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钙、磷对奶牛RTECs中STC-1 mRNA和蛋白表达的影响

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第12-14页
第一章 综述第14-29页
 1 钙、磷在奶牛体内的分布、代谢与功能第14-17页
   ·钙、磷在奶牛体内的含量与分布第14-15页
     ·钙第14页
     ·磷第14-15页
   ·钙、磷的吸收与排泄第15-16页
     ·钙第15页
     ·磷第15-16页
   ·钙、磷的的正常生理功能第16-17页
     ·钙第16-17页
     ·磷第17页
 2 钙、磷代谢紊乱概述第17-23页
   ·引起钙、磷代谢紊乱的常见因素第17-18页
     ·直接性因素第17-18页
     ·间接性因素第18页
   ·影响钙、磷代谢的主要调节因素第18-21页
     ·肾脏对钙、磷代谢的调节第18-19页
     ·甲状旁腺素(PTH)对钙、磷代谢的调节第19-20页
     ·1,25(OH)_2D_3对钙、磷代谢的调节第20页
     ·降钙素(CT)对钙、磷代谢的调节第20-21页
     ·其激素对钙、磷代谢的调节第21页
   ·钙、磷代谢紊乱第21-22页
     ·高血钙症第21页
     ·低血钙症第21-22页
     ·高磷血症第22页
     ·低磷血症第22页
   ·常见钙、磷代谢紊乱疾病第22-23页
     ·佝偻病第22-23页
     ·骨软症和纤维素性骨营养不良第23页
     ·牛产后血红蛋白尿病第23页
     ·母牛倒地不起综合症第23页
 3 STC-1研究进展第23-29页
   ·STC-1概述第23-24页
   ·STC-1的结构第24-25页
   ·STC-1的分布第25页
   ·STC-1的受体第25-26页
   ·STC-1的功能第26-29页
     ·STC-1与钙、磷的关系第26-27页
     ·STC-1与癌症第27-28页
     ·STC-1与生殖第28-29页
第二章 实验部分第29-60页
 实验Ⅰ:奶牛RTECS的培养第29-39页
  1 实验材料和仪器第29-31页
   ·实验动物及主要实验仪器设备第29页
   ·实验试剂及配制第29-31页
  2 实验方法第31-34页
   ·奶牛RTECs的培养第31-32页
     ·奶牛RTECs的原代培养第31页
     ·奶牛RTECs的传代培养第31页
     ·奶牛RTECs计数及活力测定第31-32页
   ·奶牛RTECs的冻存与复苏第32页
     ·奶牛RTECs的冻存第32页
     ·奶牛RTECs的复苏第32页
   ·奶牛RTECs的增殖曲线的测定第32-33页
   ·奶牛RTECs的鉴定第33-34页
     ·奶牛RTECs的形态学观察第33页
     ·奶牛RTECs的免疫组化第33-34页
  3 实验结果与讨论第34-39页
   ·奶牛RTECs的形态观察结果与分析第34页
   ·奶牛RTECs的增殖曲线的测定结果与分析第34-36页
   ·奶牛RTECs的免疫组化结果与分析第36-37页
   ·实验讨论第37-39页
 实验Ⅱ:钙、磷离子对奶牛RTECS中STC-1MRNA和蛋白表达水平的影响第39-60页
  1 实验材料和仪器第39-41页
   ·实验仪器第39页
   ·主要实验试剂及配制第39-41页
  2 实验方法第41-47页
   ·奶牛RTECs的分组培养第41页
   ·钙、磷离子对奶牛RTECs中STC-1MRNA含量表达水平的影响第41-44页
     ·总RNA提取第41-42页
     ·总RNA的检测第42页
     ·反转录第42-43页
     ·荧光定量PCR测定STC-1mRNA含量的变化第43-44页
   ·钙、磷离子对奶牛RTECs中STC-1蛋白表达水平的影响第44-47页
     ·STC-1蛋白在奶牛RTECs中的表达定位第44页
     ·蛋白样品制备和处理第44-45页
     ·蛋白含量的测定第45页
     ·SDS-PAGE电泳第45-46页
     ·染胶第46页
     ·转膜第46页
     ·免疫反应第46页
     ·化学发光反应第46-47页
   ·数据处理第47页
  3 实验结果与讨论第47-60页
   ·总RNA检测结果第47页
   ·PCR产物电泳结果第47页
   ·荧光定量PCR结果第47-55页
     ·奶牛RTECs中磷离子6h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第48-49页
     ·奶牛RTECs中磷离子12h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第49页
     ·奶牛RTECs中磷离子24h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第49页
     ·奶牛RTECs中磷离子48h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第49-52页
     ·奶牛RTECs中钙离子6h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第52页
     ·奶牛RTECs中钙离子12h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第52页
     ·奶牛RTECs中钙离子24h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第52页
     ·奶牛RTECs中钙离子48h处理组对STC-1 mRNA表达水平的影响第52-55页
   ·奶牛RTECs中STC-1蛋白检测结果第55-57页
     ·STC-1蛋白在奶牛RTECs中的表达结果第55页
     ·考马氏亮蓝染色结果第55-56页
     ·Western-blot方法检测STC-1蛋白结果第56-57页
   ·实验结果分析和讨论第57-60页
     ·磷离子与奶牛RTECs中STC-1的关系第58-59页
     ·钙离子与奶牛RTECs中STC-1的关系第59-60页
第三章 小结第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68页

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