| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1. Toll样受体基因家族 | 第9页 |
| 2. TLR4结构及组织分布 | 第9-10页 |
| 3. TLR4基因研究进展 | 第10页 |
| 4. TLRs信号通路 | 第10-12页 |
| ·MyD88依赖途径 | 第11页 |
| ·MyD88非依赖途径 | 第11-12页 |
| 5. LPS作用于TLR4信号通路 | 第12-13页 |
| 6. TLR4通路中的关键基因 | 第13页 |
| ·LPS受体CD14 | 第13页 |
| ·TLR4接头分子MyD88 | 第13页 |
| 7. TLR4通路中的效应炎症因子 | 第13-15页 |
| ·肿瘤坏死因子-α | 第14页 |
| ·白细胞介素-1β | 第14-15页 |
| ·干扰素-α | 第15页 |
| 8. F18大肠杆菌致病性 | 第15页 |
| 9. 苏太猪F18大肠杆菌病抗性和敏感性资源群体 | 第15-16页 |
| 10. 猪遗传抗病的研究意义 | 第16页 |
| 11. 本研究的目的、意义 | 第16-17页 |
| 第二章 猪TLR4基因外显子1多态性分析 | 第17-27页 |
| 1. 试验材料 | 第17-18页 |
| ·试验动物 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要试剂的配制 | 第18页 |
| 2. 试验方法 | 第18-21页 |
| ·DNA提取 | 第18-19页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·PCR扩增 | 第20页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20-21页 |
| ·PCR产物测序 | 第21页 |
| ·统计分析 | 第21页 |
| 3. 试验结果 | 第21-25页 |
| ·引物的扩增效果检测 | 第21页 |
| ·TLR4基因多态性检测结果 | 第21-22页 |
| ·TLR4序列分析结果 | 第22-23页 |
| ·不同猪群体TLR4基因外显子1的基因型及其等位基因频率分析 | 第23-25页 |
| 4. 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 猪TLR4基因的表达及其与大肠杆菌抗性的关系 | 第27-37页 |
| 1. 试验材料 | 第27-28页 |
| ·试验动物 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要试剂配制 | 第28页 |
| 2. 试验方法 | 第28-31页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·引物设计与合成 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-35页 |
| ·总RNA的纯度与完整性 | 第31-32页 |
| ·荧光定量PCR引物常规PCR检测及测序结果 | 第32页 |
| ·荧光定量PCR的熔解曲线 | 第32-33页 |
| ·标准曲线 | 第33页 |
| ·TLR4基因在F18大肠杆菌不同组织间的表达 | 第33-34页 |
| ·TLR4基因在F18大肠杆菌病抗性和敏感性群体间的表达 | 第34-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 LPS诱导条件下TLR4信号通路的基因表达变化 | 第37-46页 |
| 1. 试验材料 | 第37页 |
| ·试验细胞 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要试剂的配制 | 第37页 |
| 2. 试验方法 | 第37-39页 |
| ·细胞培养 | 第37-38页 |
| ·镜检 | 第38页 |
| ·LPS诱导IPEC | 第38页 |
| ·细胞RNA提取 | 第38-39页 |
| ·引物设计 | 第39页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第39页 |
| ·数据分析 | 第39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-44页 |
| ·细胞培养 | 第39-40页 |
| ·细胞RNA提取 | 第40页 |
| ·0.1μg/mL LPS诱导IPEC后TLR4信号通路基因的表达量 | 第40-42页 |
| ·1μg/mL LPS诱导IPEC后TLR4信号通路基因的表达量 | 第42-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目 | 第55-56页 |
