| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第9-25页 |
| 1 牛疱疹病毒的病原学 | 第9-10页 |
| 2 BHV-1分子生物学研究进展 | 第10-12页 |
| 3 流行病学 | 第12-13页 |
| 4 BHV-1侵染细胞的过程 | 第13-14页 |
| 5 临床症状与病理变化 | 第14-15页 |
| 6 牛传染性鼻气管炎的诊断 | 第15-16页 |
| 7 防制 | 第16-19页 |
| 8 单克隆抗体技术及其研究进展 | 第19-20页 |
| 9 小结 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-25页 |
| 研究一 牛疱疹病毒Ⅰ型GB基因的原核表达 | 第25-39页 |
| 摘要 | 第25页 |
| Abstract | 第25-26页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| ·病毒、血清、菌种与载体 | 第26页 |
| ·实验主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-32页 |
| ·BHV-1病毒的增殖与浓缩 | 第27页 |
| ·BHV-1病毒基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·BHV-1gB基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·pMD18-T-gB重组质粒的构建 | 第28-29页 |
| ·pET-22b-gB重组质粒的构建 | 第29页 |
| ·gB基因的表达及SDS-PAGE分析 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的大量诱导表达及表达后的处理 | 第30-32页 |
| ·Western-blot分析融合蛋白的反应原性 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-36页 |
| ·BHV-1病毒的增殖 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增gB基因 | 第33页 |
| ·重组质粒pMD18-T-gB的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·pMD18-T-gB重组质粒DH5α菌液的测序结果 | 第34页 |
| ·重组质粒pET-22b-gB的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·gB在大肠杆菌中的诱导表达 | 第35页 |
| ·蛋白包涵体的变性复性及纯化浓缩结果 | 第35页 |
| ·重组蛋白的Western-blot鉴定 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 研究二 抗牛疱疹病毒Ⅰ型GB基因单克隆抗体的制备及初步应用 | 第39-56页 |
| 摘要 | 第39页 |
| Abstract | 第39-41页 |
| 1 材料 | 第41页 |
| ·病毒、蛋白、实验动物和细胞株 | 第41页 |
| ·主要试剂及细胞培养基 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-48页 |
| ·抗原的制备 | 第41-42页 |
| ·免疫小鼠 | 第42页 |
| ·细胞融合 | 第42-43页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第43-44页 |
| ·杂交瘤细胞株的间接免疫荧光鉴定 | 第44-45页 |
| ·杂交瘤细胞株的克隆化 | 第45页 |
| ·腹水的制备及效价检测 | 第45-46页 |
| ·单克隆抗体的稳定性检测 | 第46页 |
| ·单克隆抗体的特异性检测 | 第46页 |
| ·单抗的亚类鉴定 | 第46-47页 |
| ·建立检测BHV-1的双抗体夹心ELISA方法 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-53页 |
| ·20%蔗糖垫底纯化BHV-1病毒液后的电镜观察结果 | 第48页 |
| ·间接ELISA法最佳抗原包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的间接免疫荧光鉴定 | 第49页 |
| ·杂交瘤细胞株的克隆化结果 | 第49页 |
| ·腹水纯化 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体效价的测定结果 | 第50页 |
| ·单克隆抗体的稳定性检测 | 第50页 |
| ·单克隆抗体的特异性检测 | 第50-51页 |
| ·抗体的亚类鉴定 | 第51-52页 |
| ·单抗和BHV-1病毒液最佳工作浓度的确定 | 第52页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法临界值的确定 | 第52页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的特异性检测 | 第52-53页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的应用 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
