| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·有关金纹细蛾的介绍 | 第10页 |
| ·昆虫几丁质及几丁质酶的介绍 | 第10-15页 |
| ·几丁质 | 第10-11页 |
| ·昆虫几丁质酶的类型及分类 | 第11页 |
| ·昆虫几丁质酶的结构域及功能 | 第11-13页 |
| ·昆虫几丁质酶的应用 | 第13-15页 |
| ·几丁质酶活性测定方法 | 第15页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第15-16页 |
| ·本研究课题的来源和主要内容 | 第16-18页 |
| 第二章 金纹细蛾Ⅰ型几丁质酶的原核表达及纯化 | 第18-46页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·材料及菌株 | 第18-22页 |
| ·相关试剂及工具酶 | 第18页 |
| ·相关试剂及缓冲液的配制 | 第18-20页 |
| ·表达载体及菌株 | 第20-21页 |
| ·主要设备及仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| ·重组载体的构建 | 第22-30页 |
| ·表达条件的优化 | 第30-33页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·结论 | 第33-44页 |
| ·原核表达重组载体的构建 | 第33-37页 |
| ·表达条件的优化 | 第37-43页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 金纹细蛾Ⅰ型几丁质酶在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达及纯化 | 第46-62页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·相关材料及试剂 | 第46-47页 |
| ·菌株及质粒 | 第46页 |
| ·药品与试剂 | 第46-47页 |
| ·溶液的配制 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-56页 |
| ·LrCHT5基因的克隆及纯化 | 第47-48页 |
| ·供体质粒pFastBac-LrCHT5的构建及检测 | 第48-50页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid-LrCHT5的构建及鉴定 | 第50-52页 |
| ·重组杆状病毒的获得及鉴定 | 第52-54页 |
| ·LrCHT5-(His)_6的表达及纯化 | 第54-56页 |
| ·结论 | 第56-60页 |
| ·LrCHT5目的基因的扩增及纯化 | 第56-57页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid-LrCHT5的构建及鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组杆状病毒的获得及鉴定 | 第58-59页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第59-60页 |
| ·LrCHT5蛋白的纯化及纯度的检测 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 酶学活性测定 | 第62-74页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·相关材料及试剂 | 第62-63页 |
| ·菌株及试剂 | 第62页 |
| ·溶液的配制 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-65页 |
| ·4MU标准曲线的绘制 | 第63页 |
| ·蛋白标准曲线的浓度的绘制 | 第63-64页 |
| ·酶活力的测定 | 第64页 |
| ·最适pH及pH稳定性测定 | 第64页 |
| ·最适温度及热稳定性测定 | 第64-65页 |
| ·动力学分析 | 第65页 |
| ·金属离子及有机化合物对酶活力的影响 | 第65页 |
| ·LrCHT5的抑菌活性检测 | 第65页 |
| ·结论 | 第65-73页 |
| ·4MU标准曲线的绘制 | 第66页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第66-67页 |
| ·最适pH及pH稳定性测定 | 第67-68页 |
| ·最适温度及热稳定测定 | 第68-69页 |
| ·动力学分析 | 第69-71页 |
| ·金属离子及有机化合物的影响 | 第71-72页 |
| ·LrCHT5抑菌活性的检测 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文与专利 | 第80页 |
