页 |
·钙离子与奶牛RTECs中STC-1的关系 | 第59-60页 |
第三章 小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68页 |